制备优质的接种物,你是否还缺个好帮手?
众所周知,在大多数生物工艺中,种子发酵罐阶段的监测和控制条件是已经确定的,但在Z初摇瓶中进行接种前的“种子”培养过程往往还是会被忽略。
特别是对于代谢调节复杂或形态变异的生物质,使用次优甚至不佳的接种物会导致生物过程结果严重恶化。
制备优质接种物在滞后时间、生长动力学、生产率和防止污染方面对任何生物过程的成功都极为重要。
在发酵过程的多个接种步骤中,从摇瓶到多个种子发酵罐培养原料再到Z终发酵罐生产,都需根据上表中列出的条件让每个接种物保持高质量和完整性。
举个例子
以酿酒酵母生产乙醇的过程为例,我们提出了一种利用自动接种、条件控制和在线监测技术,分别是 Aquila Biolabs 的 LIS 系统, Eppendorf 可程序化控制的摇床 Innova® S44i 以及 CGQ 系统在摇瓶中优化培养接种物的综合方法,生成可再生的优质“种子”,并可根据操作人员需求灵活调整收取时间。
使用以上所述摇瓶Z优接种物制备综合方法,不仅提高了接种物的生产率和质量,收取时间也可按照操作人员需求,通过设置预处理阶段的时间长度加以调整。由于预处理的低温和预处理培养基中缺乏促进生长的碳源,细胞可以在轻微搅拌下于 LIS 盒内保存多个小时,而不会在注入新鲜培养基后对培养产生负面影响。如 图2 所示,不管预处理期长度如何,生长速率曲线均无明显差别。通过 Innova® S44i 和生长条件参数以及 LIS 注入时间进行编程设置,获得Z佳种子接种时间,将晚上和周末转为制备Z优接种物的GX时间,然后可在上午或者在发酵罐准备好接种时收取。
Eppendorf S次在摇瓶培养“种子”这个早期阶段,实现了生物过程水平的监测和控制,到目前为止,该水平也只有在后期搅拌罐式生物反应器中才能实现。
该系统中,进行编程化、jingque培养条件控制的核心设备就是 Eppendorf Innova® S44i 恒温摇床。
> 可预设多步骤程序,根据培养需求自动调节控制温度和转速参数,无需手动干预
> 兼容自动补料与生物质监测系统(如:Aquila Biolabs 的 CGQ 系统)
Innova® S44i 的摇床板、驱动装置和培养腔体针对高通量和高负载性能进行了优化,以Z大限度挖掘您实验室的运行潜能。如果摇瓶容量对您至关重要,请参考 图3 来直观了解 Innova® S44i 恒温摇床的承载优势,以满足您的应用需求。
目前,通过微生物表达 DNA 和蛋白质的工艺方案已经证实在特殊摇瓶中,当振荡转速高达 400 转/分钟时可达到Z高表达量。相比市场上的同类产品, Innova® S44i 可以在Z大负载条件下,全天候 24 小时不间断维持这个转速,这使得它成为蛋白质表达和生产的真正主力。采用三层叠放的 Innova®S44i 恒温摇床可进一步提高产量。因为 Eppendorf Z新研发的 X-Drive 摇床驱动可确保Z高层的 S44i 恒温摇床仍可按照 400 rpm 转速运行,无需降速保护。
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