猪促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒实验使用说明
BS-4659 猪促甲状腺激素(TSH)ELISA测试盒
实验步骤
实验前准备:
所有试剂和标本需缓慢恢复至室温(18-25℃)。
标准品(冻干品)用1mL标准品稀释液溶解,室温静置10分钟并颠倒混匀,得到10,000 pg/mL贮液。
用标准品稀释液将贮液稀释至50,000 pg/mL(浓度),然后倍比稀释成7个浓度梯度(如5,000、2,500、1,250
pg/mL等)。
检测溶液A和B使用前需短暂离心或手甩,然后按1:100用检测稀释液稀释。
加样与孵育:
加样:取50μL标准品或样本加入微孔板,每孔加入50μL检测溶液A(HRP标记抗体)。
孵育:37℃孵育1小时(建议用湿盒防止蒸发)。
洗板:
洗板5次(每次静置1分钟,甩干拍干),可用洗板机或手动操作。
显色与终止:
每孔加入50μL显色底物A和B,37℃避光孵育15分钟。
每孔加入50μL终止液,15分钟内用酶标仪在450nm波长测定吸光度(OD值)。
数据分析:
以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线,计算线性回归方程。
将样本OD值代入方程计算TSH浓度。
关键注意事项
样品处理:血清/血浆用无热原无内毒素试管分离,避免反复冻融;组织匀浆需离心取上清。
试剂准备:所有试剂使用前恢复至室温;标准品工作液需现配现用;检测溶液稀释时按需配制并多配0.1-0.2mL。
操作规范:不同试剂使用不同移液槽;孵育时封好封板胶;显色底物避光保存。
安全提示:避免接触终止液和底物A/B,若接触立即用水冲洗;实验中禁止饮食、吸烟或使用化妆品。
常见问题与优化
样本浓度过高:用样本稀释液稀释后再测,确保OD值在标准曲线范围内。
显色异常:显色底物应为无色,加入后变蓝;终止液加入后变黄,绿色表示未混匀。
重复性差:确保加样量准确、洗板充分、孵育时间一致。
试剂盒性能与适用范围
检测范围:经检验,正常样本浓度在试剂盒提供的检测范围内,可直接取50μL样本上样。
适用样本:血清、血浆(EDTA、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞上清液、组织匀浆均可检测]。
注:供科研使用,以上资料供参考,不作为实验依据,具体请咨询技术老师或品牌商。
猪促甲状腺激素(TSH)ELISA试剂盒 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。
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