HUVEC细胞，全称为Human Umbilical Vein Endothelial Cells，即人脐静脉内皮细胞。这是一种来自人体脐带的干细胞，也是脐静脉的重要构成细胞之一。
HUVEC细胞在医学和生物学研究领域具有广泛应用。作为血管内皮细胞的重要代表，它不仅是血液与组织之间的屏障，还参与调控血管功能、维持血液流动和防止血栓形成等关键生理过程。由于其易于获取、增殖潜能强且功能稳定，HUVEC细胞已成为实验室研究血管内皮细胞功能和疾病机制的首选模型。
然而，需要注意的是，不同来源的HUVEC细胞可能存在个体差异，影响实验结果的重复性。原代HUVEC细胞在体外培养中传代次数有限，容易老化，且对培养条件要求较高，需要精细控制以确保细胞正常生长。目前市面上的永生化HUVEC细胞一般也是有限传代细胞，需关注细胞传代次数和细胞状态。
HUVEC成管实验是一种体外血管生成测定法，基于内皮细胞在生长因子减少的基底膜提取物凝胶上培养时形成三维毛细管状管状结构的能力。
内皮细胞保留了分裂和快速迁移的能力，可响应血管生成信号。基质胶能很好地模拟机体环境，使得内皮细胞在体外可以进行成管实验。
细胞：永生化人脐静脉内皮细胞（HUVEC） 富衡细胞库自主建系，经STR鉴定！
基质胶：富衡实验室试用了多款基质胶，为避免争议，本文暂不做推荐，可以私信咨询。
培养基：HUVEC基础培养基、HUVEC完全培养基等。
耗材：细胞培养箱、带数码相机的倒置显微镜、12孔板、离心机、细胞计数器、移液管或枪头等。
细胞准备：选用HUVEC细胞，培养到汇合度80%左右。然后进行饥饿处理，将完全培养基换成不含胎牛血清的HUVEC基础培养基，培养16-24小时。
基质胶准备：从冰箱中取出基质胶，放入4℃冰箱中过夜解冻。同时预冷移液管或枪头。使用预冷的移液管或枪头混合基质胶至均匀状态。用HUVEC基础培养基稀释基质胶，一般稀释比例为1:1，使最终浓度在10mg/mL左右。
铺胶：将稀释后的基质胶加入孔板中，每孔加入200μL基质胶。然后将孔板转移到4℃冰箱中，在平整状态下孵育过夜，使基底膜形成凝胶。第二天使用前，提前置于37℃使基质胶固化。
细胞接种：对饥饿处理后达到80%融合的HUVEC细胞进行消化、离心、计数；调整细胞浓度为5×105/mL，每孔接种500μL的细胞悬液到铺有基质胶的孔板中。
培养观察：将孔板置于37℃、5%CO2条件的培养箱中培养。拍摄细胞生长视频，或者在不同时间点拍照，观察血管网络形成情况。一般3-12小时可见血管网络形成，成管时间与细胞状态密切相关。
HUVEC成管效果
加基质胶时一定要慢，可以垂直或稍倾斜加入，避免产生气泡。
拍摄图片时要避免暗角，尽量拍摄清晰明亮的图片，方便后续分析。
在实验过程中要注意无菌操作，避免污染。
使用的试剂和材料要提前预冷，确保实验温度的一致性。
不同品牌、批次的基质胶浓度都可能有所差异，使用前建议进行稀释比例的探索和优化。
通过以上步骤，可以成功进行HUVEC成管实验，观察并研究血管生成的过程和机制。
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