细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性荧光定量检测试剂盒

本文由 上海哈灵生物科技有限公司 整理汇编

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• 细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性荧光定量检测试剂盒

  细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性荧光定量检测试剂盒[详细]

  2015-04-08 00:00

  期刊论文

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• 细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量检测

  主要用途细胞沉默调节蛋白1（SIRT1）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过比色探针对硝基苯胺标记人工合成的乙酰化p53多肽底物，经过SIRT1脱乙酰基后，被位点特异性氨基肽酶水解，释放黄色对硝基苯胺，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体）、核蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT1的活性定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景人体组蛋白脱乙酰基酶（histonedeacetylase；HDAC）家属分成三类共20多个蛋白：种类I（classI）与酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于细胞核中；种类II（classII）与酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于细胞核和细胞浆里；上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。种类III（classIII）为NAD+辅助因子必需，又称为sirtuins，与酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，为曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化赖氨酸脱乙酰基反应，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基团转化产生的烟酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于细胞核内，与酵母Sir2同源性Z高。其功能在于调节p53活性和YZ细胞凋亡。基于人工合成的乙酰化p53（379至382氨基酸位点）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切离的功能，首先使用比色染料对硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）来标记乙酰化p53多肽底物，其次进行脱乙酰化，Z后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解，释放出具有强烈吸光值的黄色对硝基苯胺（波长405nm），由此来定量测定沉默调节蛋白1的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

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• 细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量检测试剂盒（中文版）

  细胞沉默调节蛋白1 （SIRT1）活性比色法定量检测试剂盒（中文版）[详细]

  2015-04-08 00:00

  实验操作

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• 小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）ELISA试剂盒说明书

  小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）水平。用纯化的小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入沉默调节蛋白1（SIRT1），再与HRP标记的沉默调节蛋白1（SIRT1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的沉默调节蛋白1（SIRT1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：900pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为600pg/mL，400pg/mL，200pg/mL，100pg/mL，50pg/mL）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：22pg/mL-800pg/mL保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）ELISA试剂盒使用说明书

  我司ELISA试剂盒现货供应，质量保证，价格优惠，试剂盒森贝伽。本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定小鼠血清，血浆及相关液体样本中小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）水平。用纯化的小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入沉默调节蛋白1（SIRT1），再与HRP标记的沉默调节蛋白1（SIRT1）抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的沉默调节蛋白1（SIRT1）呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中小鼠沉默调节蛋白1（SIRT1）浓度。试剂盒组成：试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片（48）2片（96）密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：900pg/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存样本处理及要求：1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。5.组织标本：切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。操作步骤标准品的稀释与加样：在酶标包被板上设标准品孔10孔，在**、第二孔中分别加标准品100μl，然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl，混匀；然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔，再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl，混匀；然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉，再各取50μl分别加到第五、第六孔中，再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul，混匀；混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中，再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中，再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl，混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。（稀释后各孔加样量都为50μl，浓度分别为600pg/mL，400pg/mL，200pg/mL，100pg/mL，50pg/mL）。加样：分别设空白孔（空白对照孔不加样品及酶标试剂，其余各步操作相同）、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl，然后再加待测样品10μl（样品Z终稀释度为5倍）。加样将样品加于酶标板孔底部，尽量不触及孔壁，轻轻晃动混匀。温育：用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液：将30（48T的20倍）倍浓缩洗涤液用蒸馏水30（48T的20倍）倍稀释后备用。洗涤：小心揭掉封板膜，弃去液体，甩干，每孔加满洗涤液，静置30秒后弃去，如此重复5次，拍干。加酶：每孔加入酶标试剂50μl，空白孔除外。温育：操作同3。洗涤：操作同5。显色：每孔先加入显色剂A50μl，再加入显色剂B50μl，轻轻震荡混匀，37℃避光显色15分钟.终止：每孔加终止液50μl，终止反应（此时蓝色立转黄色）。测定：以空白空调零，450nm波长依序测量各孔的吸光度（OD值）。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项：试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。计算：以标准物的浓度为横坐标，OD值为纵坐标，在坐标纸上绘出标准曲线，根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度；再乘以稀释倍数；或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式，将样品的OD值代入方程式，计算出样品浓度，再乘以稀释倍数，即为样品的实际浓度。（此图仅供参考）试剂盒性能：1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围：22pg/mL-800pg/mL保存条件及有效期：1.试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2018-11-07 14:16

