Stellar多级模式提高检测灵敏度和专属性
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吴珊湖 李向军
在今年ASMS会议上,赛默飞推出来全新的四极杆-超高速双压线性离子阱组合型的Stellar质谱仪,结合了四极杆与线性离子阱的优势,对比常规的三重四极杆,Stellar质谱仪除了提供二级定量模式外,还可结合离子阱提供多个碎裂模式选择以及多级模式提高分析的灵敏度和专属性。
The Queen's Medical Research Institute用Stellar质谱测试了以下化合物的灵敏度:醛固酮、皮质醇、皮质酮、脱氢表雄酮、二氢睾酮、雌二醇、孕烯醇酮、17- OH孕烯醇酮和睾酮。部分数据对比了从赛默飞TSQ Altis Plus采集的数据,评估发现大部分化合物在Stellar tMS3 CID/CID模式下灵敏度更好,以醛固酮为例,图1展示了Stellar质谱以tMS3正离子模式检测醛固酮的典型色谱图和质谱图(0.1ng柱上样量),图2中展示了Stellar质谱tMS3模式正离子模式检测醛固酮连续四针定量限(0.05pg柱上样量)的图,CV = 1.62%证明了Stellar仪器在极低浓度下还能保持强稳定性;
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图3和图4分别在正负两种模式下对比了Stellar与Altis Plus在相同色谱条件下检测醛固酮的灵敏度,可以看到Stellar质谱tMS3检测醛固酮的灵敏度更高。图5展示了醛固酮、二氢睾酮、雌二醇、睾酮和脱氢表雄酮化合物的二次拟合的线性,5个化合物线性范围均跨越了2000倍,且R>0.99。
与Cedars-Sinai精准生物标志物实验室主任Jennifer Van Eyk合作检测血浆样本中的CRP蛋白,Stellar质谱检测CRP蛋白方法(图6)组合HCD和CID碎裂模式,以及二级和三级模式,定量结果显示在血浆基质中,三级模式灵敏度比二级模式提高了三倍(图7)。
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Stellar质谱借助多级碎裂和多种碎裂模式,提高了复杂基质中定量的极限值和稳定性,通过共流出胆汁酸和甘油三酯类物质的三级特征离子的选择,可以实现共流出物质在三级模式的分离,体现了多级模式的定性扩展性(见“穿越星际,锁定目标——定量代谢组学新篇章”),Stellar质谱让定量不局限于二级,助力科学家们更从容地应对复杂基质中目标物质高灵敏度要求的挑战!
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