多肽序列选择

什么是多肽序列

1、序列中包含过多的疏水性氨基酸

一般来讲序列中有50%的疏水性氨基酸可大概判断为较难溶序列（较短的序列除外），更多的疏水性氨基酸不利于合成的粗品纯度提高，对于纯化的溶解制备都是较大的困难，一般需在纯度上沟通好。

2、重复序列

重复序列会造成合成困难，容易形成性质相近的残肽，从而在纯化时较难分离。

3、未知修饰

对于特殊修饰、客户提供特殊小分子等，即便是合成方法的理论可行，不代表实验一定成功，确定时需多做考虑，将可能问题体现讲清楚，避免不必要的纠纷。

4、长肽

所有的合成反应，效率都不能达到JD的100%，序列越长，产生的副反应和杂质也越多，正确率、收率都会大大降低，目前我们公司在长肽的合成积累了大量的经验，理论上尽量不要超过60aa长度，超过80aa长度的，考虑到合成难度、成本等，一般还是采用生物合成。

5、磷酸化修饰

根据合成经验，3或4个的磷酸化修饰位点合成难度大大增加，更多的磷酸化成功率较低，一般只能做小量合成，合成周期、价格也会大幅提升，另外磷酸化修饰的位点不宜相近或相连，靠近序列的N端对降低合成难度有利。

6、多对二硫键成环

二硫键的环化会降低序列的溶解性，对于客户要求多对（3-4对）二硫键成环的序列多为天然序列，非天然序列会存在配对错误的可能，此为环化过程的难点，另外多对二硫键收率都较低，合成时间跟价格也会大幅提升。

7、首尾酰胺环

序列中氨基酸组合对首尾酰胺环的成功率影响较大，含Asp和Glu的序列可选择固相环化，成功率较高，对于液相首尾酰胺环，序列中含D型氨基酸有利于成环。

8、二肽或三肽的合成

短肽的合成往往收率较低，合成的困难在于裂解后，粗肽无法经析出，纯化的困难在于含95%TFA的裂解液不能直接应用于制备，另外短肽极性较大，较难吸附制备柱，造成合成和纯化的困难。

国肽生物提供150个氨基酸以内的长肽合成服务。

多肽合成过程中，肽链过长时，经常会出现缺残基，氨基酸缩合困难等情况，基于这些现象，我们开发了三种有效提高反应成功率的方案：

1. 微波合成法：对于合成过程中出现的一些难以缩合的氨基酸，我们采用微波法进行合成，该方法效果显著，并且大大缩短了反应时间。

2. 片段合成法：当某些多肽用常规合成方法合成困难，我们也会采用将多肽中某一段的某几个氨基酸缩合之后作为一个整体缩合到肽链上去，这种方法也能够解决许多合成中存在的问题。

3.酰肼合成法：酰肼法合成多肽的方法是将固相合成的 N末端Cys 多肽和 C末端多肽酰肼之间的化学选择性反应形成酰胺键而实现多肽的连接，该方法根据肽链中Cys的位置，将整条肽链分成多条序列分别合成，经过液相缩合反应得到目标肽，显著地提高了ZZ产物纯度，广泛适用于含有Cys的长链多肽的合成。

国肽生物拥有成熟的长肽合成工艺，能够根据客户定制的多肽序列，快速有效地设计合成方案并迅速开始合成，更快更好的为客户提供所需的服务是我们不变的坚持。

国肽生物主要提供：多肽合成、多肽定制、同位素标记肽、人工胰岛素、磷酸肽、生物素标记肽、荧光标记肽（Cy3、Cy5、Fitc、AMC等）、目录肽、偶联蛋白（KLH、BSA、OVA等）、美容肽、化妆品肽、多肽文库构建、抗体服务、糖肽、订书肽、药物肽、RGD环肽等。

国肽生物：www.bankpeptide.com

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