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• 组织沉默调节蛋白1活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途组织沉默调节蛋白1（SIRT1）活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过比色探针对硝基苯胺标记人工合成的乙酰化p53多肽底物，经过SIRT1脱乙酰基后，被位点特异性氨基肽酶水解，释放黄色对硝基苯胺，即采用比色法来测定组织裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种组织裂解萃取液样品（动物、人体）、核蛋白样品、部分或完全纯化酶样品中SIRT1的活性定量检测，以及YZ剂和激活剂的筛选。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景人体组蛋白脱乙酰基酶（histonedeacetylase；HDAC）家属分成三类共20多个蛋白：种类I（classI）与酵母Rpd3蛋白同源，包括HDAC1、2、3、8，存在于细胞核中；种类II（classII）与酵母Hda1蛋白同源，包括HDAC4、5、6、7、9a、9b、10和HDRP/MITR，存在于细胞核和细胞浆里；上述两大种类的蛋白分子催化结构域含有锌，且曲古菌素A（trichostatinA；TSA）敏感。种类III（classIII）为NAD+辅助因子必需，又称为sirtuins，与酵母Sir2（SilentInformationRegulator2）同源，包括SIRT1至7等，为曲古菌素A（trichostatinA；TSA）不敏感型赖氨酸脱乙酰基酶（lysyl-deacetylase）。催化赖氨酸脱乙酰基反应，以及由NAD+和乙酰（acetyl）基团转化产生的烟酰胺（nicotinamide）和O-乙酰ADP核糖（O-acetyl-ADP-ribose）。SIRT1位于细胞核内，与酵母Sir2同源性Z高。其功能在于调节p53活性和YZ细胞凋亡。基于人工合成的乙酰化p53（379至382氨基酸位点）多肽底物Ac-Arg-His-Lys-Lys（Ac）具有抗氨基肽酶切离的功能，首先使用比色染料对硝基苯胺（p-Nitroaniline；p-NA）来标记乙酰化p53多肽底物，其次进行脱乙酰化，Z后底物进一步在氨基肽酶的催化酶解，释放出具有强烈吸光值的黄色对硝基苯胺（波长405nm），由此来定量测定沉默调节蛋白1的活性。用户自备磷酸盐缓冲溶液（PBS）：用于清洗组织样品15毫升锥形离心管：用于样品处理的容器1.5毫升离心管：用于样品操作和保存的容器（微型）台式离心机：用于组织细胞预处理培养箱：用于反应物孵育96孔板或100微升1厘米光径比色皿：用于反应和比色的容器酶标仪或分光光度仪：用于比色分析注意事项1．本产品为20次操作，包括背景对照2．操作时，须戴手套3．系统操作过程中，背景测定只需1次4．样品须澄清，至关重要5．样品处理时，避免使用蛋白酶YZ剂、PMSF、烷基胺（alkylamine）等6．孵育反应完成后即刻进行比色测定7．滤波器可以使用波长400nm替代405nm8．测定值由低到高变化；酶动法测定可以持续60分钟9．测定值吸光读数越高，表明酶活性越高10．比色测定后，比色皿须清洗彻底11．待测样本为核蛋白样品，其蛋白浓度为50微克/20微升；待测样本为组织裂解悬液，其蛋白浓度为200微克/20微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1）12．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度13．沉默调节蛋白1单位活性定义为：在30℃，pH8.0条件下，每分钟内能够释放1微摩尔对硝基苯酚所需的酶量作为一个活性单位14．本公司提供系列组蛋白脱乙酰基酶检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-18 10:00

