脂质检测意义重大,与产品质量、科学研究、食品安全、药物开发、环境监测等密切相关,对于食品、医药、农业、生物燃料等许多行业不可或缺。通过萃取法提取脂质已成为国际通用方法。
萃取是一种分离技术,通过利用物质在不同溶剂或相态中的溶解度差异,将目标成分从固体、液体或气体混合物中分离出来。根据萃取相态可分为固-液萃取(Solid-Liquid Extraction)、液-液萃取(Liquid-Liquid Extraction)、超临界流体萃取(Supercritical Fluid Extraction)与固相萃取(Solid-Phase Extraction,SPE)。
一.液-液萃取
液液萃取是一种经典的脂质提取方法,它利用脂质在不同溶剂中的溶解度差异进行分离。可用于从生物样品(如动物组织、细胞、血浆)、食品或环境样品等液体或高含水量样本中分离脂质。常见的Folch法(氯仿-甲醇2:1)、Bligh-Dyer法等(氯仿-甲醇-水:1:2:0.8)。
二.固液萃取
固液萃取是一种从固体样品(如植物、食品、土壤或生物组织)中提取脂质等目标化合物的经典方法,通过使用液体溶剂与固体样品接触,利用目标化合物在溶剂中的溶解性差异实现分离。常见的有索氏法、Randall法、加速溶剂提取法等。
1.索氏法:原理是通过循环回流溶剂,连续萃取样品中的脂肪。通过样品干燥→装入索氏提取器→溶剂循环萃取→蒸发回收溶剂等步骤完成萃取。
索氏提取法的优势是高效彻底,适用于微量脂肪提取,而且自动化程度高,减少人工干预。
它的劣势是耗时长(通常需数小时至数十小时);高能耗(需持续加热);*适用于干燥样品,含水样品需预先脱水。

2.Randall法:是索氏法的改进法,将样品直接浸入沸腾溶剂中,在**缩短时间的同时,还能保持较高的提取效率。通过样品干燥→装入套管浸入溶剂中→提高套管进行冲洗→溶剂回收等步骤完成萃取。
Randall法具有提取快速,溶剂回收高效,提取效率高适用性广等优点,但也有样品需干燥,热敏性脂质(如多饱和脂肪酸)氧化或降解等缺点。
3.加速溶剂提取法:用高温(50-200°C)和高压(0.3-20MPa)条件,使溶剂保持液态并增强其对脂质的溶解和扩散能力。高温提高溶质溶解度和扩散速率,高压防止溶剂在高温下汽化,同时促进溶剂渗透到样品基质中。通过样品干燥→放入密闭提取池→高温高压→去除溶剂等步骤完成萃取。
加速溶剂提取法提取速度非常快,提取效率高,溶剂用量少。但也有设备昂贵,技术要求高,维护成本高等缺点。

三.固相萃取
固相萃取用于从液体或气体样品中分离、富集和纯化目标化合物。在脂质提取上,可通过利用固相吸附材料(固定相)与目标脂质之间的选择性相互作用,将目标脂质从复杂基质中分离出来,同时去除杂质。如C18作为固定相提取甘油三酯、胆固醇;硅基作为固定相用来提取和分离脂质等。固相萃取具有高灵敏性,高选择性,可分类选择脂质,但成本高,步骤复杂,但更多适用于脂质组学、LC-MS/MS或特定脂类研究,不是脂质提取常规主力方法。

四.超临界流体萃取
原理是利用超临界CO₂(临界温度31°C,临界压力7.4MPa)的高扩散性和溶解力提取脂肪。步骤是样品经过预处理,然后进行超临界CO₂循环萃取,**减压分离脂肪。超临界流体萃取的优势是:绿色环保,CO₂无毒、易回收。低温操作,保护热敏性成分(如维生素、多不饱和脂肪酸)。超临界流体萃取的劣势是:设备昂贵,高压系统成本高;对极性脂肪效率低,需添加夹带剂(如乙醇)


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