Amersham小课堂：生物分子标记知多少？

师兄，我刚从分子模拟库里筛选了2个小分子肽啦！??你看接下来从哪儿做起呢？除了WB，我现在还想看看它在细胞和组织里面的靶向定位情况。

恭喜呀，拿到序列你就可以合成检测啦！如果要看细胞的话，那就得做免疫荧光啦。

有道理！那上共聚焦就可以检测了。我待会就去复苏细胞去！那组织咋办呀？??

组织样本标记我们实验室有些用石蜡切片通常做HE染色。也有些人用冰冻切片用荧光标记背景看着会更干净一些。

好的，师兄我明白了，就是这个小分子合成的时候我不知道要带什么标签呢？我查到网上好多标签，看得眼花缭乱的……??

生物分子标记是通过特定生物分子（如 DNA、蛋白质、代谢物）作为“标记物”，实现对生物状态、疾病、细胞过程等的定性/定量分析技术。根据样本不同可以分成几类。

①核酸类标记：以DNA/RNA为标记物，利用核酸杂交、PCR扩增等原理。比如基因芯片、实时荧光定量PCR，用于基因检测、病原体筛查。核酸杂交这类一般用同位素标记法比较多。

②蛋白质类标记：以抗原、抗体、酶为核心，基于抗原-抗体特异性结合。比如ELISA、Western blot，用于蛋白表达量检测、疾病标志物筛查。也可以通过多光谱荧光标记进行靶向研究。

③代谢物/小分子标记：以生物体内小分子代谢产物为标记物，通过质谱、色谱等技术分析。用于代谢组学研究、疾病早期诊断。

所以你的小分子多肽可以使用荧光标记技术，就可以进行细胞和组织的标记检测啦。

常见的荧光标记类型有??

哇塞，师兄果然是师兄，太专业了！??那看来我们用前两个的比较多。如果是用FITC咋标记呀？

那你可以用氨基标记法，它针对多肽N端α-氨基或赖氨酸（Lys）侧链ε-氨基，通过酰胺化反应连接标记分子。

一般可以偶联的标记物就是FITC、Alexa Fluor系列啦。而且刚好咱们实验室有Amersham Typhoon多光谱激光分子生物成像系统，它里面有5激光光源，你用488 nm CY2通道直接扫描就能出结果了。它可以做细胞incell的检测，还可以做动物组织标记和切片扫描呢！

哇塞！没想到咱们这还有这么好的仪器呢！必须得去用一用，那我先去找公司把多肽合成标记好！然后就可以开干啦！

好的。它操作也很简单。后续你还要做其他菌株、芯片、EMSA、转基因筛选也可以用它。我把它可用通道发给你瞧瞧。

师兄太给力了！??

别客气。哈哈！