分光光度法测定3种中草药中的镉含量

2.1仪器与设备

紫外可见分光光度计;高速万能粉碎机;恒温干燥箱;电子分析天平。

2.2材料与试剂

川芎、黄连、地黄药材购于绵阳师范学院校外天诚大药房，经绵阳师范学院天然产物研究所边清泉教授鉴定认可。 试验用水均是2次蒸馏水。优级纯硝酸、优级纯高氯酸，成都市科龙化工试剂厂;分析纯NaOH，成都市联合化工试剂研究所;分析纯盐酸羟胺、分析纯OP乳化剂盐酸羟胺、分析纯酒石酸钾钠、分析纯双硫腙，天津科密欧化学试剂有限公司;优级纯镉粉，天津市光复精细化工研究所。

2.3试验方法

2.3.1分光光度法测定镉最佳条件的选择

(1)最大吸收波长的选择。吸取20mL镉标准溶液于50mL比色管中，加入5mL1mol/LNaOH溶液(此时溶液pH值约为12)，再依次加入15mL0．002%双硫腙、1mL20%盐酸羟胺、1mL50% 酒石酸钾钠、1mL20%OP乳化剂，用蒸馏水稀释至刻度线，静置;以空白试剂为参比，用紫外－可见分光光度法制作该溶液的光谱扫描曲线。

(2)显色剂用量的选择。在5支已标号的洁净比色管中，各加入20mL1μg/mL的镉标准溶液，再各加入5mL1mol/LNaOH溶液，再分别加入9、12、15、18、 21mL0．002%双硫腙、1mL20%盐酸羟胺、1mL50%酒石酸钾钠、1mL20%OP乳化剂，用蒸馏水稀释至刻度线，摇匀、静置;在紫外－可见分光光度计上，于最大吸收波长537nm处用1cm的比色管测定吸光度D537nm，以空白试剂作为参比。

(3)显色时间的选择。在5支已标号的洁净比色管中，各加入20．00mL1μg/mL的镉标准溶液，再分别加入5mL 1mol/LNaOH溶液、15mL0．002%双硫腙、1mL20%盐酸羟胺、1mL50%酒石酸钾钠、1mL20%OP乳化剂，用蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，静置时间依次设为10、15、20、25、30min; 在紫外－可见分光光度计上用1 cm的比色管测定吸光度 D537nm，采用空白试剂作为参比。

(4)NaOH用量的选择。在5支已标号的洁净比色管中，各加入20mL1μg/mL镉标准溶液，分别加入3、4、5、6、7mL1mol/LNaOH溶液，再分别加入15mL0．002%双硫腙、1mL20%盐酸羟胺、1mL50%酒石酸钾钠、1mL20%OP乳化剂，用蒸馏水稀释至刻度线，摇匀，静置20min;在紫外－可见分光光度计上用1cm的比色管测定吸光度，采用空白试剂作为参比。

(5)标准曲线的绘制。分别准确吸取0．00、2．00、4．00、6．00、8．00、10．00 mL 1μg/mL镉标准溶液，依次加入到50mL比色管中，再分别加入5mL1mol/LNaOH溶液、15mL0．002%双硫腙、1mL 20%盐酸羟胺、1mL50%酒石酸钾钠、1mL20%OP乳化剂，每加入1种试剂后都要充分混匀，最后加去离子水至刻度处，摇匀，静置20min;以空白溶液作为参比，在537nm波长下用紫外－可见分光光度计测量上述各溶液的吸光度D537nm 。

2.3.2样品前处理

将市售川芎用水洗净后用去离子水洗涤，除去样品表面附着的杂质以及由于其他因素带来的金属离子。然后将水沥干，置于烘箱中(70～80℃)烘干至恒质量，最后用粉粹机将样品粉碎且过100目筛，装于试剂袋中，放入干燥器中待用。准确称取2．0000g待用的川芎样品于洁净干燥的小烧杯中，

加入30mL混合酸(HClO4 ∶ HNO3 = 1∶5)，将烧杯置于电热板上低温加热消解，保持溶液处于微沸状态。当棕色烟挥发尽、HClO4 白烟冒尽、消化液变为透明色并近干时取下烧杯，冷却后转移至10mL容量瓶中定容。 黄连、地黄的处理方法相同。

2.3.3样品的测定

分别准确吸取5．00mL川芎、黄连、地黄样品溶液于50mL比色管中，分别加入5mL1mol/LNaOH 溶液(此时溶液pH值约为12)，再分别加入15mL0．002%双硫腙、1mL20%盐酸羟胺、1mL50%酒石酸钾钠、1mL20% OP乳化剂，用蒸馏水稀释至刻度线，静置20min，在紫外－可见分光光度计上用1cm的比色管测定吸光度，以空白溶液作参比。通过标准曲线回归方程求出各样品中的镉含量，同时进行加标回收试验。

03

第三部分:结果与分析

   

3.1紫外－可见分光光度法测定镉含量的最佳条件选择结果

镉的最大吸收波长选择结果见图1，分析可知，用紫外可见分光光度法得出镉的最佳吸收波长在537nm处。

由表1显色剂用量的选择结果可知，双硫腙的用量为15mL时测定的吸光度达到最大且比较稳定，因此在镉含量测定试验中选用的显色剂用量为15mL。

由表2显色时间的选择结果可知，显色时间为20min时测定的吸光度D537nm达到最大值且比较稳定，因此在镉含量测定的试验中选用的显色时间为20min。

由表3NaOH用量的选择结果可知，NaOH的用量为5mL时测定的吸光度达到最大且比较稳定，因此在镉含量测定的试验中，选择NaOH的用量为5mL。

镉标准样品的浓度及相应的吸光度结果见表4。回归方程及相关系数为:y=7．6571x+0．0351，r2=0．9977。以浓度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制出标准曲线，详见图2，可以看出，镉浓度在0～0．20μg/mL间有良好的线性关系。

3.2样品的测定结果

从表5的样品测定结果可以看出，3种中草药中都含有微量的重金属镉，其中川芎中含量最多，黄连中含量最少，但都在国家药用植物的规定范围内(≤0．3μg/g)。

3.3川芎加标回收率测定结果

由表6至表8的川芎加标回收率可以看出，试验准确度较高，稳定性较好，结果可靠。

04

第四部分:结论

   

本研究采用湿法消化(HNO3 、HClO4混酸)，以双硫腙为显色剂，在强碱性条件下，利用酒石酸钾钠、盐酸羟胺联合掩蔽，通过OP乳化剂增色增溶，用紫外－可见分光光度法在537nm处测定川芎、黄连、地黄3种常见中草药各样品的吸光度，求出样品中重金属镉的含量。结果表明，3种常见中草药中镉的含量分别为:川芎0．254μg/g，黄连0．045μg/g，地 黄0.195μg/g，镉含量大小依次为:川芎＞地黄＞黄连，但其镉含量符合我国制定的药用植物及制剂进出口绿色行业标准 (镉≤0．3μg/g)。另外本试验发现，分光光度法测定镉的最佳条件为:最佳吸收波长为537nm，NaOH的用量为5mL，显色时间为20min，显色剂的用量为15mL。试验结果提供了中草药中重金属镉含量的数据，对中草药是否存在重金属镉含量超标提供依据，同时也为中草药是否具有安全可靠的食用性提供数据参考。

方法来源：[1]杜军良,杨凤,万燕,等.分光光度法测定3种中草药中的镉含量[J].江苏农业科学,2015,43(04):299-301.DOI:10.15889/j.issn.1002-1302.2015.04.108.