大肠杆菌的分离方法

大肠杆菌是一种不同的原核生物，其无芽孢，能运动，周生鞭毛，大小0.5×1～3μm。其通常不致病，是人和动物肠道中的常居菌，在一定条件下可引起肠道外感染。下面就让小编为你介绍一下大肠杆菌的两种分离方法。

大肠杆菌有两种分离方法，分别是划线分离法以及涂布分离法。

在无菌操作台上用接种环取菌后在固体培养基的平板上连续划线。这种方法叫做划线分离法。

一、划线分离操作步骤

1.使用火焰灼烧接种环，直到烧红接种环为止。

2.在火焰旁将接种环冷却，并将棉塞打开。

3.将试管口通过火焰。

4.往菌液里伸入已经冷却的接种环获取菌液。

5.将试管口通过火焰，并将棉塞塞上。

6.使用左手将皿盖打开一条缝隙，使用右手往平板内迅速伸进去，划三到五条平行线，然后将皿盖盖上。千万要当心，不能将培养基划破如果滑坡了会导致划线不均匀，使得分离单菌落的目的难以达到。而且在划破的地方存留的单细胞不能产生规矩的菌落，菌落会沿着划破的地方生长，会产生一个条状的菌落。

7.使用火焰灼烧接种环，等到接种环冷却后，由diyi区域的尾部向第二区域划线。重复上述操作，往三、四、五区域内划线。需要留心的是不能将diyi区域和Z后一区域的划线相连。

8.倒置平板，然后放入培养箱中培养。

划线分离的注意事项

1.只能用接种环沾取一次菌液，却需要在培养基的不同地方连续划线多次。

2.划线不能将diyi区域和Z后一区域的划线相连。

3.在划线后，培养皿需要倒置培养12-24小时。

将培养的菌液稀释到一定的倍数，然后在固体培养基上加上一定量的稀释液，再在培养基平面上用玻璃刮刀涂布。这种方法叫做涂布分离法。

二、涂布分离操作步骤

1.取6支试管，分别注入9毫升水并进行灭菌，然后根据101-106顺序编号标记。

2.将移液管灭菌，使用移液管吸取1ml的培养液注入101试管里，使用手指轻压移液管的橡皮头，吹吸三次，让菌液和水充分混合均匀。

3.由标记101的试管中吸取1毫升稀释液，注入102试管里，再从102试管里吸取1毫升稀释液注入103试管里，以此类推，一直到Z后一支试管的稀释完成。

划线分离和涂布分离的优缺点

划线分离：方法简单，然而分开单菌落比较困难。

涂布分离：分开单菌落比较容易，但实验操作比较复杂。