Background
淀粉是人类营养中最重要的碳水化合物之一,也是自然界中最丰富的物质之一。作为一种植物来源的多糖,它在植物的根部或种子中作为葡萄糖的储存形式。对人类营养具有重要意义的富含淀粉的植物包括:谷物、玉米、水稻、马铃薯和木薯。除了在全球营养中不可或缺的作用外,淀粉还是一种可再生资源,广泛用于以下产品的生产:
纸张、胶水、纺织品、摄影产品
颜料、混凝土、石膏、粘合剂、塑料
汤、酱料、布丁、烘焙食品、糖果、谷物制品、可可粉
饮料、糖果、动物饲料
化妆品(如口红、面部粉饼)
药品(如软膏、乳膏、药丸)
实验原理与准备
01
原理
淀粉含量的旋光测定基于其光学活性。由于样品中并非仅淀粉具有光学活性,因此需测定其他光学活性物质,并用于最终计算淀粉含量。淀粉在水中溶解度较低,因此使用盐酸使其溶解。加热过程中,盐酸将大分子淀粉分解为可溶于水的葡萄糖单体。样品澄清后,滤液中仅含糖分子,可用于旋光仪测定其总旋光度。
为补偿其他光学活性物质的影响,样品另一部分仅用乙醇处理。小分子糖类等光学活性物质可溶于乙醇,而较大的淀粉分子不溶。通过总旋光度与乙醇可溶性物质旋光度之差,计算淀粉含量。淀粉的比旋光度极高(>+180.0),因此即使样品中淀粉含量仅为毫克级也可测定。旋光度可用角度(°)或国际糖度(°Z)表示。
02
试剂
盐酸
乙醇
Carrez试剂 I
Carrez试剂 II
03
仪器
Anton Paar的MCP旋光仪系列非常适合进行淀粉旋光度分析:
- MCP 5500/5100/4100 旋光仪,配200 mm旋光管及Peltier控温模块。所有MCP型号均满足±0.01°的最小精度要求
- 可选:MCP 5500/5300 糖度计,建议配备Peltier控温和FillingCheck?功能
实验步骤
样品需尽可能粉碎,并通过0.5 mm圆孔筛,以避免均质问题导致淀粉含量测定误差及过滤困难。
01
总旋光度测定
在100 mL容量瓶中称取粉碎后的样品,加入盐酸,摇匀。二次加酸。将容量瓶放入沸水浴中,前3分钟持续摇动以防结块。水浴水量需足够保持沸腾状态。持续加热15分钟,期间不断摇动。
取出后加冷水,立即冷却至20°C。加入Carrez I试剂,摇匀1分钟;再加入Carrez II试剂,再摇1分钟。加水定容,过滤,必要时可离心加速。若滤液不清,应增加Carrez试剂用量重复操作。
在20°C下,用MCP旋光仪或糖度计测定滤液的旋光度,使用200 mm旋光管。
02
乙醇可溶性物质旋光度测定
称取粉碎样品于100mL容量瓶中,加入40%乙醇,1小时内剧烈摇动6次确保充分混合。
取滤液于250 mL锥形瓶中,加入盐酸,摇匀后连接回流冷凝管,沸水浴加热15分钟。取出后转入100 mL容量瓶,用少量冷水冲洗锥形瓶并一并转入,冷却至20°C。
若样品含乳糖高(如乳清、脱脂奶粉),则需用乙醇处理后,50°C水浴30分钟,再冷却。
上述溶液加入Carrez I和Carrez II试剂,定容、摇匀、过滤,20°C下测定旋光度,使用200 mm旋光管。
该方法也可(有时需稍作修改)用于测定其他样品中的淀粉含量,如食品、玉米、马铃薯、饼干、可可粉等。
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