使用琼脂平板进行微生物分析是学术研究和工业生产中常用的实验方法,可用于多种领域,如水和土壤分析、传染病研究、转基因克隆筛选及抗体药生产过程监控等。通常大家会采用目测及手动计数的方法进行分析,但随着技术发展,自动化成像及分析软件的普及可以大大提高数据准确性,减少劳动时间和成本(图1)。
图1:微生物质控的流程包括平板制备、成像及菌落分析
针对不同的平板制备方法,可采用 Amersham ImageQuant 800不同的成像模式进行图像采集:
a
培养基测试:平板上接种已知浓度的微生物并在适当温度下培养一定时间,采用光密度 (OD) 模式获取图像后进行菌落计数,并与实际浓度比较,用以验证培养基质量。
b
膜过滤:液体样品的首选检测方法。膜和滤器组装好后进行样品过滤冲洗,将滤膜转移至平板上培养到所需温度和时间,采用反射彩色 (epi-color) 或荧光模式采集图像后进行菌落计数。
c
混合倒平板:对于不溶样品,如粉末和晶体可在培养前将培养基与样品预先混合后倒入平板,待凝固培养后采用光密度 (OD) 模式获取图像,测量菌落数。
d
空气取样:在空气取样装置中将平板暴露在气流中一段时间,采用反射彩色模式拍照计数。
e
表面接触:将待测表面与平板直接接触后培养,采用多种模式匹配检测需求获取图像,观察形态及颜色。
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使用 Amersham ImageQuantTL软件进行自动化菌落计数:
1
导入图片,查看菌落信号大小、形态等信息。
2
设置分析区域,调整检测阈值,一键获取菌落数量、圆度、信号值等信息。
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