兔子白细胞介素28A(IL-28A)ELISA试剂盒实验使用说明书

   兔子白细胞介素28A(IL-28A)ELISA试剂盒实验使用说明书

   一、产品概述

   本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附测定法（ELISA）技术，专用于定量检测兔子血清、血浆及相关液体样本中的白细胞介素28A（IL-28A）浓度。本产品仅供科学研究使用，不适用于临床诊断。

   二、检测原理

   将纯化的兔子IL-28A抗体包被于微孔板，形成固相抗体。

   加入待测样本后，样本中的IL-28A与固相抗体结合。

   加入辣根过氧化物酶（HRP）标记的IL-28A检测抗体，形成"抗体-抗原-酶标抗体"复合物。

   彻底洗涤后加入底物TMB显色，TMB在HRP催化下转化为蓝色，加入终止液后变为黄色。

   在450nm波长下测定吸光度（OD值），IL-28A浓度与OD值呈正相关。

   三、试剂盒组成

   组分规格数量

   预包被微孔板96孔1块

   标准品（冻干粉）240ng/L1支

   标准品稀释液1.5ml1瓶

   样本稀释液6ml1瓶

   检测抗体（HRP标记）6ml1瓶

   20×浓缩洗涤液20ml1瓶

   显色剂A液6ml1瓶

   显色剂B液6ml1瓶

   终止液6ml1瓶

   封板膜2张

   说明书1份

   四、自备实验器材

   酶标仪（450nm波长）

   精密移液器及一次性枪头

   洗板机或手动洗板装置

   37℃恒温箱

   计时器

   吸水纸

   坐标纸（用于绘制标准曲线）

   五、样本要求

   采集与处理‌：

   使用EDTA、肝素或柠檬酸盐抗凝剂采集血液样本

   采集后立即离心分离血浆（3000rpm，15分钟）

   血清样本需室温凝固后离心分离

   样本应在2-8℃保存不超过48小时，长期保存需-20℃（避免反复冻融）

   注意事项‌：

   避免使用溶血、高脂或严重污染的样本

   样本中不得含有NaN3（HRP活性）

   六、操作步骤

   试剂准备‌：

   将20×洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液

   标准品稀释：取240ng/L标准品150μl加入150μl标准品稀释液，依次倍比稀释至7.5ng/L

   实验操作‌：

   从铝箔袋中取出所需板条，平衡至室温（20-25℃）

   设置标准品孔（7个浓度梯度）、样本孔和空白孔

   标准品孔加入50μl不同浓度标准品

   样本孔先加10μl样本，再加40μl样本稀释液

   每孔加入100μlHRP标记检测抗体（空白孔除外）

   37℃孵育60分钟

   洗板5次（每次浸泡1分钟）

   每孔加入底物A、B液各50μl，37℃避光显色15分钟

   每孔加入终止液50μl，15分钟内测定OD值

   七、结果计算

   以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线

   根据样本OD值在标准曲线上对应浓度

   样本稀释倍数需在结果中乘以相应系数

   八、注意事项

   不同批号试剂盒组分不可混用

   显色剂B液对光敏感，应避免长时间暴露

   终止液具有腐蚀性，操作时需佩戴防护装备

   实验操作应严格遵守时间控制

   洗涤不彻底可能导致假阳性结果

   九、性能参数

   检测范围：4-120ng/L

   灵敏度：低可检测浓度1.2ng/L

   精密度：板内变异系数<10%，板间变异系数<15%

   回收率：85%-115%

   线性范围：样本稀释1-5倍时线性良好

   十、储存条件

   未开封试剂盒：2-8℃保存，有效期6个月

   开封后组分：标准品-20℃保存，其余2-8℃保存

   避免试剂盒直接暴露于强光或高温环境

   兔子白细胞介素28A(IL-28A)ELISA试剂盒实验使用说明书本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。本生试剂盒