2025-04-25 14:12:35多角度光散射检测器
多角度光散射检测器是一种高效液相色谱检测器,它利用不同角度的散射光信号来检测溶液中颗粒的大小、形态和浓度。该检测器无需样品预处理,可直接对样品进行分析,具有灵敏度高、重现性好、适用范围广等优点。它广泛应用于生物医药、高分子材料、纳米材料等领域,用于分析蛋白质、多糖、病毒、聚合物等大分子物质的分子量分布和颗粒形态。

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2022-09-18 16:35:00天然疏水相互作用色谱与多角度光散射联用优化大肠杆菌全长SARS-CoV-2核衣壳蛋白的制备
Wyatt 专 题期刊天然疏水相互作用色谱与多角度光散射联用优化大肠杆菌全长SARS-CoV-2核衣壳蛋白的制备严重急性呼吸综合征冠状病毒2(SARS-CoV-2)的核衣壳蛋白(NP)在病毒生命周期的几个阶段中具有重要作用,并且在感染过程得到大量表达,使其成为诊断过程中理想的靶蛋白。该蛋白质具有强烈的二聚化以及与核酸相互作用的趋势。细胞匀浆通过核酸酶处理和一系列下游处理 (DSP) 步骤获得纯化。天然疏水相互作用色谱法与多角度光散射检测(HIC-MALS)联用的分析方法可以监测整个纯化过程中样本的碎片化和多聚化。优化后的工艺可以让每升样本发酵生产730mg纯化的NP,相当于细胞裂解产率的77%。HIC-MALS方法证明了NP 产品的生产纯度可以达到 95%。通过尺寸排阻与多角度激光光散射检测技术联用(SEC-MALS)系统分析进一步证实NP主要部分的分子量与二聚蛋白一致。肽图质谱和宿主细胞特异性酶联免疫吸附测定证实了产品的纯度,残留杂质为少量内源性物质。优化后的HIC-MALS方法可以监测产品纯度,同时获取其分子量,并提供与已有的SEC-MALS分析方法互补的正交信息。通过扩展变量来调整HIC模式中的选择性,可以在SEC上实现更高的分辨率。
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2022-01-26 16:13:03【知识库】为什么GPC需要光散射?
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2023-01-04 16:50:04【AM-AN-22025A】标准粒子在光散射研究中的应用
全文共1834字,阅读大约需要6分钟关键词:标准粒子;米氏散射光的散射(scattering of light)是指光通过不均匀介质时一部分光偏离原方向传播的现象。偏离原方向的光称为散射光。散射光频率不发生改变的有瑞利散射、米氏散射和大粒子散射;频率发生改变的有拉曼散射、布里渊散射和康普顿散射等。而标准粒子在光散射研究领域一般研究的是粒子的瑞利散射、米氏散射和大粒子散射,这三种散射划分是根据入射光λ与散射粒子的直径d之间的比例大小来确定的:①当散射粒子的直径d与入射光波长λ之比(d/λ)很小,即数量级显著小于0.1 时,则属于瑞利散射,散射光强与波长的关系符合瑞利散射定律,即散射光强与入射光的波长四次方成反比,与粒径的六次方成正比。②当散射粒子粒径与光波长可以比拟(d/λ的数量级为0.1~10)时,随着粒子直径的增大,散射光强与波长的依赖关系逐渐减弱,而且散射光强随波长的变化出现起伏,这种起伏的幅度也随着比值d/λ的增大而逐渐减少,这种散射称为米氏散射。③当粒子足够大时(d/λ>10),散射光强基本上与波长没有关系,这种粒子的散射称为大粒子散射,也可称之为衍射散射(菲涅尔衍射与夫琅禾费衍射)。瑞利散射可以说是米氏散射理论模型在小粒子端的近似形式,而衍射散射也可以说是米氏散射理论模型在大粒子端的近似形式,接下来我们将详细了解标准粒子应用于米氏散射理论对其光散射特性研究中,入射光波长、标粒直径以及入射光偏振角对散射光强的影响。1入射光波长对散射光强分布的影响图1.1 是相对折射率m=1.589/1.333,标准粒子直径d=2μm,入射光偏振角φ=45°时,由Mie散射理论及其他相关公式编程计算得到的散射光强与散射角之间的变化关系曲线。对于直径为2μm的聚苯乙烯微球在水中的散射情况,入射光偏振角为45°时,随着入射波长λ的增大,散射光强由主要集中在前向小角度内(波长λ为0.2um时散射光强主要集中在10°散射角内)逐渐变为集中在前向稍大角度内(波长λ为0.8um时散射光强主要集中在30°散射角内),若继续增大波长,散射光强集中的角度也将继续增大。从图1.1可以看出,波长较短时散射光强主要集中在前向小角度内,并且波长越短散射光强集中的角度越小。图1.1:当m=1.589/1.333,d=2μm,φ=45°时,对应于不同的波长,散射光强与散射角间的关系曲线。