胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书

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• 胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书

  胞浆内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书[详细]

  2014-12-26 00:00

  期刊论文

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• 胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒产品说明书

  胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂盒产品说明书主要用途胞浆内钙离子浓度荧光（Fura-2）检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Fura-2-AM，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下测量不同激发波长下相对荧光峰值的比值，来测定细胞浆总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞（动物、人体等）或冰冻切片组织细胞浆钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（ionizedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中细胞浆钙离子在调节钙离子通道，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。细胞浆钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要线粒体、细胞浆分离。Fura-2AM（acetoxy-methylester），一种具有细胞膜通透性，与钙离子结合产生荧光的染料，通过其不同激发波长340nm/380nm产生的荧光信号比（散发波长510nm）来极ng确测定细胞浆内钙离子水平。产品内容清理液（ReagentA）40毫升染色液（ReagentB）30微升介导液（ReagentC）600微升饱和液（ReagentD）2毫升阴性液（ReagentE）2毫升裂解液（ReagentF）200微升产品说明书1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介导液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器细胞培养箱：用于染色孵育96孔培养板：用于样品操作的容器荧光酶标仪：用于荧光分析（共聚焦）荧光显微镜：用于荧光染色观察实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪：激发波长340nm和380nm，散发波长510nm测定开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（ReagentB）室温下融化，然后分别移出30微升介导液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升离心管，标记为染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个96孔细胞培养板，标记为：细胞样品孔、空白对照孔（不含细胞）、Zda对照孔（含细胞）小心抽去细胞样品孔的培养液加入100微升清理液（ReagentA）到细胞样品孔里加入100微升饱和液（ReagentD）到Zda对照孔里加入100微升阴性液（ReagentE）到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动酶标板，混匀放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照小心抽去细胞样品孔里的上清液小心加入100微升清理液（ReagentA）到细胞样品孔里重复实验步骤9和10一次放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟加入5微升裂解液（ReagentF）到Zda对照孔里放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relativefluorescenceunit；RFU）包括样品RFU340nm、样品RFU380nm、空白对照孔RFU340nm、空白对照孔RFU380nm、Zda对照孔RFU340nm、Zda对照孔RFU380nm计算样品细胞浆钙离子浓度【（样品RFU340nm/样品RFU380nm）－（空白对照孔RFU340nm/空白对照孔RFU380nm）÷（Zda对照孔RFU340nm/Zda对照孔RFU380nm－样品RFU340nm/样品RFU380nm）】X（空白对照孔RFU380nm/Zda对照孔RFU380nm）X140（纳摩尔；解离常数）三、（共聚焦）或荧光显微镜检测1．准备1个待测的细胞爬片样品小心加上500微升清理液（ReagentA），覆盖样品表面小心移去样品上的清理液（ReagentA）移取300微升清理液（ReagentA）到新的1.5毫升离心管加入30微升染色工作液，混匀小心加上上述含有染色工作液的溶液到样品上，覆盖样品表面放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照小心移去样品上的染色工作液小心加上500微升新鲜的清理液（ReagentA）小心移去清理液（ReagentA）小心加上500微升新鲜的清理液（ReagentA）放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟小心移去清理液（ReagentA）盖上盖玻片即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长340至400nm，散发波长510nm（细胞浆钙离子呈现蓝色荧光）四、冰冻切片检测准备1个待测的冰冻切片小心加上500微升清理液（ReagentA），覆盖切片样品表面小心移去样品上的清理液（ReagentA）移取300微升清理液（ReagentA）到新的1.5毫升离心管加入30微升染色工作液，混匀小心加上上述含有染色工作液的溶液到切片样品上，覆盖样品表面放进37℃细胞培养箱里孵育60分钟，避免光照小心移去切片上的染色工作液小心加上500微升新鲜的清理液（ReagentA）小心移去清理液（ReagentA）小心加上500微升新鲜的清理液（ReagentA）放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟小心移去清理液（ReagentA）盖上盖玻片即刻在（共聚焦）荧光显微镜下进行观察：激发波长340至400nm，散发波长510nm（组织细胞浆钙离子呈现蓝色荧光）注意事项本产品为20次（显微镜）或60次（酶标板）操作操作时，须戴手套可以使用荧光分光光度仪检测如果细胞内酯酶缺失，则建议使用微注射（microinjection）技术避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