  产品样册

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• 细胞逆转录酶活性荧光定量检测试剂盒 产品说明书

  细胞逆转录酶活性荧光定量检测试剂盒 产品说明书[详细]

  2024-09-16 01:24

  操作手册

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• 人沉默调节蛋白2(SIRT2)ELISA试剂盒

  人沉默调节蛋白2(SIRT2)ELISA试剂盒[详细]

  2024-09-28 21:25

  报价单

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• 人神经调节蛋白1(NRG-1)检测试剂盒

  人神经调节蛋白1(NRG-1)检测试剂盒[详细]

  2024-09-22 18:46

  课件

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• 细胞色素P450亚酶1A2活性荧光定量检测试剂盒说明书

  细胞色素P450亚酶1A2活性荧光定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞色素P450亚酶1A2活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过甲氧基异酚唑脱甲基酶反应系统中甲氧基异酚唑转化为羟基异吩唑酮后荧光峰值的变化，即采用荧光法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解萃取液样品（动物、人体）或纯化微粒体样品细胞色素P450亚酶1A2的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景细胞色素P450亚酶1A2，简称为CYP1A2，是肝细胞微粒体复合功能氧化酶系统的成员之一，也是芳香族碳氢化合物加羟基酶（arylhydrocarbonhydrorylase；AHH）的成员之一。在人体肝脏里占P450酶系15％。与CYP1A1高度同源，特别是在外显子2、4、5和6。CYP1A2由多个多态性变体，Z常见的是：1A和1F，与kafeiyin代谢和迟发性皮肤卟啉症（porphyriacutaneatarda）相关。CYP1A2的作用在于体内外源化合物（xenobiotics），包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢，即单加氧化作用（monooxygenation）和羟化作用（hydroxylation）,以及脂类合成包括胆固醇和类固醇。芳香族碳氢化合物诱导CYP1A2的表达。甲氧基异酚唑脱甲基酶（7－methoxyresorufin-O-demethylase；MROD）的活性是细胞色素P450亚酶1A2的诊断标记，其基于MROD选择性催化细胞色素P450亚酶1A2的活性。甲氧基异酚唑（7－methoxyresorufin）在甲氧基异酚唑脱甲基酶的催化下，转化为羟基异吩唑酮（resorufin）后荧光峰值的变化（激发波长530nm，散发波长590nm），来定量测定细胞色素P450亚酶1A2的活性。甲氧基异酚唑脱甲基酶反应系统为：产品内容缓冲液（ReagentA）毫升反应液（ReagentB）毫升底物液（ReagentC）微升标准液（ReagentD）微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，底物液（ReagentC）和标准液（ReagentD）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于标准样品操作的容器恒温水槽：用于孵育反应比色皿或酶标板：用于反应和比色的容器荧光分光光度仪或酶标仪：用于荧光分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置入冰槽里融化。然后进行下列操作。一、测定准备1．准备好待测样品（例如细胞裂解萃取液或微粒体样品等），置于冰槽里2．设定好荧光分光光度仪（温度为37℃）：激发波长530nm，散发波长590nm，并置零3．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管4．加入xx微升缓冲液（ReagentA）到1号管5．分别加入xx微升缓冲液（ReagentA）到2至5号管6．移取xx微升标准液（ReagentD）到1号管，混匀7．小心移取xx微升1号管稀释的标准液（ReagentD）到2号管，混匀8．小心移取xx微升2号管稀释的标准液（ReagentD）到3号管，混匀9．小心移取xx微升3号管稀释的标准液（ReagentD）到4号管，混匀10．将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表管号缓冲液（ReagentA）标准液（ReagentD）标准羟基异吩唑酮浓度1微升微升纳摩尔/升2微升微升1号管纳摩尔/升3微升微升2号管纳摩尔/升4微升微升3号管纳摩尔/升5微升00二、标准曲线测定1．移取xx微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反应液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升上述配制的标准液5．上下倾倒数次，混匀6．在37℃温度下孵育10分钟7．即刻放进荧光分光光度仪检测获得相对荧光读数8．重复实验步骤1至7四次9．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为相对荧光单位；横座标（X轴）为标准羟基异吩唑酮浓度（纳摩尔/升）三、样品测定1．移取xx微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反应液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升待测样品（20微克微粒体蛋白或100微克细胞裂解萃取液蛋白）（注意：样品须清澈）5．上下倾倒数次，混匀6．在37℃温度下孵育10分钟7．即刻放进荧光分光光度仪检测：获得相关荧光读数8．（选择步骤）重复实验步骤1至7，测读新的样品9．根据标准曲线获得样品对应羟基异吩唑酮浓度四、计算样品活性[根据标准曲线获得样品对应羟基异吩唑酮浓度（纳摩尔/升）X样品稀释倍数]÷10（分钟）]＝皮摩尔/毫升/分钟÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝皮摩尔/毫克/分钟五、酶标板测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：标准样品和待测样品2．分别移取xx微升缓冲液（ReagentA）到相应孔中3．分别加入xx微升反应液（ReagentB）4．分别加入xx微升底物液（ReagentC）5．分别加入xx微升上述配制的标准液或待测样品（20微克微粒体蛋白或100微克细胞裂解萃取液蛋白）（注意：样品须清澈）6．轻轻摇动96孔酶标板7．在37℃温度下孵育10分钟8．即刻放进荧光酶标仪检测：获得相对荧光读数9．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为相对荧光单位；横座标（X轴）为标准羟基异吩唑酮浓度（纳摩尔/升）10．根据标准曲线获得样品对应羟基异吩唑酮浓度11．活性计算：[根据标准曲线获得样品对应羟基异吩唑酮浓度（纳摩尔/升）X样品稀释倍数]÷xx（反应时间；分钟）]＝皮摩尔/毫升/分钟÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝皮摩尔/毫克/分钟注意事项1．本产品为25次（比色皿）或85次（酶标板）操作，包括标准液2．操作时，须戴手套3．系统操作过程中，标准液测定只需1次4．样品须澄清，至关重要（本公司提供细胞可溶性总蛋白质制备试剂盒30002.1）5．孵育反应完成后即刻进行荧光测定6．如果酶活性过低，可以增加反应时间至30分钟7．荧光测定后，比色皿须清洗彻底8．建议待测样本为微粒体，其蛋白浓度为20微克/100微升；待测样本为细胞裂解悬液，其蛋白浓度为100至200微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1）9．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度10.通常人体细胞微粒体细胞色素P450亚酶1A2活性浓度为：200－600皮摩尔/分钟/毫克蛋白11．细胞色素P450亚酶CYP1A2单位活性定义为：在37℃，pH7.5条件下，每分钟内能够转化1纳摩尔甲氧基异酚唑至羟基异吩唑酮所需的酶量作为一个活性单位12．本公司提供系列毒理学检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量检测

