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980下转换荧光光谱仪应用之生物医疗检测

来源:上海如海光电科技有限公司 更新时间:2025-05-16 18:30:15 阅读量:41
导读:如海光电聚焦980nm下转换荧光技术,为生物医学成像、药物递送与干细胞追踪等前沿研究提供精准光谱解决方案。


在纳米科技日新月异的今天,980 下转换荧光技术凭借其独特的优势,成为科研领域的焦点,尤其在生物医学领域,展现出巨大的应用潜力。在生物医学光学领域,近红外二区(NIR-II, 1000-2100nm)荧光检测技术正凭借其卓越的组织穿透能力和低背景干扰特性,成为精准诊断与治疗的核心发展方向,为相关领域研究提供技术支持。

01

测量原理


980 下转换荧光是一种先进的激光诱导荧光光谱技术。其基本原理是利用 980nm 波长的激光作为激发光源,当样品受到这种特定波长的激光照射时,样品中的特定分子或纳米颗粒会吸收光子能量,其内部电子会跃迁到高能态。然而,这种高能态并不稳定,电子会迅速通过非辐射跃迁回到低能态,同时释放出荧光光子,这些光子的波长主要集中在 1500-2100nm 的近红外区域。

图 1 荧光的基本原理示意图

下转换荧光(Downconversion Fluorescence)是一种光致发光现象,其核心在于材料吸收高能光子后,通过多级能量传递或量子剪裁(Quantum Cutting)释放低能光子。当 980 nm 近红外光(NIR-I)激发特定材料时,其内部电子经历以下过程:

能量吸收:材料吸收 980 nm 光子,电子从基态(S? )跃迁至高能激发态(如 S? 或 T? )。

无辐射弛豫:激发态电子通过晶格振动或分子内能量转移,以非辐射形式衰减至中间能级(如 S? 或 T? )。

荧光发射:电子从中间能级返回基态,释放波长更长的光子(如1500-2100 nm,即近红外二区 NIR-II)。

02

技术优势

荧光光谱仪作为一种精密的分析仪器,在 980 下转换荧光技术中发挥着关键作用。它具备多种显著的优势,使其在众多分析技术中脱颖而出:

(1)高灵敏度探测能力:荧光光谱仪配备了高灵敏度的探测器,能够检测到极其微弱的荧光信号。这使得它能够在低浓度下精准地检测到样品中的目标物质。

(2)高分辨率光谱分析:荧光光谱仪可实现高光谱分辨率,能够清晰地区分样品不同波长下的荧光发射峰。研究人员可以利用它深入探究样品的光学特性,精确分析不同物质的能级跃迁过程。在材料科学领域,通过高分辨率的荧光光谱,研究人员可以深入研究不同材料的电子结构和光学行为,从而推动新型材料的研发。

(3)良好的生物相容性与组织穿透能力:近红外波段的荧光信号在生物组织中具有较低的吸收和散射特性。这使得荧光光谱仪能够实现较深的组织穿透深度,同时减少对生物样品的光损伤。

(4)动态分析能力:荧光光谱仪具备出色的动态分析能力,能够实时监测样品在不同时间点的荧光变化。这使得研究人员可以捕捉到生物分子或纳米颗粒在动态过程中的行为变化。这种动态分析能力为研究生物体系的动态行为提供了强大的工具。

(5)高精度激发光源与稳定控制:荧光光谱仪配备了高精度的激发光源,能够提供稳定且精确的光激发。激发光源的波长和功率可以精确调节,确保样品在最佳条件下被激发。这种高精度的激发光源与稳定控制能力不仅提高了荧光信号的稳定性和可重复性,还使得实验结果更加可靠。

(6)智能化数据采集与分析:现代荧光光谱仪集成了先进的数据采集和分析系统,能够实现智能化的数据处理。通过软件,仪器可以实时采集荧光光谱数据,并进行快速分析和处理。内置的分析工具可以进行光谱处理、峰值检测和定量分析等操作,大大提高了实验效率。

03

应用领域


深层组织分子影像学

肿瘤靶向成像:通过抗体/核酸适配体修饰下转换材料(如 Tm3?掺杂纳米颗粒、cyanine 类染料),实现肿瘤标志物(如 HER2、PSMA)的 NIR-II 荧光示踪。临床前研究显示,该技术可检测直径 0.5mm 的早期肿瘤结节(CT 分辨率约 5mm),并在术中实时勾画肿瘤边界(定位精度±0.2mm),降低残余病灶风险;