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• 细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书

  细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书[详细]

  2024-09-28 00:46

  安装说明

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• 细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细胞线粒体内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2016-03-15 00:00

  选购指南

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• 细胞内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细胞内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-03-30 00:00

  操作手册

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• 组织内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）

  组织内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途组织内质网内钙离子浓度荧光检测试剂是一种旨在通过内质网钙离子特异性荧光探针Mag-Fluo--AM，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定内质网中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织（动物、人体等）内内质网钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（ionizedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中内质网钙离子储存在控制细胞活化、调控信号通路、蛋白分子转录后修饰，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。内质网钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要内质网纯化。Mag-Fluo--AM染料是一种钙离子低亲和性的荧光标记染料，特异性地由内质网捕获，可以检测内质网内的游离钙离子浓度的变化。在荧光分光光度仪下，激发波长490nm，散发波长525nm，来定量测定内质网的钙浓度。[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 细胞内质网内钙离子浓度荧光检测试剂盒

  主要用途细胞内质网内钙离子浓度荧光检测试剂是一种旨在通过内质网钙离子特异性荧光探针Mag-Fluo-AM，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定内质网中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞（动物、人体等）内内质网钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（ionizedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中内质网钙离子储存在控制细胞活化、调控信号通路、蛋白分子转录后修饰，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。内质网钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要内质网纯化。Mag-Fluo-AM染料是一种钙离子低亲和性的荧光标记染料，特异性地由内质网捕获，可以检测内质网内的游离钙离子浓度的变化。在荧光分光光度仪下，激发波长490nm，散发波长525nm，来定量测定内质网的钙浓度。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书

  细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod-2-AM，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定细胞线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞（动物、人体等）内线粒体钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（ionizedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的ATP产量达到细胞需求，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要线粒体纯化。Rhod-2-AM，罗丹明123（rhodamine123）的衍生产物，一种与钙离子结合产生荧光，Rhod-2-AM，进入细胞受到酯酶解离，同时其正电荷特性，特异性地聚集在线粒体里，由此用于测定线粒体内钙离子水平。在荧光分光光度仪下，激发波长550nm，散发波长590nm，来定量测定线粒体的钙浓度。产品内容清理液（ReagentA）10毫升染色液（ReagentB）30微升介导液（ReagentC）600微升饱和液（ReagentD）2毫升阴性液（ReagentE）2毫升裂解液（ReagentF）200微升产品说明书1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介导液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器细胞培养箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于样品操作的容器荧光酶标仪：用于荧光分析实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪（22℃）：激发波长550nm，散发波长590nm测定开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（ReagentB）室温下融化，然后分别移出30微升介导液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升离心管，标记为染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个黑色96孔板，标记为：细胞样品孔、空白对照孔（不含细胞）、Zda对照孔（含细胞）小心抽去细胞样品孔的培养液加入100微升清理液（ReagentA）到细胞样品孔里加入100微升饱和液（ReagentD）到Zda对照孔里加入100微升阴性液（ReagentE）到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动黑色96孔板，混匀放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟，避免光照小心抽去细胞样品孔里的上清液小心加入100微升清理液（ReagentA）到细胞样品孔里重复实验步骤9和10一次放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟加入5微升裂解液（ReagentF）到Zda对照孔里放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relativefluorescenceunit；RFU）计算样品线粒体钙离子浓度【（样品RFU－空白对照孔RFU）÷（Zda对照孔RFU－样品RFU）】X570（纳摩尔；解离常数）注意事项本产品为20次操作操作时，须戴手套避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围可以使用荧光分光光度仪检测本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-19 10:00

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• 组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书

