纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂盒产品说明书

本文由 上海铭博生物科技有限公司 整理汇编

2018-11-08 10:00 793阅读次数

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• 纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂盒产品说明书

  主要用途纯化线粒体呼吸控制率（RCR）定量检测试剂是一种旨在通过极谱法检测系统（polarographicsystem）测定新鲜活体线粒体在ADP存在（III态呼吸）与否（IV态呼吸）的情况下溶解氧（dissolvedoxygen）的消耗差异，即呼吸控制率（RCR），以评价线粒体结构和功能完整性以及氧化磷酸化效率的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于线粒体生理功能和药物作用机制等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。技术背景线粒体是细胞呼吸链和氧化磷酸化的ZX。电子传递和ATP合成通过质子梯度偶联成一体。线粒体结构完整，功能正常，底物充分，电子传递形成的质子梯度不断被消耗，电子得以顺畅传递，氧气快速消耗，其耗氧率大，为III态呼吸。ADP耗竭，质子梯度不能消耗，阻碍电子传递，氧气消耗减少，为IV态呼吸。呼吸控制率（respiratorycontrolratio或respiratorycontrolindex；RCR），又称呼吸调节比，是指III态（加入ADP）的呼吸速率与IV态（ADP耗竭）的呼吸速率之比。正常线粒体的RCR为3至10：RCR降低意味着线粒体ATP合成功能损伤，呼吸障碍；RCR意味着细胞活动旺盛，代谢加快。产品内容介质液（ReagentA）毫升态底物液（ReagentB）微升态底物液（ReagentC）微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保证6月用户自备CLARK氧电极仪：用于测定溶解氧浓度实验步骤实验开始前，制备好新鲜的线粒体置于冰槽里备用；同时将－20℃冰箱里的试剂融化，并预热氧电极仪到25℃。然后进行下列操作。1．加入xx毫升介质液（ReagentA）到反应玻璃槽2．使用微型磁力子搅拌，充分混匀3．密封反应槽[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 纯化线粒体磷氧比（ADP/O）定量检测试剂盒产品

  主要用途纯化线粒体磷氧比（ADP/O）定量检测试剂是一种旨在通过极谱法检测系统（polarographicsystem）测定新鲜活体线粒体在已知浓度ADP存在（III态呼吸）的情况下氧浓度的降低，来分析磷氧比（P：Oratio），以评价线粒体呼吸链和氧化磷酸化偶联程度，即能量转化效率的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于线粒体生理功能和药物作用机制等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。技术背景线粒体是细胞呼吸链和氧化磷酸化的ZX。电子传递和ATP合成通过质子梯度偶联成一体，即线粒体的呼吸耗氧偶联着ADP与Pi合成ATP的磷酸化反应。线粒体每吸收一克原子氧的同时，生长ATP（ADP磷酸化）的克分子数的比值，为ADP/O值。线粒体的磷氧比直接表征线粒体呼吸耗氧和ATP合成的关系。正常线粒体的ADP/O（P/O）为1.5：磷氧比降低意味着线粒体解偶联；磷氧比意味着线粒体偶联良好。其Zda值为3.3。产品内容介质液（ReagentA）xx毫升底物液（ReagentC）xx微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，有效保证6月用户自备CLARK氧电极仪：用于测定溶解氧浓度实验步骤实验开始前，制备好新鲜的线粒体置于冰槽里备用；同时将－20℃冰箱里的试剂融化，并预热氧电极仪到25℃。然后进行下列操作。1．加入xx毫升介质液（ReagentA）到反应玻璃槽2．使用微型磁力子搅拌，充分混匀3．密封反应槽4．开始记录氧浓度：起始饱和氧浓度值为0.240微摩尔分子氧/毫升（25℃）5．持续记录1分钟后，注射加入20微升待测的线粒体（总量2毫克）（注意：氧浓度可能瞬时增加5％）[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 线粒体呼吸链复合物 II 活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  线粒体呼吸链复合物II活性比色法定量检测试剂盒产品说明书免费下载，下载后方可查看！！[详细]

  2018-10-01 10:01

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• 线粒体呼吸链复合物I活性比色法定量检测试剂盒产品说明书

