一、小鼠肺泡上皮细胞:肺功能的核心执行者
肺泡上皮细胞是肺部气体交换的关键功能单元,分为I型(ATⅠ)和II型(ATⅡ)两类。其中,II型肺泡上皮细胞(ATⅡ)作为肺部的“再生引擎”,承担以下核心功:
表面活性物质分泌:合成并分泌肺表面活性蛋白(SP-B、SP-C)及脂质,降低肺泡表面张力,维持肺泡稳定性。
损伤修复:作为肺泡上皮的祖细胞,ATⅡ可增殖并分化为I型细胞(ATⅠ),参与肺损伤后的再生修复。
免疫调节:通过释放炎症因子(如IL-6、TGF-β1)与免疫细胞互作,调控肺部炎症反应。
二、MLE-12细胞系:小鼠肺泡上皮研究的标准化模型
MLE-12是由SV40大T抗原转基因小鼠肺肿瘤建立的永生化细胞系,由上海富衡生物科技有限公司提供高纯度、高活性的标准化产品,广泛应用于呼吸系统疾病研究。
1. 细胞起源与特性
MLE-12为贴壁生长细胞,需严格控制培养条件以维持其功能稳定性:
三、MLE-12的差异化优势
相较于原代ATⅡ细胞,MLE-12具备以下实验优势:
四、富衡生物技术支持与服务体系
上海富衡生物科技有限公司为科研用户提供MLE-12细胞全流程解决方案:
细胞资源:提供ATCC来源的冻存细胞株(含复苏指南)及专用培养基(IM-M015-1),减少批次间差异。
实验辅助:基因编辑服务:CRISPR-Cas9靶向敲除/过表达(如TGF-β1、STAT3等基因)。模型构建:定制化肺纤维化、药物毒性测试模型,配套检测试剂盒(如α-SMA抗体、胶原定量试剂)。
售后保障:提供72小时细胞状态确认服务,若发现污染或活性异常,可申请免费重发
培养基配置:基础培养基:DMEM/F12(94%)添加剂:2%优质胎牛血清(FBS)、1% GlutaMAX-1谷氨酰胺、1% HEPES缓冲液、1% ITS(胰岛素-转铁蛋白-硒复合物)、10 nM氢化可的松及雌二醇。
传代管理:细胞密度达80%-90%时,使用0.25%胰酶-EDTA消化1-3分钟,按1:2至1:3比例传代,每周2-3次。
首次传代建议保留原代培养基以稳定细胞状态,避免因环境突变导致功能异常。
3. 科研应用场景
肺纤维化机制研究:烟雾/TGF-β1模型:模拟肺泡上皮间质转分化(EMT),检测α-SMA、MMP-9等纤维化标志物的表达动态。
JAK2/STAT3通路调控:通过AngⅡ刺激结合AG490抑制剂,解析信号通路在EMT中的作用。
药物开发与毒性评估:抗纤维化药物筛选:利用Shp2抑制剂PHPS1或CRISPR-Cas9基因编辑技术,评估药物对胶原沉积及炎症因子的调控效果。
顺铂毒性测试:通过MTT法及Western blot检测细胞活性与凋亡相关蛋白表达。
基因功能研究:腺病毒载体转染:介导γ干扰素等基因表达,研究其对EMT或炎症反应的调控机制。
建系背景:1992年由Kathryn A. Wikenheiser通过人表面活性蛋白C(SP-C)基因启动子调控的SV40大T抗原诱导构建,源自C57BL/6雌鼠肺组。
标志物表达:持续分泌SP-B、SP-C,表达Na+-K+-ATP酶及钠通道,维持肺泡液体稳态。
功能特征:磷脂分泌:在佛波酯和ATP刺激下分泌磷脂,但对佛斯克林无响应。
致瘤性:裸鼠接种后可于6-9个月内形成肿瘤,适用于肺癌机制研究。
2. 培养优化方案(富衡生物推荐)
永生化特性:SV40大T抗原介导的永生化确保细胞无限增殖,避免原代细胞培养周期短、批次差异大的问题。
功能稳定性:持续表达SP-B/SP-C,保留肺泡上皮的典型功能特征,适用于长期动态实验。
标准化模型:ATCC认证(CRL-2110),提供严格的支原体检测及STR鉴定报告,确保数据可重复性。
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