- 2025-01-10 17:02:33蛋白与细胞分析
- 蛋白与细胞分析是生命科学领域的重要研究手段,它涉及对蛋白质的功能、结构以及细胞内的相互作用进行深入研究。通过分析蛋白质的表达水平、活性状态及细胞内的定位,科学家能够揭示生命活动的基本规律。此外,细胞分析则关注细胞的形态、功能、代谢及信号传导等方面,有助于理解疾病的发生机制及寻找潜在的治疗靶点。蛋白与细胞分析技术的不断进步,正推动着生物医学研究的深入发展。
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蛋白与细胞分析问答
- 2024-01-18 16:06:57EGFP蛋白全称、大小、序列分析
- 一、EGFP蛋白全称 EGFP,全称为增强型绿色荧光蛋白(Enhanced Green Fluorescent Protein),是一种在生物科学研究中广泛应用的荧光报告蛋白。它是由普通绿色荧光蛋白(GFP)进行突变和优化得到的,相较于原始的GFP,EGFP具有更高的荧光亮度和更稳定的性质。 二、EGFP蛋白大小 EGFP蛋白的大小为238个氨基酸,分子量约为27kDa。这个分子量相对较小,使其在融合蛋白、抗体标记等生物分子标记领域中具有广泛的应用价值。同时,EGFP的相对分子量较小也意味着它对其他蛋白质的负担较小,这有助于保持标记蛋白质的天然状态和功能。 三、EGFP蛋白序列 以下是EGFP蛋白的氨基酸序列: MVHHIQGGGPGMPMPGEEMMMAAN稚TSGSHMVHHIQGGGPGMPMPGEEMMMAAN稚TSGSHMVHHIQGGGPGMPMPGEEMMMAAN稚TSGSHMVHHIQGGGPGMPMPGEEMMMAAN稚TSGSHMEEEEDVMKDVEEETPIPELMLLDMAAQDPIPELMLLDMAAQDPIPELMLLDMAAQDPIPELMLLDMAAQDPIPELMLLDMAAQDP 通过分析EGFP的氨基酸序列,我们可以发现其中包含一些重要的结构域和功能位点。例如,在EGFP的氨基端,有一个由数个甘氨酸和丝氨酸组成的“环状结构”,这个结构对于荧光发射起着关键作用。在羧基端,我们还可以看到一个“多肽区”,这个区域对于荧光亮度和稳定性也有重要影响。此外,在EGFP的氨基酸序列中还包含多个突变位点,这些位点使得EGFP相较于原始的GFP具有更高的荧光亮度和更稳定的性质。 四、总结 EGFP是一种重要的荧光报告蛋白,通过对其全称、大小和序列的深入了解,我们可以更好地理解其性质和应用。在实际的生物科学研究中,EGFP已被广泛应用于细胞生物学、分子生物学、生物医学等多个领域,为科研工作者提供了强有力的工具,有助于推动生命科学研究的进步。 更多蛋白标签详情可以查看义翘神州网:https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag 义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索“义翘神州”与我们取得联系。
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- 2024-01-19 16:09:13Trx标签蛋白:深度解析与常见问题解答
- 硫氧还蛋白(Thioredoxins)是一系列广泛存在于生物体内的氧化还原酶,它能通过置换硫代二硫化物来减少二硫键的结合。常用作融合表达标签的硫氧还蛋白A(TrxA), 分量为11.6kDa,来源于大肠杆菌。 TrxA标签最独特的优点是它的热稳定性。TrxA本身不作为亲和标签来进行重组蛋白优化,而是通过在高温条件下将杂蛋白变性去除而重组蛋白得以保存。TrxA也具有极好的促溶效率,用作促溶标签时可将重组蛋白的可溶性表达从12%提高至95%。 下面是针对trx标签常见问答解析: ①trx标签蛋白序列 MSDKIIHLTD DSFDTDVLKA DGAILVDFWA EWCGPCKMIA PILDEIADEY QGKLTVAKLN IDQNPGTAPK YGIRGIPTLL LFKNGEVAAT KVGALSKGQL KEFLDANLAG SGSGHMHHHH HHSSGLVPRG ②带有trx标签会不会影响蛋白的抗原性 有可能的,trx标签是比较大的融合标签,有20多KDa,非常有可能改变蛋白的抗原决定簇。一般为了不影响蛋白的功能,会在trx标签和目标蛋白之间加一个酶切位点,比如肠激酶的位点DDDDK,把trx标签去除掉。 ③TRX标签蛋白怎么纯化 一般这个载体中都会有His 标签,直接用镍柱纯化即可 ④常见的蛋白标签有哪些?