  主要用途线粒体呼吸链复合物I（NADH－辅酶Q还原酶）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物和特异性YZ剂，通过反应系统测定样品中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）－辅酶Q还原酶的特异性活性检测。其用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景线粒体呼吸链复合物I，通常称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶Q还原酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase；NADH-CoQreductase），又称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase；NADHdehydrogenase），是线粒体电子传递链中Zda的结构成分：含有30至40多个多肽结构。其特征性的酶活性是鱼藤酮敏感的NADH－辅酶Q还原酶（NADH:QReductase）。复合物I催化线粒体内电子由供体NADH传递到内膜上辅酶Q受体（泛醌；ubiquinone）的能量转移反应，为整个呼吸链反应系统的**步。基于辅酶Q底物，在鱼藤酮存在与否的情况下，通过NADH－辅酶Q还原酶的催化，转化成还原型泛醌（CoQH2），同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），在分光光度仪下产生吸收峰值的变化（340nm波长），由此定量测定NADH－辅酶Q还原酶的特异活性。其反应系统是：[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 动物线粒体呼吸链复合物I活性定量检测试剂盒产品说明书

  动物线粒体呼吸链复合物I活性定量检测试剂盒产品说明书[详细]

  2024-09-17 19:14

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• 纯化线粒体琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  纯化线粒体琥珀酸脱氢酶活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途纯化线粒体琥珀酸脱氢酶（SDH）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成电子受体染料，通过反应系统测定染料还原后峰值的降低，即采用比色法测算样品中单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体裂解悬液样品琥珀酸脱氢酶的特异性活性检测。用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景琥珀酸脱氢酶（succinatedehydrogenase；SDH；EC1.3.99.1）是三羧酸循环（tricarboxylicacidcycle；TCA）或Krebs循环中与细胞线粒体膜相关的重要元素，位于线粒体内膜，参与细胞呼吸链。琥珀酸脱氢酶由27kd和70kd两个单体组成。其功能在于催化琥珀酸（succinate）的氧化反应，产生延胡索酸（furmarate），通过黄素腺嘌呤二核苷酸（FlavinAdenineDinucleotide；FAD）传递电子。基于琥珀酸脱氢酶的反应原理，使用人工电子受体染料二氯靛酚钠（2,6-Dichloroindophenolsodium；DCIP），接受来自还原型黄素腺嘌呤二核苷酸（ReducedflavinAdenineDinucleotide；FADH2）的电子，而被还原，在分光光度仪下，其吸光值（600nm波长）的变化，来测算琥珀酸脱氢酶的活性。其反应方式为：产品内容清理液（ReagentA）XX毫升裂解液（ReagentB）XX毫升缓冲液（ReagentC）XX毫升反应液（ReagentD）XX毫升底物液（ReagentE）XX毫升阴性液（ReagentF）XX微升产品说明书1份保存方式保存清理液（ReagentA）在4℃冰箱里；其余的保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；反应液（ReagentD）含有毒性物质，避免直接用手接触；底物液（ReagentE），避免光照；有效保证3月用户自备15毫升锥形离心管：用于样品制备的容器1.5毫升离心管：用于样品制备和保存的容器4℃（微型）台式离心机：用于样品处理DOUNCE匀浆器：用于裂解组织恒温培养箱或恒温水槽：用于反应物孵育比色皿：用于比色测定的容器分光光度仪：用于比色分析实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化；底物液（ReagentE）注意避光。然后进行下列操作。一、样品准备手术取出动物组织，并秤重以确定200毫克组织重量（选择步骤）放进预冷的15毫升锥形离心管（选择步骤）加入XX毫升清理液（ReagentA）清洗（选择步骤）抽去清洗液移入到一个液氮冻存管即刻放进液氮罐过夜次日从液氮罐里取出，即刻（Z快速度）用研磨棒碾碎组织成粉末状（注意：切莫使组织冻融）放进一个15毫升锥形离心管加入置于冰槽里的XX毫升裂解液（ReagentB）涡旋震荡5秒，充分混匀即刻放入预冷的DOUNCE匀浆器在冰槽里用匀浆棒匀化组织（约20至40下）（注意：参见注意事项8）将所有组织匀浆物移入1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为1500g小心移出上清液到另一个新的预冷的1.5毫升离心管放进4℃微型台式离心机离心10分钟，速度为10000g小心抽去上清液加入XX微升裂解液（ReagentB），混匀颗粒群移取10微升进行蛋白定量检测（注意：建议使用Bradford蛋白质浓度定量试剂盒－GMS30030.1）放进－70℃的冰箱里保存或置于冰槽里备用二、测定准备准备好待测样品，置于冰槽里设定好分光光度仪（温度为25℃）：波长600nm，间隔60秒，读数6次（共5分钟），并置零缓冲液（ReagentC）在室温下均衡温度背景对照测定移取XX微升缓冲液（ReagentC）到新的比色皿加入XX微升反应液（ReagentD）加入XX微升底物液（ReagentE）放进25℃培养箱里静置3分钟[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 线粒体呼吸链复合物I活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  线粒体呼吸链复合物I活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2015-05-19 00:00

