- 2025-01-10 17:02:23纯化小课堂
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纯化小课堂问答
- 2023-04-04 15:58:48【THUNDER小课堂】脑神经发育
- 整个小鼠胚胎的图像：（左）原始宽场成像结果和（右）应用Large Volume Computational Clearing（LVCC）后的成像结果。图片来源：A. Popratiloff和Z. Motahari，美国乔治·华盛顿大学。本文介绍了如何使用THUNDER Imager 3D Cell Culture和Large Volume Computational Clearing（LVCC）对小鼠胚胎快速、高对比度成像，实现了对轴突生长和脑神经发育的研究。许多在发育早期阶段损害神经回路发育的遗传性疾病被认为会对行为造成干扰。用小鼠模型研究早期神经发育的细胞变化、定义与人类疾病相似的行为及潜在发育机制，是非常困难的。而鉴别发育的神经元回路中三叉神经（其参与面部感觉和运动机能）轴突生长的早期分化，使得这些困难迎刃而解。简介人们普遍认为，很多遗传性疾病都通过损害神经回路发育的早期阶段来对行为产生干扰[1]。事实证明，在模型动物中分辨早期神经发育中细胞的此类变化具有一定的难度。用与人类遗传性疾病中临床显著缺陷相似的基因突变小鼠模型来定义行为、神经回路和潜在发育机制，是非常困难的[1]。检测单个神经元初始分化中的变化难以实现。这些挑战可通过确定发育的神经回路中三叉神经这一关键组分的轴突生长的早期分化来解决[1]。通过着眼于参与面部感觉及运动机能如哺乳、进食、咬、咀嚼和吞咽等的三叉神经（脑神经V），以及轴突生长和原生传导通路，可以对使用组织学处理可能会缺失的三维环境进行研究[1]。本文介绍如何使用THUNDER Imager 3D Cell Culture和Large Volume Computational Clearing（LVCC）[2,3]对小鼠胚胎快速、高对比度成像，以帮助进行脑神经发育研究。挑战如要以实用高效的方式对整个小鼠胚胎成像，快速、清晰的高对比度3D成像解决方案，对于重要细节展示和解析大有益处。相较于激光共聚焦成像，可在很短的时间内一次性采集到完整胚胎的成像结果。传统宽场显微成像速度快，检测灵敏度高，但是对厚标本的成像，如小鼠胚胎，通常会由于非焦平面信号的影响，呈现模糊的成像结果，降低图像对比度[2,3]。方法使用THUNDER Imager 3D Cell Culture对小鼠胚胎成像。使用抗βIII微管蛋白（Tuj1）抗体对胚胎的神经系统和脑神经进行染色。结合BABB透明化处理，即可对整个胚胎中的神经系统进行三维结构成像。图1中的图像使用数值孔径（NA）0.75、工作距离700μm的20x多浸液物镜采集。该图像由32个视野拼接组成，成像深度为672 μm（337层切），采集了完整的胚胎结构。数据采集总时长为18分钟。结果通过LVCC和Instant Computational Clearing（ICC）将宽场成像固有的非焦面模糊信号清除[2,3]。之后，再使用徕卡自适应式反卷积技术来增强三维特征结构的分辨率[4]。这种成像模式便于观察胚胎的神经结构以及胚胎的整体布局中更有价值的神经元定位。图1：展示整个小鼠胚胎的俯视图，显示原始数据（A）与应用LVCC后（B）的差异。根据相对物镜深度进行颜色标识的胚胎的角度视图，其中zui大深度为672 μm。C）应用LVCC后的脑部侧视图，显示了沿Z轴方向的精密细节。图片来源：Anastas Popratiloff博士和Zahra Motahari博士，乔治·华盛顿大学纳米制造与成像中心（GWNIC），美国华盛顿特区。结论与传统的宽场成像不同，THUNDER技术Large Volume Computational Clearing（LVCC）[2,3]在对小鼠胚胎中的脑神经发育成像时，显著增强了图像对比度，对精密细节有更好的解析。References：1.Z. Motahari, T.M. Maynard, A. Popratiloff, S.A. Moody, A.-S. LaMantia, Aberrant early growth of individual trigeminal sensory and motor axons in a series of mouse genetic models of 22q11.2 deletion syndrome, Human Molecular Genetics (2020) vol. 29, iss. 18, pp. 3081-3093, DOI: 10.1093/hmg/ddaa199.2.J. Schumacher, L. Bertrand, THUNDER Technology Note: THUNDER Imagers: How Do They Really Work? Science Lab (2019) Leica Microsystems.3.L. Felts, V. Kohli, J.M. Marr, J. Schumacher, O. Schlicker, An Introduction to Computational Clearing: A New Method to Remove Out-of-Focus Blur, Science Lab (2020) Leica Microsystems.4.V. Kohli, J.M. Marr, O. Schlicker, L. Felts, The Power of Pairing Adaptive Deconvolution with Computational Clearing: Technical Brief, Science Lab (2021) Leica Microsystems. 相关产品THUNDER Imager 3D Live Cell 和 3D Cell Culture
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- 2023-07-21 11:15:47本生课堂：实验室微量移液器小知识
- 本生课堂：实验室微量移液器小知识 微量移液器是一种标准的实验室设备，用于精确地量取和转移少量液体。市场上有几种类型的微量移液器，可根据以下类型进行分类： 体积：固定或可变体积的微量移液器 操作原理：空气置换或容积式微量移液器。 操作机构：机械或电子微量移液器 通道数：单通道或多通道微量移液器。 学会正确使用微量移液器被认为是一项的实验室技能，它是微生物实验室、医学实验室、大学和研究实验室广泛使用的工具。 微量移液器部件： 尽管微量移液器不尽相同，但所有微量移液器的基本部件都是相同的: 柱塞是微量移液器的最顶端部分，用于调节体积以及将所需量的液体吸入和分配到微量移液器的。柱塞中有两个挡块，用于在正向和反向移液中吸取液体。 弹出按钮：只需按下吸头弹出按钮，即可轻松从微量移液器中取出吸头，而无需接触它们。 容量窗口：调整后的容量显示在容量窗口中(要吸入/分配的容量)。 微量移液器轴：是充满空气的管子。推动活塞排出杆中包含的一定体积的空气，释放活塞允许这些空气返回杆。 微量移液器吸头：是附在微量移液器上的吸头，用于收集液体，然后将其从一个地方转移到另一个地方。不同尺寸的吸头用于收集不同体积的液体。 微量移液器的类型： 根据体积的微量移液器类型 固定体积微量移液器：固定体积微量移液器的体积不能改变，每次分配时分配相同数量的液体。 可变体积微量移液器：可以根据微量移液器的容量(特定的最小和体积范围)调整要吸取或分配的液体体积。 根据操作机制的微量移液器类型： 机械移液器中的柱塞压力和真空被电动移液器中的按钮所取代，并且可以对电动移液器进行编程以遵循您的工作协议。 排气式微量移液器：当柱塞被压下时，它会下降到仪器内部以排出空气。排出的空气量等于吸入/分配的液体量。 容积式微量移液器：柱塞与样品直接接触，在这些微量移液器中，包含筒和柱塞(如注射器)。 微量移液器如何工作? 当柱塞被按下时，由于微量移液器吸头中的液体也被推出的力，微量移液器套管内的空气被排出。 当活塞向上运动时，在活塞腾出的空间内产生真空。这导致吸嘴中的空气上升以填充空置空间，然后吸嘴中的空气被吸入吸嘴的液体代替。 【本文标签】 移液器 吸头 移液器吸头 微量移液器 本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。
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