  要用途细胞蛋白磷酸酶1（PP1）活性定磷比色法定量检测试剂是一种旨在使用特异性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ剂存在下，受到PP1去磷酸化后，释放出游离磷酸根，与孔雀绿染料发生显色反应后，采用比色法测定其峰值的变化，以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种细胞裂解悬液样品包括免疫沉淀复合物和粗提或部分纯化酶样品的蛋白磷酸化酶1活性及其YZ剂的检测。广泛应用于细胞凋亡、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景蛋白磷酸化酶1（proteinphosphatase1；PP1；EC3.1.3.48），又称为1型蛋白丝/苏氨酸磷酸化酶，是7个主要丝/苏氨酸磷酸化酶（包括PP1、PP2A、PP2B、PP2C、PP4、PP5、PP6）成员之一，从酵母到人类高度进化保留。其参与调节多种重要的细胞生理功能，包括糖原代谢、细胞分裂、肌肉收缩、信号传导、神经元功能、转录、翻译等，以及与HIV-1转录过程的调节，并且与老年性痴呆等多种疾病密切相关。PP1分子结构表面的3个凹槽及β12-β13Loop环结构，是底物与YZ剂的结合部位；其催化亚体为37kd，调节亚体有2种：目标亚体和YZ亚体。基于特异性底物糖原磷酸化酶a，在PP2AYZ剂福司曲星（fostriecin；FOS）存在的情况下，受到蛋白磷酸化酶1的去磷酸化作用，释放出游离磷酸根，与孔雀绿（malachitegreen）染料发生显色反应后，在分光光度仪下（660nm波长）产生峰值的变化，由此测定蛋白磷酸化酶1（PP1）的特异活性。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞色素P450亚酶1A1活性荧光定量检测试剂盒产品说明书