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• 线粒体呼吸链复合物V活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  MB50083v.A线粒体呼吸链复合物V活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途线粒体呼吸链复合物V（F0F1-ATP酶/ATP合成酶）活性光度法定量检测试剂是一种旨在使用丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统，测定与ATP合成对应的ATP水解产生ADP过程中，伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后吸光峰值的降低，即采用光度法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的F0F1-ATP酶/ATP合成酶的特异性活性检测。可用于心肌、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景线粒体呼吸链复合物V，通常称为ATP合成酶（ATPsynthase）、F型ATP酶（FtypeATPase）和F1F0ATP酶（F1F0ATPase），是线粒体氧化磷酸化的反应。其分子量为500KD，含有十六个亚单位，其中两个：ATP酶6和8为线粒体DNA编码的。ATP酶主要有两个结构域：F0为质子通道，由几个膜蛋白构成，包括a、b、c、d、e、F6、A6L、OSCP（oligomycinsensitiveconferringprotein）等；和F1催化活性结构域，由水溶性的α3β3γδε蛋白构成。其Z特征性的酶活性是寡霉素敏感的ATP合成酶。复合物V的主要功能在于产生大部分细胞所需的能量ATP。ATP的合成需要线粒体内膜电子传递到氧分子时，呼吸链蛋白所产生的质子梯度变化。质子通过F0结构域传递到基质，激活F1催化活性结构域，促使ATP合成。该酶异常会导致心肌和神经系统疾病。基于ATP，在寡霉素参与下，受到F1F0ATP酶的水解，进而通过丙酮酸激酶（pyruvatekinase；PK）和乳酸脱氢酶（lactatedehydrogenase；LDH）反应系统中，还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），产生的吸光峰值的变化（340nm），来定量分析F1F0ATP酶活性。其反应系统为：F1F0ATPaseATP=ADP+PipyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+（高吸收峰）（低吸收峰）产品内容缓冲液（ReagentA）20毫升反应液（ReagentB）2.5毫升阴性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升专性液（ReagentE）250微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；反应液（ReagentB），避免光照，有效保证6月用户自备比色皿：用于光度分析的容器分光光度仪：用于光度分析培养箱：用于孵育反应物实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化；反应液（ReagentB）注意避光。然后进行下列操作。测定准备准备好待测样品（例如纯化线粒体样品等），置于冰槽里设定好分光光度仪（温度为30℃）：波长为340nm，间隔30秒，读数11次（共5分钟），并置零缓冲液（ReagentA）室温下均衡温度背景对照测定移取780微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反应液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放进30℃培养箱里孵育3分钟加入100微升阴性液（ReagentC）上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放进分光光度仪检测，此为背景空对照：340波长读数0分钟－340波长读数1分钟或5分钟样品总活性测定移取780微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反应液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放进30℃培养箱里孵育3分钟加入100微升待测样品（注意：10微克总线粒体蛋白）上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放进分光光度仪检测，此为样品总活性读数：340波长读数0分钟－340波长读数1分钟或5分钟样品非特异活性测定实验开始前，移取100微升待测样品（注意：10微克总线粒体蛋白）到1.5毫升离心管，加入20微升专性液（ReagentE），混匀后，放进30℃培养箱里孵育15分钟。然后置于冰槽里备用移取760微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反应液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）放进30℃培养箱里孵育3分钟加入120微升上述预处理的待测样品上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放进分光光度仪检测，此为样品非特异活性读数：340波长读数0分钟－340波长读数1分钟或5分钟计算样品活性1）样品活性（总活性和非特异活性）【（样品读数－背景读数）X1（体系容量；毫升）X样品稀释倍数】÷【0.1（样品容量；毫升）X6.22（毫摩尔吸光系数X1或5（反应时间；分钟）】＝单位/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝单位/毫克单位＝微摩尔NADH/分钟2）样品特异活性样品总活性－样品非特异活性＝样品特异活性[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 线粒体呼吸链复合物II活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）