  组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书主要用途组织线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod-2，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定组织线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织（动物、人体等）内线粒体钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（ionizedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的ATP产量达到细胞需求，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要线粒体纯化。Rhod-2，罗丹明123（rhodamine123）的衍生产物，一种与钙离子结合产生荧光，同时其正电荷特性，特异性地聚集在线粒体里，由此用于测定线粒体内钙离子水平。在荧光分光光度仪下，激发波长550nm，散发波长590nm，来定量测定线粒体的钙浓度。产品内容清理液（ReagentA）40毫升染色液（ReagentB）30微升介导液（ReagentC）600微升饱和液（ReagentD）2毫升阴性液（ReagentE）2毫升产品说明书1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介导液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器细胞培养箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于样品操作的容器荧光酶标仪：用于荧光分析实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪（22℃）：激发波长550nm，散发波长590nm准备好纯化的线粒体样品，置于冰槽里融化测定开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（ReagentB）室温下融化，然后分别移出30微升介导液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升离心管，标记为染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个黑色96孔板，标记为：线粒体样品孔、空白对照孔（不含线粒体）、Zda对照孔（不含线粒体）移取100微升纯化线粒体样品（100微克）到线粒体样品孔里加入100微升饱和液（ReagentD）到Zda对照孔里加入100微升阴性液（ReagentE）到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动黑色96孔板，混匀室温下（22℃），孵育30分钟，避免光照放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟，避免光照即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relativefluorescenceunit；RFU）计算样品线粒体钙离子浓度【（样品RFU－空白对照孔RFU）÷（Zda对照孔RFU－样品RFU）】X570（纳摩尔；解离常数）=纳摩尔/100微克线粒体注意事项本产品为20次操作操作时，须戴手套避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围可以使用荧光分光光度仪检测本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-19 10:00

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• 植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  植物钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途植物钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过钙离子特异性荧光探针Fluo-4，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定植物组织裂解悬液中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织，包括种子（seed）、叶片（leaf）、根（root）、胚胎叶（cotyledon）、上胚轴（epicotyl）等裂解萃取样品中总钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（ionizedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求。Fluo-4，一种与钙离子结合，其荧光强度迅速增强100倍的荧光探针，可以敏感测定微量游离钙离子水平。在荧光分光光度仪下，激发波长485nm，散发波长520nm，来定量测定植物组织细胞的钙浓度。产品内容清理液（ReagentA）60毫升裂解液（ReagentB）20毫升反应液（ReagentC）6毫升饱和液（ReagentD）2毫升阴性液（ReagentE）2毫升产品说明书1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里；反应液（ReagentC）避免光照；有效保证6月[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒 说明书（中文版）

  组织钙离子浓度荧光定量检测试剂盒 说明书（中文版）[详细]

  2014-12-29 00:00

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• 大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒

  大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 14:56

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• 人 （Human） 胞浆型磷脂酶A2 （cPLA2） ELISA 检测试剂盒说明书

  人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：cPLA2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知cPLA2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将cPLA2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中cPLA2的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：400U/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗cPLA2抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。试剂的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：400U/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200U/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100U/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50U/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25U/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5U/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0U/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（U/ml）A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的cPLA2标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的cPLA2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-400U/ml4、敏感度：1.0U/ml[详细]