神经活动监测:利用 Ca2?敏感型下转换探针(如 YC-NIR2),在 980nm 激发下监测神经元钙信号变化,穿透 5mm 厚小鼠脑皮层,实现海马区神经元集群放电的无创成像,为癫痫病灶定位及阿尔茨海默病早期突触丢失评估提供新手段。


药物递送系统优化与动力学研究

载药系统释放监测:将化疗药物(如 DOX)或基因载体包裹于下转换材料中,通过 pH / 酶响应型外壳实现靶向释放。荧光光谱仪实时追踪样品荧光强度变化,指导载体材料优化(如 PEG 链长、壳层厚度)。

体内分布定量分析:通过器官荧光光谱强度,量化探针在肿瘤、肝脏、肾脏等组织的富集效率,优化靶向配体(如 RGD 多肽)偶联密度,降低非特异性摄取。


再生医学与干细胞追踪

干细胞移植示踪:利用下转换荧光标记间充质干细胞(MSCs),在 NIR-II 区监测其体内迁移路径。实验显示,标记细胞在心肌梗死模型中的归巢效率可通过 1650nm 处荧光强度动态评估,较传统生物发光法(穿透深度<0.5cm)提升检测深度;

组织工程支架评估:通过检测支架材料(如胶原/羟基磷灰石复合支架)负载的下转换微球荧光分布,量化细胞黏附与增殖情况,为骨组织修复材料的生物相容性评价提供可视化依据。

04

解决方案

01

测量系统组成

激光器:激光器是关键组成部分,具有方向性好、单色性佳、参数可精确控制、相干性强、强度大等特性。这些特性使得激光诱导荧光检测器的信噪比大大增强,能够提供高强度的激发光,以确保足够的分子被激发产生荧光信号,同时其良好的单色性有助于减少杂散光干扰,提高检测的选择性和灵敏度。

光谱仪:光谱仪是整个系统的核心部分,用于接收荧光信号并进行光电信号化。

荧光探头:用于传输激光信号只样品,用于激发样品荧光信号,再收集样品发出的荧光信号,并传输至光谱仪。

定制采样附件:用于固定光纤探头,满足不同样品的测量需求。

02

系统搭建示意

使用激光诱导荧光光谱仪测试样品的荧光光谱,需要将荧光探头的尾端光纤分别与拉曼光谱仪主机的光谱仪接口和激光器接口相连,在再将探头放入可调节支架上,根据所测光谱数据调节探头与样品间的距离,选择最佳距离固定后测试样品的荧光光谱,详细搭建示意图如下。

图 2 荧光测量搭建示意图

表 1 推荐配置


05

应用案例:

稀土纳米颗粒测试


5.1 研究背景

随着稀土纳米材料在生物医学领域应用的不断拓展,对稀土纳米颗粒的荧光特性进行深入研究具有重要意义。了解稀土纳米颗粒的荧光特性对于优化其在生物医学成像和治疗中的应用至关重要。通过调整稀土离子的掺杂含量,可以实现对荧光信号强度的调控,从而提高成像质量和治疗效果。使用由提供的 PL980 下转换荧光光谱仪,探究掺杂不同含量 Tm 的稀土纳米颗粒在 1500-2000nm 范围内的荧光特性。


5.2 实验样品及测试场景

图 3 实验样品

图 4 测试场景图


5.3 测试方法

采用上海科技有限公司生产的 PL980下转换荧光光谱仪进行测试。该光谱仪具有 1000-2100nm 的荧光光谱范围,激发波长为 976±0.5 nm,线宽≤0.08nm,输出功率 0-500mW 可调。测试过程中,980nm 的激光激发稀土纳米颗粒,使其产生荧光发射,通过光谱仪收集和分析荧光光谱数据。


5.4 实验数据

在实验中,设置了 500mW 的激发功率、500ms 的积分时间和 20次硬件平均。通过调整焦距,采集了样品的荧光信号。测试数据显示,掺杂不同含量Tm的稀土纳米颗粒样品在 1500-2000nm 范围内均能检测到发射峰,且随着 Tm 含量的降低,发射峰强度逐渐降低。

图 5 掺杂不同含量 Tm 的稀土纳米颗粒

荧光光谱图


5.5 实验结论

实验结果表明,掺杂不同含量 Tm 的稀土纳米颗粒样品在1500-2000nm 范围内均可检测到发射峰。这为稀土纳米颗粒在生物医学领域的应用提供了重要的实验依据。通过精确控制稀土离子的掺杂含量,可以实现对荧光信号的调控,从而满足不同应用场景的需求。

06

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