  线粒体呼吸链复合物II活性比色法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸－辅酶Q还原酶）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物二氯酚靛酚，通过反应系统测定样品中二氯酚靛酚还原后吸光峰值的变化，即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的琥珀酸－辅酶Q还原酶的特异性活性检测。可用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景线粒体呼吸链复合物II，通常称为琥珀酸－辅酶Q还原酶或琥珀酸脱氢酶（Succinate-CoenzymeQReductase；SuccinateDehydrogenase），是线粒体电子传递链与三羧酸循环链接的载体：含有四个亚单位，包括共价结合的辅基黄素腺嘌呤二核苷酸（flavinadeninedinucleotide；FAD）和三个铁硫ZX（Fe-Sclusters），以及细胞色素b亚单位，其Z特征性的酶活性是丙二酸钠敏感的琥珀酸－辅酶Q还原酶。复合物II催化琥珀酸（succinate）被氧化为富马酸（fumarate），线粒体内电子由供体FAD传递到内膜上辅酶Q受体（泛醌；ubiquinone）的能量转移反应，进行呼吸链传递。该酶异常会导致嗜铬细胞瘤（paraganglioma）、肾上腺嗜铬细胞瘤（pheochromocytoma）和Leigh综合征。基于琥珀酸底物，通过琥珀酸－辅酶Q还原酶的催化，氧化为富马酸，同时氧化型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIP）转化为还原型二氯酚靛酚（dichlorophenal-indophenol；DCPIPH2），在分光光度仪下产生吸光峰值的变化（600nm波长），由此定量测定琥珀酸－辅酶Q还原酶的特异活性。其反应系统是：ComplexIISUCCINATE+DCPIP+CoQ→FUMARATE+DCPIPH2+CoQH2蓝色无色↑Abs600nm↓Abs600nm产品内容缓冲液（ReagentA）20毫升反应液（ReagentB）2.5毫升阴性液（ReagentC）2毫升底物液（ReagentD）500微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，避免反复冻融；反应液（ReagentB）和底物液（ReagentD），避免光照，有效保证6月用户自备比色皿：用于比色的容器分光光度仪：用于比色分析培养箱：用于孵育反应物实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的试剂溶液置入冰槽里融化；缓冲液（ReagentA）室温预热；反应液（ReagentB）和底物液（ReagentD）注意避光。然后进行下列操作。测定准备准备好待测样品（例如纯化线粒体样品等），置于冰槽里设定好分光光度仪（温度为30℃）：波长为600nm，间隔60秒，读数6次（共5分钟），并置零背景对照测定移取780微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反应液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下倾倒数次，混匀放进30℃培养箱里静置3分钟加入100微升阴性液（ReagentC）上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放入分光光度仪检测，此为背景空对照：600波长读数0分钟－600波长读数1分钟或5分钟样品活性测定移取780微升缓冲液（ReagentA）到新的比色皿加入100微升反应液（ReagentB）加入20微升底物液（ReagentD）上下倾倒数次，混匀放进30℃培养箱里静置3分钟加入100微升待测样品（注意：10微克总线粒体蛋白）上下倾倒数次，混匀（限定在3秒之内）即刻放入分光光度仪检测，此为样品活性读数：600波长读数0分钟－600波长读数1分钟或5分钟计算样品活性【（样品读数－背景读数）X1（体系容量；毫升）X样品稀释倍数】÷【0.1（样品容量；毫升）X21.8（毫摩尔吸光系数X1或5（反应时间；分钟）】＝单位/毫升÷（样品蛋白浓度）毫克/毫升＝单位/毫克单位＝微摩尔二氯酚靛酚/分钟[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 线粒体呼吸链复合物I活性比色法定量检测试剂盒