  2018-09-14 10:00

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• 人胞浆型磷脂酶A2ELISA检测试剂盒实验结果

  人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆试验原理：cPLA2试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知cPLA2浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将cPLA2和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中cPLA2的浓度呈比例关系。试剂盒内容及其配制试剂盒成份（2-8℃保存）96孔配置48孔配置配制96/48人份酶标板1块板（96T）半块板（48T）即用型塑料膜板盖1块半块即用型标准品：400U/ml1瓶（0.6ml）1瓶（0.3ml）按说明书进行稀稀空白对照1瓶（1.0ml）1瓶（0.5ml）即用型标准品稀释缓冲液1瓶（5ml）1瓶（2.5ml）即用型生物素标记的抗cPLA2抗体1瓶（6ml）1瓶（3.0ml）即用型亲和链酶素-HRP1瓶（10ml）1瓶（5.0ml）即用型洗涤缓冲液1瓶（20ml）1瓶（10ml）按说明书进行稀释底物A1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型底物B1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型终止液1瓶（6.0ml）1瓶（3.0ml）即用型标本稀释液1瓶（12ml）1瓶（6.0ml）即用型自备材料蒸馏水。加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200ul、500ul、1000ul。振荡器及磁力搅拌器等。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒安全性避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。操作注意事项试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。使用一次性的吸头以免交叉污染，吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。样品收集、处理及保存方法血清-----操作过程中避免任何细胞刺激。使用不含热原和内毒素的试管。收集血液后，1000×g离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。血浆-----EDTA、柠檬酸盐、肝素血浆可用于检测。1000×g离心30分钟去除颗粒。细胞上清液---1000×g离心10分钟去除颗粒和聚合物。组织匀浆-----将组织加入适量生理盐水捣碎。1000×g离心10分钟，取上清液保存------如果样品不立即使用，应将其分成小部分-70℃保存，避免反复冷冻。尽可能的不要使用溶血或高血脂血。如果血清中大量颗粒，检测前先离心或过滤。不要在37℃或更高的温度加热解冻。应在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒的准备标准品：标准品的系列稀释应在实验时准备，不能储存。稀释前将标准品振荡混匀。稀释比例按下表中进行：400U/ml（6号标准品）原倍浓度不用稀释直接加入50ul。200U/ml（5号标准品）100ul的原倍标准品加入100ul的标准品稀释液100U/ml（4号标准品）100ul的5号标准品加入100ul的标准品稀释液50U/ml（3号标准品）100ul的4号标准品加入100ul的标准品稀释液25U/ml（2号标准品）100ul的3号标准品加入100ul的标准品稀释液12.5U/ml（1号标准品）100ul的2号标准品加入100ul的标准品稀释液0U/ml（空白对照）原始浓度不用稀释直接加入50ul。洗涤缓冲液（50×）的稀释：蒸馏水50倍稀释。操作步骤使用前，将所有试剂充分混匀。不要使液体产生大量的泡沫，以免加样时加入大量的气泡，产生加样上的误差。根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数。每个标准品和空白孔建议做复孔。每个样品根据自己的数量来定，能使用复孔的尽量做复孔。标本用标本稀释液1：1稀释后加入50ul于反应孔内。加入稀释好后的标准品50ul于反应孔、加入待测样品50ul于反应孔内。立即加入50ul的生物素标记的抗体。盖上膜板，轻轻振荡混匀，37℃温育1小时。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入80ul的亲和链酶素-HRP，轻轻振荡混匀，37℃温育30分钟。甩去孔内液体，每孔加满洗涤液，振荡30秒，甩去洗涤液，用吸水纸拍干。重复此操作3次。如果用洗板机洗涤，洗涤次数增加一次。每孔加入底物A、B各50ul，轻轻振荡混匀，37℃温育10分钟。避免光照。取出酶标板，迅速加入50ul终止液，加入终止液后应立即测定结果。在450nm波长处测定各孔的OD值。建议使用的实验方案标准品浓度（U/ml）A400400样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品B200200样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品C100100样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品D5050样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品E2525样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品F12.512.5样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品G00样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品H样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品样品局限6号标准品以上的结果为非线性的，根据此标准曲线无法得到极ng确的结果。试剂盒性能1.灵敏度：Z小的检测浓度小于1号标准品。稀释度的线性。样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990。2.特异性：不与其它细胞因子反应。3.重复性：板内、板间变异系数均小于10%。人(Human)胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA检测试剂盒结果判断与分析1、仪器值：于波长450nm的酶标仪上读取各孔的OD值2、以吸光度OD值为纵坐标（Y），相应的cPLA2标准品浓度为横坐标（X），做得相应的曲线，样品的cPLA2含量可根据其OD值由标准曲线换算出相应的浓度。3、检测值范围：0-400U/ml4、敏感度：1.0U/ml[详细]

  2018-09-19 10:00

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• 人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)检测试剂盒

  人抗中性粒细胞胞浆抗体(cANCA)检测试剂盒[详细]