  细胞色素P450亚酶1A1活性荧光定量检测试剂盒产品说明书[详细]

  2015-05-04 00:00

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• 细胞色素P450亚酶1A2活性荧光定量检测试剂盒产品说明书

  细胞色素P450亚酶1A2活性荧光定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞色素P450亚酶1A2活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过甲氧基异酚唑脱甲基酶反应系统中甲氧基异酚唑转化为羟基异吩唑酮后荧光峰值的变化，即采用荧光法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解萃取液样品（动物、人体）或纯化微粒体样品细胞色素P450亚酶1A2的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景细胞色素P450亚酶1A2，简称为CYP1A2，是肝细胞微粒体复合功能氧化酶系统的成员之一，也是芳香族碳氢化合物加羟基酶（arylhydrocarbonhydrorylase；AHH）的成员之一。在人体肝脏里占P450酶系15％。与CYP1A1高度同源，特别是在外显子2、4、5和6。CYP1A2由多个多态性变体，Z常见的是：1A和1F，与kafeiyin代谢和迟发性皮肤卟啉症（porphyriacutaneatarda）相关。CYP1A2的作用在于体内外源化合物（xenobiotics），包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢，即单加氧化作用（monooxygenation）和羟化作用（hydroxylation）,以及脂类合成包括胆固醇和类固醇。芳香族碳氢化合物诱导CYP1A2的表达。甲氧基异酚唑脱甲基酶（7－methoxyresorufin-O-demethylase；MROD）的活性是细胞色素P450亚酶1A2的诊断标记，其基于MROD选择性催化细胞色素P450亚酶1A2的活性。甲氧基异酚唑（7－methoxyresorufin）在甲氧基异酚唑脱甲基酶的催化下，转化为羟基异吩唑酮（resorufin）后荧光峰值的变化（激发波长530nm，散发波长590nm），来定量测定细胞色素P450亚酶1A2的活性。甲氧基异酚唑脱甲基酶反应系统为：产品内容缓冲液（ReagentA）毫升反应液（ReagentB）毫升底物液（ReagentC）微升标准液（ReagentD）微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，底物液（ReagentC）和标准液（ReagentD）避免光照，有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于标准样品操作的容器恒温水槽：用于孵育反应比色皿或酶标板：用于反应和比色的容器荧光分光光度仪或酶标仪：用于荧光分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂置入冰槽里融化。然后进行下列操作。一、测定准备1．准备好待测样品（例如细胞裂解萃取液或微粒体样品等），置于冰槽里2．设定好荧光分光光度仪（温度为37℃）：激发波长530nm，散发波长590nm，并置零3．准备好5个1.5毫升离心管，标记为1至5号管4．加入xx微升缓冲液（ReagentA）到1号管5．分别加入xx微升缓冲液（ReagentA）到2至5号管6．移取xx微升标准液（ReagentD）到1号管，混匀7．小心移取xx微升1号管稀释的标准液（ReagentD）到2号管，混匀8．小心移取xx微升2号管稀释的标准液（ReagentD）到3号管，混匀9．小心移取xx微升3号管稀释的标准液（ReagentD）到4号管，混匀10．