在做植物基因组提取实验时遇到的问题

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  zhet8uhb 2012-09-13 00:00:00

  颜色不均一很正常，但是不知道你的颜色深到了什么程度，我提取水稻基因组的时候颜色一般为淡黄色，深一点的也不过中度棕褐色，而且氯仿：异戊醇=24:1 其实这样的抽提液也挺好用 不必非要用到苯酚

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  baby墨情86 2012-09-19 00:00:00

  色素蛋白~~~追求纯度的话，可以在吸上清的时候少吸点儿。吸上清的时候请注意，吸的时候太快或者吸到中间层了。不会氧化得那么快，那么厉害的，酚氯仿上层有水隔离空气。多用氯仿抽几次也是可以纯化的，但是会有损失。

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  ouyangting8829 2012-10-29 00:00:00

  植物材料含有大量酚类化合物，与DNA共价结合，使DNA呈棕色，并YZDNA的酶解反应。为防止此情况出现，可在DNA提取液中加入2-5%的巯基乙醇

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  习惯成自然PAP 2012-09-13 00:00:00

  不知道你提取的是什么植物，不过用酚氯仿方法提基因组DNA有颜色是很正常的事。 首先，肯定不是蛋白质被吸上来了，你不放心可以少吸一点上清。由于某些植物中富含多酚多糖类物质，当从细胞中分离出来很容易氧化而转变成溶于水相的有颜色的成分。 还有你提到加酚的时候没有把枪头没入液体中，这也无关紧要，酚被氧化后的产物也只存在有机相中，所以不用担心。 你老师说颜色太深了，估计是你样本起始量放多了，你可以试着少加一点样本，裂解液翻倍加，放大体系通常可以稀释杂质的含量。 至于Z后DNA沉淀溶解后有颜色，如果条件允许的话，过个柱子纯化下即可。

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