人细胞凋亡因子配体(Fas-Ligand)ELISA试剂盒使用说明书

　　人细胞凋亡因子配体(Fas-Ligand)ELISA试剂盒使用说明书

　　BS-9943人细胞凋亡因子配体(Fas-Ligand)ELISA试剂盒

　　一、产品概述

　　本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA)检测人血清、血浆或细胞培养上清液中Fas-Ligand(FasL)的浓度。适用于科研实验。

　　二、试剂盒组成

　　组分 48孔配置 96孔配置 保存条件

　　酶标包被板 1×48孔 1×96孔 2-8℃

　　标准品 0.5ml×1瓶 0.5ml×1瓶 2-8℃

　　标准品稀释液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

　　酶标试剂 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

　　显色剂A液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

　　显色剂B液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 2-8℃

　　终止液 3ml×1瓶 6ml×1瓶 室温

　　20×洗涤液 20ml×1瓶 20ml×1瓶 2-8℃

　　封板膜 2张 2张 室温

　　说明书 1份 1份 室温

　　注：不同批号试剂不可混用

　　三、样本处理

　　1. 血清样本

　　室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟(2000-3000转/分)

　　收集上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融

　　2. 血浆样本

　　使用EDTA或肝素抗凝，30分钟内2-8℃离心15分钟(1000×g)

　　取上清，-20℃或-80℃保存，避免反复冻融

　　3. 细胞培养上清

　　1000×g离心20分钟去除颗粒物

　　立即检测或分装保存于-20℃

　　四、实验步骤

　　1. 试剂准备

　　所有试剂使用前平衡至室温(20-25℃)

　　20×洗涤液用蒸馏水稀释至1×工作液

　　2. 标准品稀释

　　冻干标准品用标准品稀释液复溶(4000pg/ml)

　　梯度稀释：2000、1000、500、250、125、62.5、31.25 pg/ml

　　标准品稀释液作为空白对照

　　3. 加样

　　设标准孔、样本孔、空白孔

　　标准品孔：每孔加入不同浓度标准品50μl

　　样本孔：加入待测样本50μl

　　空白孔：不加任何试剂

　　每孔加入酶标试剂100μl(37℃避光孵育60分钟)

　　4. 洗涤

　　弃去液体，每孔加满洗涤液，静置1分钟后弃去

　　重复洗涤5次，拍干

　　5. 显色

　　每孔先加显色剂A液50μl，再加显色剂B液50μl

　　37℃避光显色15分钟

　　6. 终止与测定

　　每孔加终止液50μl

　　30分钟内用酶标仪测定450nm波长OD值

　　五、结果计算

　　以标准品浓度(pg/ml)为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线

　　根据样本OD值在标准曲线上对应浓度

　　样本浓度=标准曲线值×稀释倍数(如有)

　　六、注意事项

　　试剂盒2-8℃保存，有效期6个月

　　浓缩洗涤液结晶时37℃水浴溶解

　　不同批号试剂不可混用

　　底物避光保存

　　加样器需定期校准

　　显色液变蓝立即终止反应

　　避免使用溶血或高血脂样本

　　七、技术参数

　　检测范围：31.25-2000 pg/ml

　　灵敏度：<15 pg/ml

　　回收率：85-115%

　　批内差：CV<10%

　　批间差：CV<15%

　　八、储存条件

　　未开封试剂盒：2-8℃保存

　　已开封板条：密封袋中2-8℃保存

　　标准品：分装后-20℃保存(避免反复冻融)

　　注：以上仅供参考，本产品仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。

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