药典方案集锦 | 按典索骥-聚维酮系列二：2-吡咯烷酮方法深度解析

精彩回顾

上期分享我们深度探讨了聚维酮中杂质 N-乙烯-2-吡咯烷酮的解决方案，了解到 2025 版《中国药典》、USP、EP 中 N-乙烯-2-吡咯烷酮分析方法完全一致，而 USP、EP 方法中最大的特点是通过阀切换对样品进行在线预处理，从而实现样品在线净化。

本期我们将继续以 2025 版《中国药典》更新的质量标准为基础，同时参考 USP 和 EP 标准方法，探讨聚维酮中另一液相检查项 2-吡咯烷酮解决方案。

各国药典标准对比

对比各国药典中 2-吡咯烷酮检测方法，我们发现 USP 和 EP 的色谱条件完全一致，并且均采用在线自动阀切换方案反冲预柱（Online SPE）；相比之下，中国药典色谱条件差异较大：未提及预柱反冲方案，其流动相组成、系统适应性要求略有不同，对照液浓度、进样体积等条件不同。

中国药典、USP 和 EP 具体方法对比如下：

方案一：参照 25 版《中国药典》方法，设置如下液相分析方法：

分析系统：

色谱条件：

在此条件下，运行 2-吡咯烷酮对照溶液和聚维酮样品溶液，结果如下：对照溶液 2-吡咯烷酮（2-VP）连续运行 6 针，峰面积 RSD% 为 0.08%，符合药典 2.0% 以内的限度要求；对照系列溶液在（10.06-120.60）μg/mL 浓度范围内线性良好（r>0.9999）。

图 1. 2-吡咯烷酮对照溶液色谱图和精密度结果

图 2. 2-吡咯烷酮线性溶液色谱图和标准曲线（r=0.99991）

图 3. 2025 版药典聚维酮样品溶液色谱图

综合上述数据得出：按照 25 版中国药典方法测试聚维酮样品，可有效分析杂质 2-吡咯烷酮。

在 USP、EP 收载的标准方法中，2-吡咯烷酮采用 OnlineSPE 功能，先将主成分聚维酮保留在预柱中，通过阀切换，实现分析柱测试样品中杂质组分，主成分聚维酮被流动相反冲至废液，有效保护了色谱柱。

方案二：USP、EP OnlineSPE 色谱方法：

分析系统：

清洗系统：

色谱条件：

图 4. 阀切换示意图（切阀时间：2 分钟）

在 USP、EP 方法条件下，运行 2-吡咯烷酮对照溶液和聚维酮样品溶液，结果如下：2-吡咯烷酮（2-VP）对照液连续运行 6 针，其峰面积和保留时间的精密度均在 0.2% 以内，峰拖尾因子 1.4，符合药典要求。

图 5. 对照溶液色谱图和精密度结果

图 6. OnlineSPE 法聚维酮样品溶液色谱图

按照 USP、EP 标准方法测试聚维酮样品（不切阀），在 2-吡咯烷酮杂质出峰后，流动相设置为梯度洗脱，如下图色谱图所示，在高比例有机相条件下，可将吸附在色谱柱中的主成分洗脱出来，由此证明：在当前药典条件下，没有 OnlineSPE 样品在线处理时，色谱柱中吸附了高浓度的低极性组分，长此以往使用，将会严重损害色谱柱寿命。

图 7. 聚维酮样品色谱图

以聚维酮样品 K25 为例，采用 USP、EP 不切阀方案和 OnlineSPE 方案对比研究发现：相同样品，两种方案所得杂质峰面积一致，证明 OnlineSPE 方案对杂质分析无损失，结果真实可靠；同时，采用在线自动阀切换方案对样品进行 OnlineSPE 处理，去除不需要的主成分至废液，保留杂质组分进行分析测试，真正达到了降低液相分析系统和色谱柱损耗的效果。

结语

采用《中国药典》收载方法，搭配 Agilent XDB-C18 色谱柱，对聚维酮中杂质 2-吡咯烷酮进行测试，结果符合药典规定。

USP、EP 中的 OnlineSPE 联合分析测试方案，可将预柱中聚维酮组分反冲至废液。该方案在不改变药典既定方法的基础上，增加 OnlineSPE 样品处理步骤，其分析方法和药典要求完全一致。OnlineSPE 方案的优势在于，既能保护液相分析系统免受污染，又能精准重现药典方法的分析结果，真正实现了净化系统和有“法”可依的双赢效果。

标签：1260 Infinity III 四元泵