将1至5号管放进冰槽里备用，避免光照；标准管浓度见下表管号缓冲液（ReagentA）标准液（ReagentD）标准羟基异吩唑酮浓度1微升微升纳摩尔/升2微升微升1号管纳摩尔/升3微升微升2号管纳摩尔/升4微升微升3号管纳摩尔/升5微升00二、标准曲线测定1．移取xx微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反应液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升上述配制的标准液5．上下倾倒数次，混匀6．在37℃温度下孵育10分钟7．即刻放进荧光分光光度仪检测获得相对荧光读数8．重复实验步骤1至7四次9．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为相对荧光单位；横座标（X轴）为标准羟基异吩唑酮浓度（纳摩尔/升）三、样品测定1．移取xx微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿2．加入xx微升反应液（ReagentB）3．加入xx微升底物液（ReagentC）4．加入xx微升待测样品（20微克微粒体蛋白或100微克细胞裂解萃取液蛋白）（注意：样品须清澈）5．上下倾倒数次，混匀6．在37℃温度下孵育10分钟7．即刻放进荧光分光光度仪检测：获得相关荧光读数8．（选择步骤）重复实验步骤1至7，测读新的样品9．根据标准曲线获得样品对应羟基异吩唑酮浓度四、计算样品活性[根据标准曲线获得样品对应羟基异吩唑酮浓度（纳摩尔/升）X样品稀释倍数]÷10（分钟）]＝皮摩尔/毫升/分钟÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝皮摩尔/毫克/分钟五、酶标板测定1．在96孔酶标板上做好相应标记：标准样品和待测样品2．分别移取xx微升缓冲液（ReagentA）到相应孔中3．分别加入xx微升反应液（ReagentB）4．分别加入xx微升底物液（ReagentC）5．分别加入xx微升上述配制的标准液或待测样品（20微克微粒体蛋白或100微克细胞裂解萃取液蛋白）（注意：样品须清澈）6．轻轻摇动96孔酶标板7．在37℃温度下孵育10分钟8．即刻放进荧光酶标仪检测：获得相对荧光读数9．构建标准曲线：纵座标（Y轴）为相对荧光单位；横座标（X轴）为标准羟基异吩唑酮浓度（纳摩尔/升）10．根据标准曲线获得样品对应羟基异吩唑酮浓度11．活性计算：[根据标准曲线获得样品对应羟基异吩唑酮浓度（纳摩尔/升）X样品稀释倍数]÷xx（反应时间；分钟）]＝皮摩尔/毫升/分钟÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝皮摩尔/毫克/分钟注意事项1．本产品为25次（比色皿）或85次（酶标板）操作，包括标准液2．操作时，须戴手套3．系统操作过程中，标准液测定只需1次4．样品须澄清，至关重要（本公司提供细胞可溶性总蛋白质制备试剂盒30002.1）5．孵育反应完成后即刻进行荧光测定6．如果酶活性过低，可以增加反应时间至30分钟7．荧光测定后，比色皿须清洗彻底8．建议待测样本为微粒体，其蛋白浓度为20微克/100微升；待测样本为细胞裂解悬液，其蛋白浓度为100至200微克/100微升（本公司提供Bradford蛋白质浓度定量试剂盒30030.1）9．如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度通常人体细胞微粒体细胞色素P450亚酶1A2活性浓度为：200－600皮摩尔/分钟/毫克蛋白11．细胞色素P450亚酶CYP1A2单位活性定义为：在37℃，pH7.5条件下，每分钟内能够转化1纳摩尔甲氧基异酚唑至羟基异吩唑酮所需的酶量作为一个活性单位12．本公司提供系列毒理学检测试剂产品质量标准1．本产品经鉴定性能稳定2．本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞色素P450酶系总活性荧光定量检测试剂盒产品说明书

