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杨艳 冉良骥
贝伐珠单抗
贝伐珠单抗是一种用于治疗多种癌症的药物，通过抑制血管内皮生长因子（VEGF）来阻断肿瘤新生血管的生成，被广泛应用于转移性结直肠癌、宫颈癌及卵巢癌等治疗。贝伐珠单抗的原研公司是罗氏，国内已经超过10家生物类似药上市。2024年中国市场突破100亿元，2026年预计120-150亿元。另外，贝伐珠单抗注射液是2025版《中国药典》三部新增的品种。
Vanquish Duo双系统UHPLC
Vanquish Duo UHPLC系统是一款生物兼容的超高效液相色谱平台，该系统自动进样器含有两根独立的进样针和进样针座，可以整合两套梯度流路于一台仪器中，可同时运行两个独立的液相色谱流程，实现零交叉污染。这意味着可以同时对不同样品或不同方法进行分析，显著提高样品通量，在不增加占用空间的情况下扩展实验室能力。在软件控制方面，可以与Chromeleon色谱数据系统（CDS）无缝集成，可在单一界面控制两个独立流路，并支持全面法规遵从的数据管理。
仪器配置
Thermo Fisher Vanquish Duo双系统
泵：2*Binary Pump F（P/N:VF-P10-A）
双针自动进样器：Dual Split Sampler FT（P/N:VF-A40-A）
柱温箱：2*Column Compartment H（P/N:VH-C10-A）
VWD检测器：2*Variable Wavelength Detector F（P/N:VF-D40-A）
实 验 结 果
SEC模式 测试结果
本文采用UHPLC（Vanquish Duo双系统的左系统）结合快速SEC色谱柱测试贝伐珠单抗，从传统的30分钟一针提速到8分钟，速度起飞！
Vanquish Duo左系统 + 快速SEC柱：
流速0.35 mL/min下，聚集体3.16%、单体96.72%、片段0.12%
与HPLC（MabPac SEC-1）结果高度一致，但多捕获低含量片段，灵敏度完胜！
3针保留时间重复性RSD小于0.2%，压力稳定，8分钟一针通量爆炸！
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离子交换模式 测试结果
本文采用UHPLC（Vanquish Duo双系统的右系统），分别使用色谱柱ProPac SCX 3R和ProPac WCX-10（药典色谱条件）测试贝伐珠单抗。ProPac SCX 3R的一针时间为25 min，ProPac WCX-10的一针时间为90 min。两个方法的色谱峰及峰纯度存在差异的原因：一、两个方法分离原理的差异，分别是pH梯度和盐梯度；二、色谱柱的固定相也不一样，ProPac SCX 3R 是以磺酸基为固定相的强阳离子交换柱，ProPac WCX-10是以羧酸基为固定相的弱阳离子交换柱；三、两根色谱柱的规格不一致。本文以该案例分享快速离子交换方法，新项目可以使用ProPac SCX 3R和Vanquish Flex液相快速测定抗体类药物主峰纯度、酸碱性峰纯度。
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结论
1、快速SEC + Vanquish Duo，8min搞定大小异质体，数据可靠、通量爆炸！
2、ProPac SCX 3R快速IEX，25min征服电荷异质性，新项目首选！
3、Vanquish Duo双系统并联液相可以同时分析SEC和离子交换方法，共享样品，节省实验室空间和仪器成本，提高分析速率，是实验室的“效率护城河”
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