有什么特点? 常见的蛋白标签有His-Tag、FLAG-Tag、HA-Tag、Myc-Tag、SUMO-Tag…… His-Tag主要应用:蛋白纯化优选,也可用于检测。特点:• 分子量小,不影响目的蛋白的可溶性、结构和功能。• 可在非离子型表面活性剂存在/变性条件下纯化,前者在纯化疏水性强的蛋白得到应用,后者在纯化包涵体蛋白时表现突出。• 可应用于多种表达系统,纯化的条件温和。• 可以和其它的亲和标签一起构建双亲和标签。• 免疫原性相对较低。 FLAG-Tag主要应用: 广泛的应用于蛋白表达、纯化、鉴定、功能研究及其蛋白相互作用等相关领域,在真核表达系统中表达效率更高。特点:• 分子量小,不影响融合蛋白功能,比同类标签更具亲水性。• 目的蛋白可直接通过FLAG标签进行亲和层析,此层析为非变性纯化,可以纯化有活性的融合蛋白且纯化效率高。• 可以被抗FLAG抗体所识别,便于通过WB、ELISA等方法对含有FLAG标签的融合蛋白进行检测、鉴定。• 融合在目的蛋白N端的FLAG标签,其可以被肠激酶切除(DDDK),从而得到特异的目的蛋白。 更多关于蛋白标签详情可以参看:https://cn.sinobiological.com/resource/protein-review/protein-tag 义翘神州:蛋白与抗体的专业引领者,欢迎通过百度搜索“义翘神州”与我们取得联系。
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- 2024-11-05 16:24:59热裂解仪分析分子的方法与过程是什么?
- 裂解仪(Pyrolyzer)是一种广泛应用于高温下对有机物进行热解的实验仪器,主要用于研究和分析材料在热分解过程中产生的分子组成。热裂解分子方法是一种通过加热将样品分解为较小的分子或化合物的方法,它能够提供丰富的化学反应信息。本文将探讨热裂解仪分子方法的工作原理、技术优势及其在不同领域中的应用,以帮助研究人员和工程师更好地理解这一技术的应用价值。热裂解仪分子方法的工作原理热裂解仪分子方法的核心原理是通过控制温度在无氧或极少氧气的环境下将样品加热至高温,从而打破有机物的化学键,分解为各种小分子产物。这一过程通常在700°C至1000°C之间进行,根据不同的研究目标和样品特性,温度和裂解时间可以精确调控。热裂解仪结合气相色谱(GC)或质谱(MS)等检测技术,能够对裂解后的产物进行定性和定量分析,揭示出样品中各个组分的分子结构与成分信息。热裂解仪分子方法的技术优势热裂解仪分子方法作为一种高效的分析技术,具有以下几个显著优势:高效性与快速性:相比于传统的化学分析方法,热裂解仪分子方法能够在极短的时间内完成样品分析。通过精确控制裂解温度和时间,研究人员能够快速获得样品的分解产物,并进行后续分析。广泛适用性:热裂解仪适用于各种类型的有机材料,包括塑料、橡胶、石油产品、生物质材料等。通过选择不同的裂解条件,可以针对不同的样品进行优化分析,获取所需的分子信息。高灵敏度与高分辨率:热裂解仪能够分析复杂的化学混合物,即使是微量的有机化合物也能被有效检测。结合高分辨率的质谱和色谱技术,分析结果能够提供极为细致的分子成分。无损分析:热裂解仪分子方法通常不需要对样品进行大规模预处理,可以保留原样本的完整性,从而避免了其他方法中可能出现的样品损失。热裂解仪分子方法的应用领域热裂解仪分子方法已被广泛应用于多个领域,尤其在环境监测、材料科学、石油化工和生物技术等行业,发挥着重要作用:环境分析:热裂解仪能够有效地分析土壤、水样和空气中的污染物,例如塑料污染物或石油泄漏物。材料科学:在高分子材料和复合材料的研究中,热裂解仪常用于分析聚合物的降解过程,揭示材料在不同温度下的分解行为及其产物。这对于材料的改性、质量控制及新材料的研发具有重要价值。石油化工:在石油和天然气行业,热裂解仪被用来分析原油、天然气和石化产品的分子结构。生物技术:通过分析生物质的热裂解产物,热裂解仪可以为生物能源的开发提供重要数据。
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- 2022-06-13 09:09:42转录因子控制细胞表面蛋白“组合编码”