  主要用途线粒体呼吸链复合物I（NADH－辅酶Q还原酶）活性比色法定量检测试剂是一种旨在使用合成辅酶Q同功类似物和特异性YZ剂，通过反应系统测定样品中还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）氧化后峰值的降低，即采用比色法测定样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。其适合于各种纯化线粒体样品（动物、人体、酵母）以及细胞或组织裂解悬液样品的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NADH）－辅酶Q还原酶的特异性活性检测。其用于衰老、能量代谢、蛋白组学、病理生理学、神经病变等研究。产品不含污染性蛋白酶，严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，反应优化，检测敏感。技术背景线粒体呼吸链复合物I，通常称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸辅酶Q还原酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidecoenzymeQreductase；NADH-CoQreductase），又称为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸脱氢酶（reducednicotinamideadeninedinucleotidedehydrogenase；NADHdehydrogenase），是线粒体电子传递链中Zda的结构成分：含有30至40多个多肽结构。其特征性的酶活性是鱼藤酮敏感的NADH－辅酶Q还原酶（NADH:QReductase）。复合物I催化线粒体内电子由供体NADH传递到内膜上辅酶Q受体（泛醌；ubiquinone）的能量转移反应，为整个呼吸链反应系统的**步。基于辅酶Q底物，在鱼藤酮存在与否的情况下，通过NADH－辅酶Q还原酶的催化，转化成还原型泛醌（CoQH2），同时还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reducednicotinamideadeninedinucleotide；NADH）转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamideadeninedinucleotide；NAD），在分光光度仪下产生吸收峰值的变化（340nm波长），由此定量测定NADH－辅酶Q还原酶的特异活性。其反应系统是：[详细]

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• 纯化线粒体氧化应激活性氧鲁米诺化学发光法定量检测试剂盒

