马ELISA试剂盒检测过程中出现的问题及解决办法

　马ELISA试剂盒检测过程中出现的问题及解决办法

　　1. 加入反应终止液后，没有吸光值或吸光值偏低。

　　a.原因：未加入酶标记物。

　　解决办法：请按照操作步骤进行。

　　b.原因：试剂盒内容物未能充分回。

　　解决办法：确定试剂盒内容物回温后再进行操作。

　　c.原因：室温太低。解决办法：若室温太低(<19℃)，请于操作步骤4，适当延长温育时间。

　　d.原因：未使用试剂盒的清洗液清洗。

　　解决办法： 请用试剂盒内所提供的清洗液清洗。

　　e.原因：试剂盒已过有效期限。

　　解决办法：请更换成仍在有效期限内的试剂盒。

　　2. 标准曲线线性不佳，或是平行性不好。

　　a.原因：温育位置避光不好或受到气流干扰。

　　解决办法： 请确认温育位置既不透光也不透风(如抽屉内)。

　　b.原因：操作时间拖太久。

　　解决办法：请在方法熟练后再进行操作。

　　c.原因：微孔间相互污染。

　　解决办法： 加样品时，请小心勿溅出微孔外，以免造成其它微孔的污染。

　　d.原因：标准品或酶标记物所加入的量不一致。

　　解决办法：请使用已校正过的移液枪，并确保其与吸头之间有高度密合性。

　　e.原因：添加样品或试剂的操作方法不正确。

　　解决办法：加样品或试剂时，吸头请勿接触微孔。

　　f.原因：洗板过程发生问题(如管路堵塞、洗完板后未立刻进行下一步骤)。

　　解决办法：请随时监控洗板机洗板过程，洗完后立即进行下一步骤。

　　3. 吸光值均偏高(或线性不够陡)。

　　a.原因：室温太高(>25℃)。

　　解决办法： 若无法降低室内温度，请适当缩短步骤4的温育时间。

　　b.原因：底物溶液受到污染。

　　解决办法： 若发现底物溶液已呈现淡蓝色，请不要再使用。

　　c.原因：反应时间超过太久。

　　解决办法：请控制反应时间。

　　d.原因：酶标记物污染了盒内其它试剂

　　。解决办法：使用过的吸头应立即丢弃，可避免试剂间相互污染，凡是试剂(特别是酶标记物与底物溶液)接触过的容器应立即清洗干净。(先以漂白水浸泡，再以清水冲洗干净，可确保无残留)

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