?? 胶原酶:解锁组织奥秘的“分子剪刀”
胶原酶作为组织解离的核心工具,能够特异性切割胶原蛋白的三螺旋结构,是获取高活性单细胞悬液的关键。无论是类器官构建、单细胞测序,还是原代细胞培养,胶原酶都是不可或缺的科研助手!
?? 胶原酶选择指南
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?? 经典文献案例速递——胶原酶助力单细胞研究新突破
1. 运动抗衰老机制(Sun S, et al. Innovation (Camb). 2023. PMID: 36747595)
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小鼠不同组织特异性解离方案
2. 首个猪多器官单细胞图谱(Wang F, et al. Nat Commun. 2022. PMID: 35750885)
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猪不同组织特异性解离方案
?? 实操技巧:提升解离效率
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常见问题解答
Q
赛默飞胶原酶如何配制和保存?
A
使用含钙镁的HBSS(货号14025092)配制成100 U/μL (1000X) 的储液,然后使用低蛋白吸附的0.22μm滤膜过滤除菌,分装后储存于-5℃至-20℃,后续使用时尽量避免反复冻融。具体的活性单位请参见瓶身标签或对应批次的质检报告(COA)。
Q
胶原酶的工作浓度是多少?如何确定最佳使用浓度?
A
胶原酶的典型工作浓度为 50-200 U/mL(或 0.1-0.5% w/v),但不同组织需优化酶浓度和时间,建议参考文献并进行实际验证。
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