  主要用途纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）鲁米诺化学发光法定量检测试剂是一种旨在通过自由基探针鲁米诺和强化剂的参与下，线粒体样品中的活性氧族使发光物氧化降解并发光，在化学发光仪（Luminometer）的帮助下定量检测样品中活性氧族（过氧化氢）的生成和数量的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。适用于各种生物体线粒体组分的活性氧族的检测。产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定，检测敏感。技术背景超氧自由基阴离子（superoxideradical；O2-）、过氧化氢（hydrogenperoxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxylradical；OH-）、过氧化基（peroxylradical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、单线态氧气（singletoxygen）等细胞内活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的产生和增多，甚而导致诸如男性不育、冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。线粒体是真核细胞的膜性细胞器，是产生活性氧、进行氧化还原反应的重要场所。鲁米诺（luminol），又称氨基邻苯二甲酰肼（luminol；3-aminophthalichydrazide5-amino-2,3-dihvdro-1,4-phthalazinedione），是一种脂溶性的发光剂，氧化后生成鲁米诺自由基而化学发光，具有460nm左右峰值的带状光谱，肉眼可观察到鲜明的紫蓝色。鲁米诺以单价氧化形式与超氧自由基阴离子反应，产生不稳定性内过氧化物或二氧环丁烷（Dioxetane），由此分解成电激发状态，通过释放光子，回复到基态。鲁米诺作为探针，可以检测线粒体中过氧化氢、超氧自由基阴离子和羟自由基，其中过氧化氢Z强，其发光强度与过氧化氢水平成正相关。产品内容清理液（ReagentA）毫升强化液（ReagentB）毫升发光液（ReagentC）毫升产品说明书1份保存方式保存强化液（ReagentB）和发光液（ReagentC）在－20℃冰箱里，严格避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于样品操作的容器恒温水槽：用于样品孵育微型台式离心机：用于去除样品杂质测试管或黑色96孔板：用于发光检测用的容器化学发光仪：用于检测化学发光实验步骤样品预处理移取100微升新鲜制备（2小时内）的纯化线粒体（400微克线粒体蛋白）到预冷的1.5毫升离心管，置于冰槽里加入xx微升清理液（ReagentA），轻轻混匀线粒体放进37℃恒温水槽孵育10分钟加入10微升用户自备的待测药品即刻进入下列测读操作测读测读开始前，打开化学发光仪，设定仪器内温度为37℃预热和整合测读10秒或15分钟；然后关掉实验室的灯光。将－20℃冰箱里的试剂置入冰槽里融化，严格置于暗室里。然后进行下列操作。准备好测试管，做好标记：阴性对照、样品本底和样品活性移取xx微升清理液（ReagentA）到阴性对照测试管移取400微升上述预处理的待测线粒体到样品本底测试管移取400微升上述预处理的待测线粒体到样品活性测试管分别加入xx微升强化液（ReagentB）到上述测试管，除样品本底测试管外分别加入xx微升发光液（ReagentC）到上述测试管，除样品本底测试管外轻轻涡旋混匀即刻放进37℃化学发光仪里测读整合测读10秒，获得相对发光单位（relativelightunit；RLU）或者整合测读15分钟，获得光电子读数：X106CPM（countedphotonperminute）（注意：可以使用液体闪烁仪替代）计算ROS水平：注意事项本产品为50次操作操作时，须戴手套测试前，线粒体分离后2小时内为**线粒体悬液须在4℃温度下保存备用如果测定体系变化，则试剂用量相应变化系统操作过程中，阴性对照只需测定一次测读的所有步骤均须在暗室里进行如果是注射式化学发光仪，建议测试前后使用无离子水冲洗化学发光仪注射（injector）管道本公司提供系列活性氧分析试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧初级荧光测定试剂盒产品说明书

  呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧初级荧光测定试剂盒产品说明书[详细]

  2015-04-29 00:00

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• 纯化线粒体溶解试剂盒产品说明书（中文版）

  纯化线粒体溶解试剂盒产品说明书（中文版）[详细]

  2024-09-28 00:04

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• 呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧高质荧光测定试剂盒

  呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧高质荧光测定试剂盒[详细]

  2015-04-29 00:00

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• 呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧初级荧光测定试剂盒

  主要用途呼吸链依赖性纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）初级荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂二氯荧光乙酰乙酸盐，在线粒体氧化条件下，选择性阻止膜电位，所产生的荧光，来定量检测线粒体内膜电位依赖性活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于线粒体功能、氧化激发和YZ机理等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。技术背景超氧自由基阴离子（superoxideradical；O2-）、过氧化氢（hydrogenperoxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxylradical；OH-）、过氧化基（peroxylradical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、单线态氧气（singletoxygen）等细胞内活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。2',7'-二氯荧光乙酰乙酸盐（2',7'-dichlorofluoresceindiacetate，DCFH-DA）一种完全自由通过细胞膜的染色剂。一旦被过氧化氢、过氧化基、过氧亚硝基阴离子等氧化，便产生荧光。据此测定线粒体活性氧族的浓度。三氟甲氧基苯腙羧基氰化物（carbonylcyanide4－rifluoromethoxyhenylhydrazone；FCCP）使线粒体膜化学离子梯度消失。[详细]

  2018-11-18 10:00

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• 纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）光泽精化学发光法定量试剂盒

