以下是鸡极低密度脂蛋白(VLDL)ELISA试剂盒的实验使用说明书综合整理:
BS-7303 鸡极低密度脂蛋白(VLDL)ELISA试剂盒
一、实验原理
采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。通过预包被抗体的微孔板捕获样本中的VLDL,加入酶标记检测抗体后形成复合物,经底物显色(TMB显蓝色,酸化后转黄色),颜色深浅与VLDL浓度成正比。
二、试剂盒组成
预包被板条:96孔或48孔配置(含空白对照孔)
标准品:24ng/ml(需按说明书稀释)
酶标抗体:HRP标记的检测抗体
底物(A/B液):TMB显色液
终止液:酸性溶液
洗涤液:需稀释的浓缩液
三、操作步骤
样本准备
血清/血浆样本需离心去除颗粒物,建议1:1稀释后使用。
标准品与样本加样
标准品孔:加入不同浓度标准品50μL。
样本孔:加入待测样本50μL,空白孔不加。
孵育与洗涤
加入酶标抗体100μL,37℃孵育60分钟。
洗涤5次(每孔加洗涤液350μL,静置1分钟后拍干)。
显色与终止
每孔加底物A/B各50μL,37℃避光孵育15分钟。
加入终止液50μL,5秒内摇匀。
检测
酶标仪450nm波长测定OD值。
四、注意事项
保存条件:试剂盒2-8℃保存,频繁使用时避免反复冻融。
交叉污染:使用一次性吸头,避免金属部分接触终止液/底物。
洗涤要求:充分拍干微孔板,避免残留液体影响结果。
数据有效性:标准品线性回归R值需≥0.9900,批内变异系数<15%。
五、技术参数
检测范围:10–320 μmol/L(不同品牌可能差异)。
灵敏度:检测浓度<1.0 ng/L。
有效期:6个月(2-8℃保存)。
注:以上仅供参考,如需具体品牌试剂盒的差异说明,可进一步补充信息。
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