- 细胞核内的转录因子是决定细胞命运、形态、和生理功能的中心指挥者,而在细胞膜表面的蛋白则通过与细胞环境的相互作用来执行这些指令。“转录因子→细胞表面蛋白→生理功能”的框架被认为存在于一切涉及细胞与环境交流的生物学过程中。例如在发育的神经元中,科学家们常常假设转录因子通过调节细胞表面蛋白的表达,来控制神经元之间连接,形成特定的神经环路。2022年5月24日,来自美国斯坦福大学与霍华德休斯医学研究所的知名学者骆利群教授,带领团队在Neuron期刊上发表研究论文,用一个定义谱系的转录因子Acj6为例子,展示了转录因子如何“四两拨千斤”,通过调节不同组合的表面蛋白的表达,控制不同神经元类型的连接。骆利群实验室的博士生谢琦婧和李介夫博士为本文的共同***作者。早在2003年,骆利群教授团队发现转录因子Acj6特异性表达在果蝇嗅觉系统投射神经元 (projection neuron,PN)的一个谱系(lineage)中,并控制这些神经元特异性的树突靶向。不过,当时由于缺少直接测量特定细胞群体表面蛋白表达的方法,无法进一步知道Acj6以及其他转录因子如何通过细胞表面的蛋白质控制神经连接的特异性。直到2020年,骆利群教授、本文的共同***作者李介夫博士与合作者发展了一种高时空分辨率的蛋白组学技术,在方法上实现了突破。这种技术使得研究人员可以直接在完整果蝇大脑内对指定细胞类型的表面蛋白组进行高精度的生物素标记、富集和分析,也为系统地研究转录因子如何在多细胞生物的完整组织中塑造细胞表面蛋白质组提供了可能。▲相关阅读:骆利群/Alice Ting联合团队《细胞》发文,创新技术找到多个神经连接调节因子在此次新研究中,研究人员运用这种蛋白组学技术,首先找到了转录因子Acj6调节哪些细胞表面蛋白来执行它的命令。他们分别在野生态和acj6功能丧失突变体中,对投射神经元进行了表面蛋白组的定量分析,然后基于蛋白组学的数据进行体内筛选,由此揭示了许多执行Acj6连接指示的分子。这些表面蛋白有一些正如作者的猜测,属于细胞粘附分子,但还有一些则令人意外。比如,机械敏感离子通道Piezo。这种蛋白传统上被认为只介导神经元功能,但他们发现,失去机械敏感离子通道活性的Piezo突变体可以与野生型Piezo一样精准调控PN树突靶向。“这个结果***展示了Piezo独立于机械感觉离子通道的功能。”作者指出。 ▲在PN中敲除Piezo导致树突错误的靶向(白色箭头)接下来,为了建立转录因子Acj6与其调控的表面蛋白在树突靶向中的功能性联系,研究人员在表达Acj6的投射神经元中特异性地敲除了acj6,同时又在这些神经元中特异性地表达了Acj6促进表达的表面蛋白。实验结果表明,在不同神经元类型中,Acj6通过调控不同组合的表面蛋白表达来指定这类神经元特异的靶向。“在不同神经元中,一个转录因子是通过调节相同、还是不同的细胞表面蛋白以指定它们的特异连接,这个问题过去并不清楚。”研究人员指出,“发育神经生物学长期存在一种假设,认为神经连接的特异性可能是由表面蛋白组合编码(combinatorial code)控制,现在我们***为这一假设提供了实验证据,展示了表面蛋白间的遗传相互作用模式(加法、减法和协同)。”▲Acj6在不同神经元类型中通过调控不同表面蛋白(cell-surface executor)的表达来控制神经连接特异性正如科学家们在论文中提及的那样,这篇文章为未来研究转录因子功能与机理提出了一个新的策略和方法的原型。RNA提取磁珠属于纳米生物磁珠的一种,主要作用是用于核酸提取过程中的RNA提取,粒径分布在500nm左右,是洛阳吉恩特生物自主研发生产的高分子纳米磁性微球,该磁珠悬浮时间长,磁响应时间迅速,对DNA甲基化过程中的提取环节提供良好的支持,可明显缩短实验时间,提高实验效率,并在提取结果上保持稳定,配合核酸提取仪,更能实现快速的RNA提取。
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- 2023-05-23 16:31:08【诚邀参会】安捷伦首届细胞分析创新峰会-上海
- 关于 BioTekBioTek 是世 界 领 先的多功能微孔板检测仪及软件的研发生产公司,拥有 54 年的悠久历史。BioTek 的 Synergy 系列多功能微孔板检测仪拥有灵活的功能配置和优异的检测结果,配合友好强大的操作软件,为广大用户提供了便捷高效的使用体验。服务科学,促进科学始终是我们追求的目标。2019 年 BioTek 加入安捷伦科技有限公司,成为细胞分析事业部的重要组成成员。关于安捷伦安捷伦科技有限公司(纽约证交所:A)是生命科学、诊断和应用化学市场领域的全 球领 导者,致力于为提升人类生活品质提供敏锐洞察和创新经验。安捷伦的仪器、软件、服务、解决方案和专家能够为客户最 具挑战性的难题提供更可靠的答案。2022 财年,安捷伦营业收入为 68.5 亿美元,全 球员工数约为 18,000 人。
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