  主要用途纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）光泽精化学发光法定量检测试剂是一种旨在通过使用自由基探针光泽精，捕获线粒体中的活性氧族，使发光物氧化降解并发光，在化学发光仪（Luminometer）的帮助下定量检测纯化线粒体活性氧族（超氧自由基阴离子）的生成和数量的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。适用于各种生物体线粒体组分的活性氧族的检测。可以被用于细胞凋亡、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，性能稳定，检测敏感。技术背景超氧自由基阴离子（superoxideradical；O2-）、过氧化氢（hydrogenperoxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxylradical；OH-）、过氧化基（peroxylradical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、单线态氧气（singletoxygen）等细胞内活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的产生和增多，甚而导致诸如男性不育、冠心病、风湿性关节炎、肿瘤、退行性病变等各种病理状况。线粒体是真核细胞的膜性细胞器，是产生活性氧、进行氧化还原反应的重要场所。光泽精（lucigenin），又称硝酸双-N-甲基吖啶翁（bis-N-methylacridiniumnitrate），是一种带正电荷的发光剂，单价还原后生成光泽精自由基，再与超氧自由基阴离子反应生成不稳定的中间物光泽精二恶二酮，由此分解成电激发状态（N－甲基丫啶酮），通过释放光子，回复到基态。光泽精作为探针，其正电荷与线粒体内膜上的负电荷作用，可以特异性检测线粒体超氧自由基阴离子，其发光强度与超氧自由基阴离子水平成正相关。产品内容缓冲液（ReagentA）毫升发光液（ReagentB）毫升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，发光液（ReagentB）严格避免光照；有效保证6月[详细]

  2018-11-08 10:00

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• CK-E植物线粒体呼吸链复合物IV（MRCC-IV）说明书

  CK-E植物线粒体呼吸链复合物IV(MRCC-IV)说明书[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 兔子线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸-辅酶Q还原酶）试剂盒使用说明书

  兔子线粒体呼吸链复合物II（琥珀酸-辅酶Q还原酶）试剂盒使用说明书[详细]

  2014-09-01 00:00

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• 纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂盒

  主要用途纯化线粒体氧化应激活性氧（ROS）高质荧光测定试剂是一种旨在通过透膜荧光染色剂氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯，在线粒体氧化条件下，产生荧光，来定量检测线粒体内活性氧族的生成和增加的权威而经典的技术方法。该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。可以被用于细胞凋亡、信号传递、衰老、代谢和营养学等的研究。产品严格无菌，即到即用，操作简易，活体检测，性能稳定。技术背景超氧自由基阴离子（superoxideradical；O2-）、过氧化氢（hydrogenperoxide；H2O2）、羟自由基或氢氧基（hydroxylradical；OH-）、过氧化基（peroxylradical；ROO-）、氢过氧自由基（hydroperoxyl；HOO）、烷氧自由基（alcoxylradical）、氮氧基（nitricOxide；NO-）、过氧亚硝基阴离子（peroxynitriteanion；ONOO-）次氯酸（hypochlorousacid；HOCl）、半醌自由基（semiquinoneradical）、单线态氧气（singletoxygen）等细胞内活性氧族（ReactiveOxygenSpecies；ROS）的产生和增多，将导致细胞衰老或凋亡。氯甲基二氯二氢荧光素二乙酯（6-chloromethyl-2',7'-dichlorodihydrofluoresceindiacetate,acetylester；CM－H2DCFDA）是取代二氯二氢荧光素二乙酯（2,7-dichlorodihydrofluorescindiacetate；DCFH-DA）的升级产品，一种完全自由通过细胞膜，并在细胞内长期滞留而不易外漏的染色剂。一旦被过氧化氢、羟自由基或氢氧基、过氧化基、次氯酸等氧化，便产生荧光。据此测定线粒体活性氧族的浓度。产品内容缓冲液（ReagentA）毫升补充液（ReagentB）毫升染色液（ReagentC）微升产品说明书1份保存方式保存在－20℃冰箱里，染色液（ReagentC），严格避免光照；有效保证12月用户自备培养箱：用于染色孵育（共聚焦）荧光显微镜：用于观察荧光线粒体荧光酶标仪：用于测定线粒体荧光强度实验步骤实验开始前，将－20℃冰箱里的试剂放进冰槽里融化，避免光照；同时从－80℃冰箱里取出待测的线粒体，[详细]

  2018-11-08 10:00

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• 细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书