  2024-09-23 22:25

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• 精子DNA吖啶橙荧光检测试剂盒产品说明书

  精子DNA吖啶橙（acridineorange）荧光检测试剂盒产品说明书主要用途精子DNA吖啶橙（acridineorange）荧光检测试剂是一种旨在使用吖啶橙染料使单链和双链DNA呈现不同荧光，确定精子染色质质量或DNA损伤的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种动物或人体精子细胞以及冻存精子细胞。产品严格无菌，即到即用，操作简便，性能稳定，荧光清晰。技术背景在男科学（Andrology）中，精子（spermatozoa）分析提供了精子生成（spermatogenesis）、精子寿命、以及生育能力的基础信息。其中精子的活力（vitality）、运动能力（motility）、授精潜力（fertilizingpotential）、膜结构或染色质结构完整性（integrity）、顶体反应（acrosomalreaction）功能的评价是精子分析的重要指标，也是决定人工受孕或体外授精（invitrofertilization；IVF）的重要参数。精子DNA损伤或染色质质量是不育症的主要因素之一。使用阳离子三环胺荧光染料吖啶橙（Acridineorange；AO）染色技术，是精子染色质分析和授精效率评价的Z常用的方法。基于正常精子细胞的染色质完整性和DNA双链特性，作为DNA染色剂之一的吖啶橙与正常非变性DNA，即双链DNA嵌合（intercalate）时，呈现绿色荧光（激发波长488nm，散发波长530nm）；而与变性DNA，即单链DNA结合时，呈现红色荧光（激发波长488nm，散发波长630nm），以此定量分析精子质量或DNA损伤。产品内容清理液（ReagentA）毫升固着液（ReagentB）毫升染色液（ReagentC）毫升产品说明书1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里，其余的保存在－20℃冰箱里；染色液（ReagentC）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品操作的容器微型台式离心机：用于样品操作血细胞计数器：用于细胞计数载玻片和盖玻片：用于精子细胞爬片（共聚焦）荧光显微镜：用于观察染色的精子细胞细胞流式仪：用于分析染色的精子细胞实验步骤一、细胞流式仪分析1．移取新鲜获得的1毫升精液（30分钟至1小时内）到1.5毫升离心管2．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g3．小心抽去上清液4．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群5．在血细胞计数器上进行精子细胞计数：1×107精子细胞/毫升6．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g7．小心抽去上清液8．重复实验步骤4至7一次（不包括实验步骤5）9．加入xx微升染色液（ReagentB），混匀颗粒群10．室温下孵育10分钟，避免光照11．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g12．小心抽去上清液13．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群14．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g15．小心抽去上清液16．重复实验步骤13至15一次17．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群18．即刻进行细胞流式仪双通道分析：观察10000个细胞以上，200细胞/秒；激发波长200mW，散发波长16mW激发波长488nm488nm匹配荧光染料异硫氰酸荧光素（FITC）藻红蛋白（phycoerythrin；PE）荧光颜色绿色红色散发波长530630流式仪通道FL1FL3荧光增强正常精子DNA异常精子DNA19．细胞流式仪检测正常精子DNA（双链DNA）参考图像如下（X轴：FL3；Y轴：FL1；R1左下角为细胞碎屑；R2为正常精子细胞；R3为异常精子细胞；R4为未成熟精子细胞）二、荧光显微镜分析1．移取新鲜获得的1毫升精液（30分钟至1小时内）到1.5毫升离心管2．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g3．小心抽去上清液4．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群5．在血细胞计数器上进行精子细胞计数：1×107精子细胞/毫升6．放进微型台式离心机离心5分钟，速度为600g7．小心抽去上清液8．重复实验步骤4至7一次（不包括实验步骤5）9．加入xx毫升清理液（ReagentA），混匀颗粒群10．即刻移取20微升到洁净的载玻片一端11．用盖玻片或另一个载玻片推片12．置于空气中凉干13．加上xx微升固着液（ReagentB），覆盖样品表面14．室温下孵育2小时15．小心抽去固着液16．小心加上xx微升染色液（ReagentC），覆盖样品表面17．室温下孵育5分钟，避免光照18．小心抽去染色液19．小心加上xx微升清理液（ReagentA），覆盖样品表面20．小心抽去清理液21．盖上盖玻片22．即刻在（共聚焦）荧光显微镜下观察并计数（注意：每个视野计数200个精子）23．分析结果（参考图）观察红色荧光：滤波器激发波长488nm，散发波长630nm――可见黄色、桔红色至红色荧光，表明精子DNA损伤包括单链DNA观察绿色荧光：滤波器激发波长490nm，散发波长530nm――可见绿色荧光，表明精子DNA正常注意事项1．本产品为50次操作2．操作时须戴手套3．样品检测前，建议在血细胞计数器上进行精子细胞计数4．精子细胞计数时乘上稀释倍数104。标准血细胞计数器（Hemocytometer）的计算方法是：1毫米方块的细胞计数X104（稀释倍数）＝实际细胞数/毫升5．染色完成后，即刻进行检测分析，否则由于其毒性导致精子DNA异常6．如果流式细胞仪出现干扰，建议使用630nm散发波长，或进行补偿处理，建议使用诱导处理样品：10单位DNaseI/毫升37℃孵育10分钟或直接70℃孵育30分钟7．本产品常用于冻存精子细胞的检测分析8．本产品可以用于精子染色质结构分析（SpermChromatinStructureAssay；SCSA），分析参数如下：%DFI%HDS名词解释DNA断裂指数DNAFragmentationIndexDNA着色程度HighDNAStainability相同命名COMPαtHIGRN计算方法红色荧光：红色＋绿色荧光之比高亮绿色荧光参考值正常人：小于15％正常人：小于10％阈值：小于30％阈值：小于15％高生育力：0－15％中等生育力：16－27％低或差生育力：27－30％参数意义DNA损伤程度精子成熟程度9．本公司提供系列发育生物学相关检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定荧光清晰[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit

