食品标准更新速递 | 食品中乳铁蛋白的测定

?称量：称取5g（精确至0.01g）试样于烧杯中，加标

?提取：加入适量磷酸盐缓冲液Ⅱ提取，分次将样品转移至 25mL 容量瓶，用磷酸盐缓冲液Ⅱ 定容至刻度，充分混匀后转入离心管，在4 ℃条件下 10000r/min 离心 8min，取样液 10mL 待净化；

?活化：肝素亲和柱使用前先将柱中保护液放掉，后加入 5.0mL 磷酸盐缓冲液Ⅱ活化；

?上样：准确将 10.0mL样液过柱，控制流速在 1mL/min~3mL/min；

?淋洗：用 10.0mL 磷酸盐缓冲液Ⅱ淋洗，弃去流出液，用吸水纸擦拭干净柱管内壁残留液体；

?洗脱：5.0mL磷酸盐缓冲液Ⅰ洗脱，不要抽干；

?浓缩：收集洗脱液并用磷酸盐缓冲液Ⅰ定容至 5.00mL，过0.45μm PES水相针头滤膜，上机待测。

?色谱柱：Jupiter C4 4.6×250mm 5μm 300?（00G-4167-E0）

?流动相：A：0.1%三氟乙酸水溶液；B：乙腈；

?流 速：1.0 mL/min；

?柱 温：30 ℃；

?进样量：50 μL；

?梯度程序见下表：

牛乳铁蛋白标准曲线

牛乳铁蛋白加标回收实验结果