方案突破！飞诺美色谱柱助力红曲中软毛青霉酸高灵敏度液质方法开发

软毛青霉酸不经衍生化直接质谱检测时需要使用碱性流动相如 0.1% 氨水才能离子化产生负离子模式下质谱信号，而使用碱性流动相时因其完全离子化从而在常规色谱柱上完全不能保留，无法与样品中其它成分实现有效分离，灵敏度大受影响。现有文献报道中也无法区分其两种构型异构。此次事件中日本方面使用液相色谱法进行检测，检出限接近 10mg/kg。无法满足实际筛查需要。

杭州市食品药品检验科学研究院伍勋团队联合 Phenomenex 携手 SCIEX 公司开发了创新性的利用三甲基硅烷化重氮甲烷对软毛青霉酸中的羟基进行甲基化衍生后检测的高灵敏度液质筛查方法。该方法通过衍生化使软毛青霉酸结构中的羟基衍生成甲氧基，从而能被色谱柱保留使其与红曲中其它成分分离，在 SCIEX 7500+ 质谱检测器中转而使用正离子模式检测，灵敏度大幅提升。使用 Phenomenex Kinetex C8 核-壳液相色谱柱（100 mm × 2.1 mm，2.6 μm）还能将软毛青霉酸两种构型异构进行色谱质谱表征。定量采用两种异构体峰面积之和定量，检出限 1μg/kg（上机浓度 1pg/ml），灵敏度是液相色谱的 1 万倍，线性范围 10-1000pg/ml，基质效应小于 5%，回收率在 92.69%-105.16% 之间。两种异构体衍生物在CID模式下质谱碎片相同，因此使用 SCIEX7600 高分辨质谱特有的 EAD 模式进行二级质谱解析确认。目前该检测方法已经申请发明专利，相关论文已经投稿，有望为国内红曲质量安全评估提供技术支撑。