外泌体纯化离心方法整体解决方案
使用himac (前身为日立工机品牌)高速及超速离心机
目前外泌体研究是非常热门的课题,主要原因是外泌体在细胞内的信号传导中起到了重要的作用,故外泌体可以用于预诊断,ZL,及作为生物标记物。本文将介绍使用离心方法进行外泌体纯化的整体解决方案:
A.首先使用差分离心进行粗纯化:收集细胞上清液或体液,在低离心力下进行离心(300-500xg)
约10分钟,除去细胞沉淀;再将上清进行2000-5000xg离心10分钟,进一步除去细胞沉淀;
Z后上清在10000xg下进行离心约1小时,收取沉淀,则为粗纯化的外泌体:
主机可使用himac CR22N或CR30NX:
并可根据容量需要选择使用如下不同的转头
B.密度梯度离心进行外泌体的进一步纯化:
将上述粗纯化的外泌体加入碘克沙醇(iodixanol)进行进一步纯化,比如在24,000rpm (100,000xg),4℃下离心18小时
C.纯化结果:
(来源:天美(ZG)科学仪器有限公司)
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