磷酸钙转染法实验原理及步骤

将处于对数生长期的细胞消化下来，以适当的密度接种到培养皿或培养板中。

培养细胞至约 70%-80% 汇合度，此时细胞状态良好，适合进行转染。

在无菌的离心管中，将适量的质粒 DNA 与等体积的磷酸钙转染试剂混合。

轻轻混匀后，在室温下静置一段时间，让磷酸钙 - DNA 复合物逐渐形成。

将制备好的磷酸钙 - DNA 复合物缓慢地滴加到细胞培养皿或培养板中。

轻轻晃动培养皿或培养板，使复合物均匀分布。

将细胞置于适宜的培养条件下培养。

在转染后的不同时间点，可以通过多种方法检测转染效果。例如，使用荧光显微镜观察荧光蛋白的表达情况，或者通过 RT-PCR、Western blot 等方法检测目的基因的表达水平。