癌症诊疗中,精准识别肿瘤边界是关键。然而,传统影像学(CT、MRI)依赖解剖形态[1],HE染色虽是病理金标准,却因化学试剂依赖、样本处理复杂、耗时长等问题。如今,拉曼光谱技术正以"无标记、无损、分子级精准"的优势,重塑肿瘤病理检测格局。P300共聚焦拉曼光谱仪为实现肿瘤边界的精准识别提供了新的视角。
技术亮点
1. 共聚焦拉曼设计:
精准聚焦生物信号,屏蔽杂光干扰,确保数据纯净度。
2. 多维校正:
内置光谱校正装置,数据稳定性不受环境波动影响。
3. 零染色:
无需化学试剂处理,保留样本原始形态,避免染色偏差。
4. 分子级洞察:
直接解析核酸、蛋白、脂质等代谢物振动信号,提供比形态学更早的病变预警。
案例实证:胃癌切片的分子级"指纹图谱"
1. 实验设计
研究团队选取胃癌患者冷冻切片(厚度8 μm),对相邻切片分别进行HE染色与拉曼光谱采集。拉曼检测切片置于专用芯片,避免普通载玻片信号干扰。
2. 结果
特征峰差异:如图1 B所示,正常组织在748 cm?1(DNA/色氨酸特征)信号强,肿瘤组织在1580 cm?1(DNA/苯丙氨酸特征)信号显著增强。如图1 C所示,正常组织和肿瘤组织在748、1126、1168、1222、1580、1632 cm-1处峰强均有差异。
图1 正常组织与肿瘤组织拉曼光谱差异
拉曼光谱扫描+智能分析:对正常组织与肿瘤组织的混合区域光谱数据进行分析,发现748与1580 cm-1的峰强与HE染色结果存在相关性,将拉曼光谱扫描结果进行聚类和SVM分类,将结果中的不同分类采用伪彩标记,如图2 B IV、V所示,预测了肿瘤细胞与正常细胞的分界线。上述分类结果采用散点图呈现如图2 C所示,混合区域分类准确率如图2 D所示达到96%。
图2 拉曼光谱扫描对肿瘤边界的识别
研究意义
拉曼光谱扫描成像较自发荧光/漫反射成像在信噪比、准确率[2]上提升较大,较HE染色流程又较为简洁快速,保持样品完整度的同时,能够准确定位肿瘤浸润边界,为医学工作者提供分子级切除参考,无论是临床手术参考,降低术后复发风险,还是癌症机制探索,P300共聚焦拉曼光谱仪无标记、快速、高灵敏度的检测将为癌症相关的医学研究提供全新视角。
参考文献:
[1] Wang, Y., Fang, L., Wang, Y., & Xiong, Z. (2024). Current Trends of Raman Spectroscopy in Clinic Settings: Opportunities and Challenges. Advanced science (Weinheim, Baden-Wurttemberg, Germany), 11(7), e2300668. https://doi.org/10.1002/advs.202300668
[2] Majumder, S. K., Keller, M. D., Boulos, F. I., Kelley, M. C., & Mahadevan-Jansen, A. (2008). Comparison of autofluorescence, diffuse reflectance, and Raman spectroscopy for breast tissue discrimination. Journal of biomedical optics, 13(5), 054009. https://doi.org/10.1117/1.2975962
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