以下是关于小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南:
BS-2016 小鼠CXC趋化因子受体3(CXCR3)ELISA试剂盒
一、试剂盒组成
预包被酶标板:96孔或48孔规格,含抗小鼠CXCR3单抗
标准品:通常为80ng/瓶或240ng/L浓度,提供2-5瓶
检测试剂:
酶标抗体工作液(HRP标记)
显色液(TMB A/B液)
终止液(硫酸溶液)
辅助溶液:
10×标本稀释液、20×浓缩洗涤液
封板膜、密封袋等耗材
二、样本处理
样本类型:血清、血浆、细胞上清液或组织匀浆
处理方法:
血清/血浆:1000-3000×g离心10-30分钟,去除颗粒或纤维蛋白
细胞上清:离心去除细胞碎片
组织匀浆:生理盐水匀浆后离心取上清
保存条件:-20℃分装冻存,避免反复冻融
三、实验步骤(双抗体夹心法)
标准品稀释:用标准品稀释液配制梯度浓度(如0-400 ng/L)
加样:
每孔加入100μL标准品或样本,37℃孵育1-2小时
洗涤:甩干孔内液体,加满洗涤液静置30秒,重复3-5次
加酶标抗体:每孔加入100μL HRP标记抗体,37℃孵育30-60分钟
显色:加入TMB底物避光反应15-30分钟
终止与检测:
加终止液(50μL/孔)后立即测定450nm OD值
根据标准曲线计算样本浓度
四、注意事项
温度控制:
试剂使用前需室温平衡20分钟,避免低温影响灵敏度
显色反应需严格避光
操作规范:
避免孔间交叉污染,使用独立枪头
边缘孔易出现“边缘效应”,建议弃用外周孔
数据有效性:
标准曲线R²应≥0.99,复孔CV值<15%
五、常见问题
灵敏度下降:可能因试剂未恢复至室温或超过有效期
背景过高:洗涤不彻底或样本溶血导致
如需完整说明书或技术支持,建议联系厂商获取版本。
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