Part I 扩 增 曲 线 异 常
Ct值偏大（如Ct值＞30）
扩增曲线无法达到平台期
基因丰度低、循环数较少，建议增加循环数或选择适合低丰度基因定量的产品。
扩增曲线平台期下降
可能是基线范围设置太高，这种一般是由于模板量过高导致的。建议减小基线的终点值，可以设置为Ct值-4，调整后见下图：
扩增曲线log图谱基线期异常（如下图）
可能是基线设置不当，建议增大基线的终点值，可以设置为Ct值-4，调整后如下：
扩增曲线log图谱曲线异常（如下图）
可能是基线设置太高，建议减小基线的终点值，可以设置为Ct值-4，调整后如下：
扩增曲线不是标准的S型
可能是样本不纯，比如残留的抑制物造成的，建议通过Nanodrop测定OD260/280检测样本的纯度，也可以通过制作标准曲线确认样本质量，必要时重新制备样本。
扩增曲线平台期锯齿状
扩增曲线杂乱无规律
可能是ROX浓度和机型不匹配，建议调整ROX浓度，调整后见下图：
有熔解曲线，无扩增曲线
可能是扩增程序设置错误，未进行荧光信号搜集，建议重新实验，增加扩增程序中延伸阶段荧光信号的搜集。
扩增曲线有向上或向下的尖峰
可能是仪器故障，建议维修仪器。
阴性对照有扩增
复孔重复性差
PartII 熔 解 曲 线 异 常
熔解曲线出现双峰
熔解曲线单峰但不尖锐
可能存在大小相近的非特异性产物，建议进行高分辨率琼脂糖电泳确认。
熔解曲线单峰但Tm值在80℃以前
熔解曲线峰型杂乱
有扩增曲线，无熔解曲线
可能是熔解程序设置错误，未搜集荧光信号，建议重新实验，增加熔解曲线阶段的信号搜集。
两种试剂平行对比，同一产物Tm值不同
可能是不同试剂的促解链成分或含量不一样，导致同一产物解链温度Tm值不一样。
熔解曲线前端起杂峰
可能是ROX浓度与机型不匹配，建议取消ROX校正查看熔解曲线是否正常，调整后如下图：
适用于所有qPCR机型，再也不用根据仪器调整ROX浓度
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