1、标品配制
(1) 储备液100 mg/mL,准确称取各标准品,用水配制成100 ug/mL的储备液。
(2) 中间液10 ug/mL,分别吸取各单标标准储备液,用水配制成10 ug/mL的中间液。
2、提取
(1) 2 g样品,加入20 mL 氨水乙醇溶液,超声提取10min,振荡5 min, 6000 rpm离心2 min,收集上清液;
(2) 下面残渣再用20 mL氨水乙醇溶液重复提取一次,合并两次上清液;
(3) 取出20mL上清液,40℃下减压蒸至低于5mL,用水定容至10 mL,混匀,准备净化。
3、净化
ProElut 500 mg/6 mL NH2(Cat#63305)
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色谱柱:Diamonsil C18(2) 250×4.6 mm,5 μm(Cat.#:99603)
流速:1.0 mL/min,进样量:20 μL,柱温:35 ℃,
检测器:UV 484 nm
流动相:甲醇:0.02 mol/L乙酸铵=65:35
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