  大鼠胞浆型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA Kit[详细]

  2015-10-10 00:00

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• 猪钙离子（Ca2+）ELISA试剂盒使用说明书

  南京森贝伽现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒森贝伽。本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定猪血清，血浆，细胞上清及相关液体样本中猪钙离子（Ca2+）的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪钙离子（Ca2+）水平。用纯化的猪钙离子（Ca2+）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入钙离子（Ca2+），再与HRP标记的钙离子（Ca2+）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的钙离子（Ca2+）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中猪钙离子（Ca2+）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：36umol/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品，因NaN3YZ辣根过氧化物酶的（HRP）活性。操作步骤：标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为24umol/ml，16umol/ml，8umol/ml，4umol/ml，2umol/ml）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：0.8umol/ml-30umol/ml保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 纯化线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂盒产品说明书

  主要用途纯化线粒体膜通道孔（MPTP）荧光检测试剂是一种旨在通过钙黄绿素载入后离心处理或钴淬灭技术，选择性地聚集在线粒体内呈现荧光染色，而存在于或由线粒体释放到线粒体外的荧光染料，即刻发生荧光去除或淬灭，来分析和观察线粒体膜通道孔活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种纯化线粒体膜通道孔活性（瞬时或长期开放状态）的检测。产品严格无菌，即到即用，活体检测，分辨率高，操作简捷，性能稳定。技术背景线粒体膜通道孔（mitochondrialpermeabilitytransitionpore；MPTP）是由线粒体内外膜成分构成的非特异性且钙离子依赖性通道。在细胞凋亡或坏死时，线粒体内容物通过膜通道孔释放到胞浆中。膜通道孔的开放，显著改变线粒体的通透性。钙离子过度进入、线粒体谷胱苷肽的氧化和活性氧族水平的增加等导致膜通道孔的持续开放，而造成细胞色素C的释放和线粒体膜电位的消失。钙黄绿素-AM，又称双甲亚胺二乙酸钠荧光素－乙酰氧基甲基酯【bis（bis-carboxymethylaminomethylfluorescein）-acetoxymethylester】，作为荧光探针：**，适宜的分子量622kd，小于1.5kd；第二，几乎不具有膜结合性；第三，不是线粒体酶的底物；第四，容易进入细胞及其线粒体。钙黄绿素-AM进入线粒体后，被内酯酶切离，产生具有极性的荧光性强的钙黄绿素，被线粒体俘获。同时线粒体外的钙黄绿素通过离心去除或受到其淬灭剂钴离子的淬灭。一旦线粒体膜通道孔瞬时开放，钙黄绿素释放出线粒体外，由于离心处理或被钴离子淬灭。线粒体内钙黄绿素荧光的变化，表明膜通道孔的开放状态。产品内容染色液（ReagentA）微升中和液（ReagentB）毫升保存液（ReagentC）毫升产品说明书1份保存方式保存染色液（ReagentA）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备黑色96孔板：用于线粒体荧光分析的容器1.5毫升离心管：用于线粒体染色的容器载波片/盖玻片：用于线粒体样品存放后荧光分析微型台式离心机：用于沉淀线粒体培养箱：用于染色孵育（共聚焦）荧光显微镜：用于线粒体荧光分析荧光分光光度仪或荧光酶标仪：用于线粒体荧光定量分析实验步骤直接法准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品（总量为0.2毫克）到1.5毫升离心管加入xx微升染色液（ReagentA），混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟，避免光照放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升37℃预热的保存液（ReagentC），混匀颗粒群放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去保存液（ReagentC）小心加入xx微升37℃预热的保存液（ReagentC），混匀颗粒群选择下列方式之一进行操作：（A）使用（共聚焦）荧光显微镜观察（定性检测）：1）移取10微升上述悬液到载波片上，盖上盖玻片2）激发波长488nm，散发波长505nm――绿色荧光减弱，表明膜通道孔活性（MPTP）增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测（定量检测）：1）移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2）即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪：激发波长488nm，散发波长505nm――RFU降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增强间接法实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（ReagentA）置入冰槽里融化，中和液（ReagentB）放进37℃恒温水槽里预热。然后移出xx微升染色液（ReagentA）到新的1.5毫升离心管，加入xx微升中和液（ReagentB），混匀后，标记为染色工作液，置入暗室里。然后进行下列操作。准备好待测的纯化线粒体样品移取100微升线粒体样品（总量为0.2毫克）到1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心5分钟，速度为16000g（或13000RPM，例如eppendorf5415）小心抽去上清液加入xx微升含有染色液（ReagentA）和中和液（ReagentB）的染色工作液，充分混匀放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟，避免光照选择下列方式之一进行操作：使用（共聚焦）荧光显微镜观察（定性检测）：1）移取10微升上述细胞悬液到载波片上，盖上盖玻片（每隔5分钟检测一次，持续30分钟）2）激发波长488nm，散发波长505nm――绿色荧光减弱，表明膜通道孔活性（MPTP）增强或使用荧光分光光度仪或荧光酶标仪检测（定量检测）：1）移取100微升上述悬液到100微升比色杯或黑色96孔板2）即刻放进荧光分光光度仪或荧光酶标仪（每隔5分钟检测一次，持续30分钟）：激发波长488nm，散发波长505nm――RFU降低，表明膜通道孔活性（MPTP）增强注意事项本产品为20次操作操作时，须戴手套染色前，所有试剂溶液，除染色液（ReagentA）外，需37℃预热建议染色完成后，即刻进行荧光检测分析孵育时，必须避免光照本产品友好使用于双重染色或重叠染色如果不具备505nm散发波长的滤波器，可以使用505nm至530nm中的任一波长如果黑色96孔板的背景读数过高，可以选择530nm散发波长如果膜通道孔为瞬时开放（transient），则荧光缓慢且自发降低本公司提供膜通道孔YZ剂：D0.2毫摩尔环胞素A（cyclosporineA）－12226，维护荧光完整本公司提供系列线粒体分析试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定荧光清晰[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞DNA损伤彗星完全荧光检测试剂盒产品说明书

  主要用途细胞DNA损伤彗星（Comet）完全荧光检测试剂是一种旨在采用动物细胞碱性凝胶电泳，在电场环境下，损伤变性的DNA片段迁移形成特定的形态，即DNA移动尾巴，来进行体外评价和半定量分析DNA损伤程度的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于新鲜动物细胞的DNA损伤研究，包括DNA链断裂、氧化性碱基损伤、DNA剪切损伤、DNA交联、DNA修复等，应用于环境和药物毒理学、放射学、氧化应急反应等研究。产品严格无菌，即到即用，性能稳定，操作简便，重复一致。技术背景彗星检测技术（Cometassay），又称为单细胞凝胶电泳检测技术（singlecellgelelectrophoresisassay；SCGE）或微凝胶电泳检测技术（microgelelectrophoresisassay），是基于变性切离的DNA片段，在电场的影响下，从细胞中移出的原理，而完整的超螺旋DNA仍然保持在细胞核内。通过凝胶电泳，呈现出分子迁移图形，形成彗星拖尾（comettail）现象，即完整DNA的细胞染色体为“头"，而松散和断裂的DNA为“尾"，以此评价DNA损伤程度。这是分析单一细胞DNA链断裂的敏感方法之一。其技术方法的基本步骤是：**，细胞固定包埋在凝胶里；第二，细胞裂解处理；第三，DNA变性处理；第四，电泳迁移；第五，染色和图像分析。由此观察DNA迁移形态，进行体外检测，成为细胞DNA损伤研究的基本手段。[详细]

  2018-11-18 10:00

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