从 2025 年“微博热搜”到 2025 版“中国药典”——安捷伦二维液相平台为维生素 D 软胶囊杂质分析领前沿

今年年初，国家卫健委发布《2024 年中国居民营养与慢性病状况报告》，再次将“维生素 D 缺乏”推至公共健康话题的前排。几乎同一时间，多个社交平台热议“每日补充 400 IU 是否足够”“深海鱼油与 VD 同服安全性如何”“哪个品牌的 VD 产品性价比更高”。公众的关注焦点迅速从“补多少”延伸到“补得纯不纯、稳不稳”。面对日趋严格的监管诉求与消费者的品质期待，制药企业亟需用数据回应——软胶囊中的维生素 D 及其有关物质，能否被精准、可重复、高效地测定？

安捷伦为您给出了一份“近似标准”的答案：基于 Agilent 1260 Infinity III 平台的中心切割在线反相二维液相色谱法（RP x RP 2D-LC），首次在维生素 D 软胶囊产品中实现维生素 D3、前维生素 D 与 5 种关键杂质的一次进样、全分离、定量检测，让“极低含量”“极相似结构”“极易被基质掩盖”的分析难题同时迎刃而解。

图 1. 维生素 D3 及其有关物质化学结构

为什么传统方法“难测准”？

维生素 D3 在光、热条件下极易转化为前维生素 D3、反式维生素 D3、速甾醇及光甾醇等同分异构体。这些杂质与主成分结构差异极小，紫外吸收特征又高度重叠；软胶囊内容物常以大豆油、玉米油、橄榄油及鱼肝油等基质为载体，高浓度甘油三酯导致强背景干扰。目前国外药典或 25 版中国药典对于 VD 复杂制剂中有关物质的检测采用离线制备的方法，无论是正相还是反相制备，要么因样品前处理步骤繁多而回收率波动，要么因基质共流出而分离度不足，最终使得“检出”与“准确定量”之间始终存在一条难以逾越的“障碍”。

安捷伦 2D-LC：如何实现“测得准”

单中心切割在线二维液相的核心思路，是把“净化”与“分离”在同一套系统中里按出峰顺序完成：

初始阶段，阀位置为 1-2，一维色谱柱完成维生素 D 制剂的样品净化，同时二维色谱柱流动相平衡；

转移阶段，阀位置为 6-1，一维色谱将含有维生素 D 及其有关物质的馏分转移至捕集柱中；

二维分析阶段，阀位置为 1-2，二维泵使用高比例的有机相的流动相将捕集柱柱上的样品转移至二维色谱柱进行分离，实现维生素 D 及其有关物质的分离和分析。

图 2. 在线中心切割二维柱切换系统示意图

数据背后的真相与价值

图 3. 混合标准品溶液的第一维和第二维分离谱图

（1.杂质 A；2.杂质 D；3.前维生素 D3；4.杂质 E；5.维生素 D3；6.杂质 C；7.杂质 B)

图 4. 维生素 D 滴剂不同制剂样品分析谱图及二维分离放大谱图（28min~70min）

1．杂质 A（impurity A）2．杂质 D（impurity D）3．前维生素 D3（pre-vitamin D3）4．杂质 E（impurity E）5．维生素 D3（vitamin D3）6．杂质 C（impurity C）

图 3 是混合标准品的一维和二维色谱图，图 4 为维生素 D 软胶囊新制样品及加速 6 个月制剂样品的谱图。利用中心切割二维液相色谱方法可以有效去除基质成分干扰，实现主成分和目标 5 个杂质成分的分离分析；通过对比加速稳定性测试样品，可见杂质 D（反式-VD3）与杂质 E（速甾醇）的含量升高，该方法可实现维生素 D3 的 6 种主要有关物质的分析，除 25 版中国药典规定的前 VD、反式 VD 和速甾醇之外，还增加了 EP 欧洲药典中提到的异速甾醇和光甾醇等，为维生素 D3 制剂的质量标准提升及生产工艺优化提供了可靠的技术支撑。

从单品种应用到 2DLC 平台化方案

维生素 D 软胶囊有关物质分析检测是安捷伦二维液相应用方案的“冰山一角”。安捷伦早已将二维液相方法拓展至不同领域：

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结语

公众对营养补充剂的信任，来自企业对质量控制的每一分投入；而每一次投入，都需要可靠、合规、可转移的分析工具作为底座。安捷伦 1260/1290 Infinity III 二维液相平台，用与国内外药典同源的严谨与领先行业的分离度和灵敏度，为维生素 D 软胶囊的杂质分析立下新的标杆——让“热搜”不再只是话题，而是成为推动标准升级、守护消费者健康的起点。

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