  主要用途细胞色素P450酶系（CYP-ECOD）总活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过乙氧基香豆素脱乙基酶反应系统中乙氧基香豆素转化为羟基香豆素后荧光峰值的变化，即采用荧光法来测定样品中酶系活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解萃取液样品（动物、人体）或纯化微粒体样品细胞色素P450酶系的总活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景细胞色素P450酶是肝细胞微粒体复合功能单加氧化酶系统的总称。其分成五十多个亚酶：CYP1至CYP51。作用在于体内外源化合物（xenobiotics），包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢，即单加氧化作用（monooxygenation）和羟化作用（hydroxylation）。乙氧基香豆素脱乙基酶（7-ethoxycoumarinO-deethylase；ECOD）的活性是细胞色素P450酶系的诊断标记，其基于ECOD广泛性催化细胞色素P450亚酶的活性。乙氧基香豆素（7-ethoxycoumarin）在乙氧基香豆素脱乙基酶的催化下，转化为羟基香豆素（7-hydroxycoumarin）后荧光峰值的变化（激发波长368nm，散发波长456nm），来定量测定细胞色素P450酶系的活性。乙氧基香豆素脱乙基酶反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 体液尿激酶（UROKINASE）活性荧光定量检测试剂盒说明书

  主要用途是一种旨在通过三肽化合物底物p-ERG-pNA受到尿激酶的水解，释放黄色对硝基苯胺，产生吸光峰值的变化，即采用比色法来测定细胞裂解萃取样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞裂解萃取液样品（动物、人体等）尿激酶的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景尿激酶（urokinase；UK；EC3.4.21.73），又称为尿激酶型纤维蛋白溶酶原激活剂（urokinase-typePlasminogenActivator；uPA），属于丝氨酸蛋白酶，存在于血液、细胞外基质和尿液中。尿激酶由411氨基酸构成，分子量为54KD，有3个结构域：丝氨酸蛋白酶结构域、kringle结构域和生长因子结构域。其主要的生理性底物为纤维蛋白溶酶原（Plasminogen），即纤维蛋白溶酶（plasmin）的酶原形式（zymogen），切离部位为Cys-Pro-Gly-Arg⊥Val-Val-Gly-Gly-Cys。一旦切离后激活，纤维蛋白溶酶参与细胞蛋白水解过程，包括血栓溶解（thrombolysis）和细胞外基质降解等。尿激酶与组织重构、修复、血管形成（angiogenesis）性疾病和肿瘤扩散有关。尿激酶的YZ剂是丝氨酸蛋白酶YZ剂（serpins），即纤维蛋白溶酶原激活剂YZ剂（PlasminogenActivatorInhibitor；PAI）。基于人工合成的三肽化合物底物p-EGR-pNA（pyro-Glu-Gly-Arg-p-Nithoaniline；焦谷氨酸酰甘氨酰精氨酰对硝基苯胺）受到尿激酶的水解，释放有色对硝基苯胺，在分光光度仪（405nm波长）下，测定吸光峰值的变化，来定量测定尿激酶的活性。尿激酶反应系统为：产品内容清理液（ReagentA）毫升裂解液（ReagentB）毫升缓冲液（ReagentC）毫升阴性液（ReagentD）毫升底物液（ReagentE）微升产品说明书1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在-20℃冰箱里；底物液（ReagentE）避免光照和反复冻融；有效保证6月用户自备15[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 细胞色素P450亚酶CYP2D6（AMMC）活性荧光定量检测

