PCR、SDS碱、含CTAB的裂解液裂解方法评价

核酸提取仪是应用配套的核酸提取试剂来使得样本核酸提取工作自动完成的仪器。其在、输血安全、法医学鉴定、疾病控制ZX、临床疾病诊断、生物学研究等多种领域得到广泛地应用。

PCR模板的简易裂解方法

PCR模板的简易裂解方法为使用面很广的一类方法。此方法不需要纯化，将样品裂解后，就能够直接获取裂解液用于PCR。亦是由于不经过纯化，因此会出现比较高比例的假阴性。该方法Z简单的就是反复冻融法，不需任何化学试剂，冻融离心，PCR检测就行，简便快捷。若使用该方法，那么水为Z简单的裂解液，更加复杂一点的裂解液会含有一些可以使裂解效率提高，不会对后续的PCR反应YZ的物质。

SDS碱裂解法

质粒抽提的裂shou选SDS碱裂解法，该方法几乎不会受基因组DNA污染，高得率，速度快。该方法成功的关键是温和的操作以及裂解液/菌体的比例的控制。温度在4℃，蛋白质会有更好一些的沉淀效率，因此，在溶液中加入以后静置在4℃下一段时间以及在4℃下离心将蛋白质除去均能够使质量提高。此方法不一定要使用PC纯化，然而若和PC纯化结合使用，能够使获得的质粒的纯度非常高。将RNaseA(100ug/ml)加入到溶液中或者在Z后的溶解液中将RNaseA(25ug/ml)加入来实现RNA的去除。总之，将RNaseA加入到溶液中会减少RNA的残留。不过，经典沉淀几乎没有办法将RNA残留彻底去除，除此以外，对大质粒(50kb以上)，使用此方法可能会出现问题。

含CTAB的裂解液方法

如细菌、植物等富含多糖的样品的基因组DNA抽提shou选含CTAB的裂解液的方法。此方法能否成功取决于洗涤的彻底程度和CTAB的质量这两个因素。CTAB的质量非常影响裂解效率。和其它的盐相比，洗涤去除CTAB要更加的难一些，并且酶活性会受到少量残留的CTAB的极大的影响。因此洗涤是否彻底也决定了该方法成功与否。多使用65摄氏度作为裂解时的温度。然而若发现得率太低或者降解严重，37-45这一相对比较低的温度范围也可以试一下。