一、鼻咽癌:中国南方高发肿瘤的科研挑战
鼻咽癌(Nasopharyngeal Carcinoma, NPC)是一种与EB病毒(Epstein-Barr virus, EBV)密切相关的头颈部恶性肿瘤,具有显著地域聚集性(如中国广东、广西地区)。其早期症状隐匿,约70%患者确诊时已发生淋巴结或远端转移,临床亟需解析其转移机制及开发靶向治疗方案。
研究痛点:
原代鼻咽癌细胞体外培养难度高,易失去体内转移特性。
现有细胞模型(如CNE2、HONE1)转移潜能有限,难以模拟临床进展。
二、5-8F细胞株:鼻咽癌高转移研究的“金标准”
5-8F细胞株是鼻咽癌研究领域公认的高侵袭、高转移模型,由上海富衡生物科技有限公司提供ATCC标准化的细胞资源及配套实验方案。
1. 细胞起源与特性
5-8F为贴壁生长细胞,需严格控制以下条件以维持其高转移特性:
三、5-8F的差异化优势
相较于其他鼻咽癌细胞模型,5-8F具备以下核心优势:
四、富衡生物技术支持与服务体系
上海富衡生物科技有限公司为科研用户提供5-8F细胞研究全流程解决方案:
细胞资源:提供ATCC认证的5-8F细胞株(STR鉴定报告)、专用培养基(IM-NPC-5-8F)及转移模型构建试剂盒(含基质胶及裸鼠实验指南)。
实验辅助:基因编辑服务:CRISPR-Cas9靶向EBV基因(如LMP1)或宿主基因(如TP53、EGFR)。体内外转移模型:Transwell侵袭实验包、裸鼠肺转移活体成像技术(IVIS系统)。
售后保障:提供细胞支原体检测及转移功能验证服务(周期7个工作日),确保数据可靠性。
培养基配置:基础培养基:RPMI 1640(89%)添加剂:10%胎牛血清(FBS)、1%非必需氨基酸(NEAA)、1 mM丙酮酸钠、2 mM GlutaMAX。可选功能强化:添加10 ng/mL EGF或5%条件培养基,增强细胞侵袭性。
传代管理:细胞密度达80%-90%时,使用0.25%胰酶-EDTA消化2-3分钟,传代比例1:3至1:5,每周2次。避免过度融合导致细胞间连接增强,侵袭能力下降。
冻存与复苏:冻存液:90% FBS + 10% DMSO,密度1×10⁶ cells/mL,程序降温后液氮保存。复苏后48小时内避免功能实验,确保细胞状态恢复。
3. 科研应用场景
转移机制解析:EMT调控网络:通过TGF-β1诱导上皮-间质转化(EMT),检测E-cadherin下调及Vimentin上调。转移相关基因筛选:CRISPR-Cas9敲低LMP1或EGFR,观察肺转移灶数量变化。
放化疗抵抗研究:顺铂敏感性:构建梯度浓度顺铂处理模型,分析IC50值及凋亡相关蛋白(Caspase-3、Bcl-2)表达。放疗耐受:通过克隆形成实验(2-6 Gy X射线照射)评估DNA损伤修复能力。
靶向药物开发:EGFR抑制剂测试:奥希替尼(Osimertinib)或吉非替尼(Gefitinib)对细胞增殖及迁移的抑制作用。免疫治疗联用:PD-1抗体联合放疗对裸鼠移植瘤生长的协同效应评估。
EB病毒致癌机制:利用shRNA沉默EBNA1(EB病毒核抗原1),研究其对端粒酶活性及基因组稳定性的影响。
建株背景:1980年从一名58岁中国男性鼻咽低分化鳞癌患者的肺转移灶中分离建株,经裸鼠体内传代筛选获得高转移亚克隆。
分子特征:EBV相关性:EBER阳性(EB病毒编码小RNA),LMP1(潜伏膜蛋白1)高表达,驱动NF-κB通路持续激活。基因突变谱:TP53突变(R280K)、EGFR扩增、VEGF高分泌,与临床晚期患者基因特征高度吻合。
功能特性:体外侵袭性:Transwell实验显示穿膜细胞数为CNE2的3-5倍(基质胶模拟基底膜)。体内转移能力:裸鼠尾静脉注射后,肺转移灶形成率>80%(4-6周),适用于转移机制动态追踪。
2. 培养优化方案(富衡生物推荐)
高转移重现性:裸鼠肺转移率>80%,显著高于CNE2(<30%),更贴近临床转移进程。
EBV驱动明确:LMP1高表达为研究EBV介导的免疫逃逸提供天然模型。
多组学数据支持:已公开基因组、转录组及蛋白组数据(GEO数据库:GSE12452),助力机制深度挖掘。
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