  主要用途细胞色素P450亚酶CYP2D6（AMMC）活性荧光定量检测试剂是一种旨在通过AMMC去甲基化酶反应系统中AMMC转化为AMHC后荧光峰值的变化，即采用荧光法来测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种细胞或组织裂解萃取液样品（动物、人体）或纯化微粒体样品细胞色素P450亚酶2D6的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景细胞色素P450酶是肝细胞微粒体复合功能单加氧化酶系统的总称。其分成五十多个亚酶：CYP1至CYP51。作用在于体内外源化合物（xenobiotics），包括药物、致癌剂、化学污染物的氧化代谢，即单加氧化作用（monooxygenation）和羟化作用（hydroxylation）。AMMC羟基化酶（AMMC7-hydroxylase）的活性是细胞色素P450亚酶2D6的诊断标记，其基于AMMC羟基化酶选择性催化细胞色素P450亚酶2D6的活性。人体细胞色素P450亚酶2D6（CYP2D6；EC1.14.14.1），主要表达在肝、肾、胎盘、脑、乳腺、肺、和肠道组织中，是肝组织细胞色素P450酶总量的4%。CYP2D6是多态性酶，在80多个等位基因上，出现变异，具有个体和种族差异，与肺癌、肝癌、黑色素瘤、巴金森氏症等疾病发生，以及药物代谢敏感性差异存在相关性。CYP2D6主要代谢三分之一的临床药物，尤其含有碱性氮原子（basicnitrogenatom）的药物，包括异喹胍（debrisoquine）的4-羟基化、鹰爪豆碱（sparteine）的氧化、抗抑郁症药物、神经松弛药（neuroleptic），以及内源性5-羟色胺（hydroxytryptamine）、神经类固醇（neurosteroid）等。同时会产生肝毒性的乙酰苯醌亚胺（N-acetyl-p-benzyquinoneimine）。基于选择性底物AMMC（3（2（N,N-diethyl-N-methylammonium）-ethyl）7-methoxy-4-methylcoumarin）在CYP2D6的去甲基化（o-demethylation）作用下，转化为AMHC羟基香豆素（3（2（N,N-diethyl-N-methylammonium）-ethyl）7-hydroxy-4-methylcoumarin）后荧光峰值的变化（激发波长405nm，散发波长460nm），来定量测定细胞色素P450酶2D6的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 细胞色素P450亚酶1A1活性荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细胞色素P450亚酶1A1活性荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-07 00:00

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• 细胞色素P450酶系总活性荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  细胞色素P450酶系总活性荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-07 00:00

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• 活化凝血因子5（FACTOR Va）活性荧光定量检测试剂盒

  用途主要活化凝血因子5（FACTORVa）活性荧光定量检测试剂是一种旨在活化凝血因子X（FXa）及其辅因子活化凝血因子（FVa），激活凝血酶，进而水解多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg-AMC，释放出荧光产物氨甲基香豆素，产生荧光峰值的变化，即采用荧光法来测定血液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种血浆样品（动物、人体等）活化凝血因子5的活性检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。技术背景凝血因子5（FactorV）是维生素K非依赖性的不稳定性单链糖蛋白，由肝组织、内皮组织、巨核细胞、血小板等合成。血小板中含有20至25%凝血因子5。凝血因子5，作为活化凝血因子10的辅因子，成为凝血酶原复合物一员，包括活化凝血因子10、钙离子和磷脂等，其功能在于转化凝血酶原为凝血酶（THROMBIN；EC3.4.21.5），即活化凝血因子II（ActivatedFactorII；FactorIIa），构成常见（common）凝血通路或机制。肝病、弥散性血管内凝血（Disseminatedintravascularcoagulation；DIC）、原发性纤维蛋白溶解症（primaryfibrinolysis）等引起凝血因子5减少或缺失。凝血因子5缺失将导致凝血酶原时间（prothrombintime；PT）和活化部分凝血活酶时间（activatedpartialthromboplastintime；APTT）延长，而出现出血体质。活化凝血因子X（FXa）及其辅因子活化凝血因子（FVa）一起，在钙离子和磷脂的参与下，使凝血酶原（prothrombin）转化为凝血酶（thrombin）基于由此水解人工合成的多肽化合物底物H-D-Phe-Pip-Arg--7-amido-4-methylcoumarin（HD-苯丙氨酰-pipecolyl-精氨酰氨甲基香豆素），释放出荧光7-氨基-4-甲基香豆素（7-amido-4-methylcoumarin；AMC；激发波长360nm；散发波长460nm），来定量测定活化凝血因子V的活性。其反应系统为：[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 大鼠细胞色素P450亚酶2B2活性荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  大鼠细胞色素P450亚酶2B2活性荧光定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-07 00:00

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