聚苯乙烯微球直径对散射光强分布的影响图2.1是用可见波段中的0.65μm波长的入射光,在偏振角为45°时,聚苯乙烯微球在水中的散射光强与散射角的变化关系曲线。由图可以看出,微粒直径越大散射光强越集中分布在前向小角度内,粒径大于2μm的粒子的散射光强主要集中在前向散射角约20°内,因此在此种条件下收集前向小角度的散射光强即可获得粒子的较好信息。图2.2是入射光波长为6μm,偏振角45°时,聚苯乙烯微球在空气中的散射光强与散射角的变化关系曲线。由图可知,所用波长较大时,较大粒子的散射光强不再集中在前向小角度内而是集中的角度逐渐变大,例如粒径大于8μm的粒子的散射光强主要集中在前向散射角约40°内。图2.1:当m=1.589/1.333, λ=0.65μm, φ=45°时,对应于不同的微粒直径,散射光强与散射角间的关系曲线。 图2.2:当m=1.589, λ=6μm, φ=45°时,对应于不同的粒径,散射光强与散射角间的变化曲线入射光偏振角对散射光强分布的影响图3.1是入射光波长为0.65μm,直径为0.2μm的聚苯乙烯微球在空气中的散射光强与散射角的变化关系曲线。由图可以看出,此种情况下入射光的偏振角不同散射光强与散射角间的关系曲线有很大变化,散射光强分布比较分散,说明此时散射光强的角分布与偏振光的偏振角有关。图3.1 当m=1.589, λ=0.65μm, φ=0.2μm时,对应于不同的偏振角,散射光强与散射角间的变化曲线。结论以上为应用米氏散射理论针对聚苯乙烯微球标准粒子的光散射性质进行的分析,得出以下结论:(1)波长较短时散射光强主要集中分布在前向小角度内,并且波长越短散射光强集中分布的角度越小。收集前向小角度的散射光可大致反映粒子散射信息。(2)进行聚苯乙烯微球标粒散射方面的研究时,应该选择可见光波段中波长较短的作为光源,这样既可以得到较好的粒子散射信息,又可以避免光源对人体造成伤害。(3)粒子直径较大时散射光强主要集中分布在前向小角度内,并且粒子直径越大散射光强越集中分布在小角度内;若所用波长较大时,较大粒子的散射光强不再集中分布在前向小角度内而是集中分布的角度逐渐变大。参考资料1.李建立.基于光散射的微粒检测.烟台大学理学院硕士论文,2009:22-25.
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2022-02-25 15:19:12GPC与光散射检测器联用测定普鲁兰多糖的绝对分子量及分子量分
普鲁兰多糖是一种由出芽短梗霉发酵所产生的类似葡聚糖、黄原胶的胞外水溶性粘质多糖,由于该多糖独特的结构和性质,在医药、食品、石油、化工等行业具有广泛的应用前景。因其在自然界可被微生物降解利用,不会引起环境污染,故被誉为无公害塑料。本应用是将HLC-8420GPC凝胶渗透色谱系统和LenS3多角度光散射检测器联用,采用TSKgel GMPWXL色谱柱对普鲁兰多糖标准品的绝 对分子量、分子量分布及回转半径 (Rg) 进行了表征。分析条件仪器:  HLC-8420GPC & LenS3色谱柱: TSKgel GMPWXL (7.8mmI.D.×30cm, 13μm)流动相:  0.1 M NaNO3流速:  1.0 mL/min样品浓度:  1.095 mg/mL进样量:  100 μL温度:  40℃样品:  普鲁兰多糖分析结果图1  多检测器测试谱图(紫色曲线为示差(RI)检测器信号,红色曲线为10°角光散射(LALS)检测器信号,蓝色曲线为90°角光散射(RALS)检测器信号,绿色曲线为170°角光散射(HALS)检测器信号)图2 绝 对分子量、回转半径(Rg)及RI随流出时间曲线(紫色曲线为示差(RI)检测器信号,绿色曲线为绝 对分子量,蓝色为回转半径(Rg)随流出时间曲线)图3  分子量分布和累积分布曲线(黄色曲线为分子量分布曲线,紫红色曲线为累积分布曲线)
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2022-09-10 14:33:21光散射技术在疫苗和基因载体中的应用
光散射技术解决方案:疫苗和基因载体的关键质量属性表征和质量控制01会议详情主题:光散射技术在疫苗和基因载体中的应用时间:2022年9月15日 19:00内容:SEC-MALS、DLS原理讲解DLS、HT-DLS实例应用:AAV/LVSEC-MALS的AAV分析(Vg/Cp)方法FFF-MLAS与SEC-MALS的对比:LNP分析02参加会议会议链接:https://paj.h5.xeknow.com/sl/2gT5z2或扫码加入会议
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