  细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞线粒体内钙离子浓度荧光定量检测试剂是一种旨在通过线粒体钙离子特异性荧光探针Rhod-2-AM，与钙离子结合后，其荧光强度显著增强，在荧光分光光度仪下观察相对荧光峰值的变化，来测定细胞线粒体中总钙离子浓度的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种活体细胞（动物、人体等）内线粒体钙离子的浓度检测。产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定，检测敏感。技术背景钙是人体中的一种重要电介质和矿物质，占1150克。其中99％的钙以氟磷灰石钙（calciumfluorophosphateapatite）形式存在于骨组织中。非骨组织钙成分主要存在于细胞内。钙具有两种主要形式：一种是非弥散型蛋白结合钙，其构成约40％至50％的血清中的总钙含量；另一种为弥散型游离钙，其进一步分成具有活性的复合钙（complexedcalcium）和离子钙（ionizedcalcium）。钙对神经肌肉兴奋性（neuromuscularexcitability）、血液凝固、酶的激活、离子跨膜运输、释放神经传导介质、信使传导等方面起着重要作用。在细胞内，钙离子主要储存在线粒体和内质网等细胞器中。其中线粒体钙离子在调节线粒体代谢、保持线粒体的ATP产量达到细胞需求，维持细胞内环境钙离子平衡方面起着重要作用。线粒体钙的检测包括沉淀法、EDTA鳌合滴定法、火焰光度法（flamephotometry）、原子吸收分光光度法等技术，但容易受到钠、钾、磷酸盐、硫酸盐的干扰，或者受限于仪器的特殊的要求，以及需要线粒体纯化。Rhod-2-AM，罗丹明123（rhodamine123）的衍生产物，一种与钙离子结合产生荧光，Rhod-2-AM，进入细胞受到酯酶解离，同时其正电荷特性，特异性地聚集在线粒体里，由此用于测定线粒体内钙离子水平。在荧光分光光度仪下，激发波长550nm，散发波长590nm，来定量测定线粒体的钙浓度。产品内容清理液（ReagentA）10毫升染色液（ReagentB）30微升介导液（ReagentC）600微升饱和液（ReagentD）2毫升阴性液（ReagentE）2毫升裂解液（ReagentF）200微升产品说明书1份保存方式保存染色液（ReagentB）和介导液（ReagentC）在－20℃冰箱里，避免光照；其余的保存在4℃冰箱里；有效保证6月用户自备1.5毫升离心管：用于工作液配制的容器细胞培养箱：用于染色孵育黑色96孔板：用于样品操作的容器荧光酶标仪：用于荧光分析实验步骤测定准备设定好荧光酶标仪（22℃）：激发波长550nm，散发波长590nm测定开始前，将－20℃冰箱里的试剂盒中的染色液（ReagentB）室温下融化，然后分别移出30微升介导液（ReagentC）和1.5微升染色液（ReagentB）到新的1.5毫升离心管，标记为染色工作液，并放在暗室里备用。然后进行下列操作。二、荧光酶标仪检测准备1个黑色96孔板，标记为：细胞样品孔、空白对照孔（不含细胞）、Zda对照孔（含细胞）小心抽去细胞样品孔的培养液加入100微升清理液（ReagentA）到细胞样品孔里加入100微升饱和液（ReagentD）到Zda对照孔里加入100微升阴性液（ReagentE）到空白对照孔里分别加入10微升染色工作液到所有孔里轻轻摇动黑色96孔板，混匀放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟，避免光照小心抽去细胞样品孔里的上清液小心加入100微升清理液（ReagentA）到细胞样品孔里重复实验步骤9和10一次放进37℃细胞培养箱里孵育30分钟加入5微升裂解液（ReagentF）到Zda对照孔里放进37℃细胞培养箱里孵育15分钟即刻放进荧光酶标仪测读：获得相对荧光单位（relativefluorescenceunit；RFU）计算样品线粒体钙离子浓度【（样品RFU－空白对照孔RFU）÷（Zda对照孔RFU－样品RFU）】X570（纳摩尔；解离常数）注意事项本产品为20次操作操作时，须戴手套避免使用EDTA等处理样品孵育反应完成后即刻进行荧光测定如果待测样品浓度过高或过低，可以调整样品浓度检测敏感度可达纳摩尔级钙浓度范围可以使用荧光分光光度仪检测本公司提供系列钙生化检测试剂产品质量标准本产品经鉴定性能稳定本产品经鉴定检测敏感[详细]

  2018-11-19 10:00

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