Geldex 75 PG Chromatography Column　75 PG凝胶层析预装柱

Geldex 75 PG Chromatography Column是将介质Geldex 75 PG装填于层析柱YXK16/70中的即用型凝胶过滤层析柱，省去了自行装填层析柱的麻烦和柱效不高的风险，介质和层析柱的完美结合使层析变得高效简单。Geldex 75 PG Chromatography Column凝胶过滤预装柱广泛用于实验室工艺开发、样品的少量制备以及检测，适合于多肽、重组蛋白以及及抗体等领域的生物分子的分离纯化。

此凝胶过滤预装柱具有以下特点：①即开即用；②流速快；③分辨率高；④柱床体积稳定；⑤物理化学耐受性好。

产品性质

运输和保存方法

1.使用后的Geldex 75 PG Chromatography Column应储存于 20%乙醇中，为了防止乙醇挥发以及微生物生长，建议3个月更换一次新鲜的20%乙醇。

2.放置在4~8℃冷库中保存效果更好；有效期5年。

注意事项

1. 层析柱外壳使用的是聚丙烯酸材质，不可使层析柱外壳接触浓度大于40%的有机溶剂，如乙醇、乙腈、丙酮等，也不可使用高浓度的有机溶剂如70%乙醇擦拭外壳，否则会导致风裂。

2. 层析柱堵塞严重的时候可以使用反向清洗的方法，但是反向冲洗需要降低流速至正常流速的一半以下。

3. 层析柱体为玻璃制品，使用时应轻拿轻放，防止摔碎或影响柱效。

4. 为了避免堵塞层析柱，所有样品和缓冲液需要用 0.45 μm 膜过滤。

5. 为了得到良好的分离效果，避免缓冲液与层析柱有太大温差变化。

6. 层析柱放置在无阳光直射的地方。

7. 层析柱可以放在层析冷柜中使用，但是需要适当降低流速。

8. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

9. 本产品仅作科研用途！

使用方法

1 将层析柱接入层析系统

1）打开包装，取出层析柱

2）检查层析柱是否完好，以及层析柱在运输过程中是否进气变干。

3）将层析柱垂直固定在层析系统旁，注意柱头向上。

4）启动层析系统，确保排净层析系统内的气泡，并设置层析系统报警压为 0.3 MPa，然后调整并保持 0.2 mL/min 的流速运行。

5）打开层析柱的上下封口帽，抬高底部出口管道的出口位置，使其高于顶部进口管道的进口位置，观测到管道进口处没有了气泡后将进口管道与层析系统连接。

2 纯化流程

2.1 层析柱预处理

对层析柱进行预处理，即采用0.1~0.5 M的NaOH对层析柱处理4小时以上以达到清洗、消毒和去除热源的目的，再用蒸馏水冲洗2个柱体积。

2.2 平衡

使用2~3倍柱体积的上样平衡液平衡柱子，建议在平衡缓冲液中加入至少0.15 M的NaCl。

2.3 样品准备

样品需要过0.45 μm以下的滤膜，粘度太高时可以适当稀释，蛋白浓度一般不超过70 mg/mL。

2.4 上样

一般加载 0.5~2% 柱体积的样品量，根据分离效果可以适当调整上样体积。 

2.5 洗脱

继续用平衡缓冲液冲洗层析柱，收集流出的不同组分，至不再有生物分子流出，一般需要1~1.5个柱体积。

3 清洗与再生

（1）先用1倍柱体积的 1 M NaCl 去除。

（2）对于变性的蛋白的去除，采用 1 M NaOH以20 cm/h流速冲洗2个柱体积。

（3）对于脂类或脂蛋白的去除，用 4倍柱体积的70%乙醇或30%异丙醇清洗，需注意有机溶剂的浓度以梯度的方式逐渐增加，否则容易产生气泡。

（4）对于无机污染物的去除，采用0.5 M的醋酸冲洗2个柱体积。

（5）最后用4倍柱体积的蒸馏水冲洗。

                                          HB220526