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让蛋白质磷酸化清晰可见

本文由 艾普拜生物科技(苏州)有限公司 整理汇编

2019-10-18 10:46 652阅读次数

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WB 是检测和定量磷酸化蛋白质的重要实验方法,然而大家一直都说磷酸化蛋白 WB 不好做!WB 磷酸化蛋白曝不出条带的时候,会特别沮丧。Azure君在此给大家列出几点小建议,希望能帮助您改善一下实验结果。
1、样本是否表达:
查阅资料或通过预实验确定。
2、对照设置:
阳性和阴性对照。
总蛋白抗体对照,对于特定时间的特定样品,磷酸化和非磷酸化蛋白质的总和代表该特定蛋白质的总量。在相同的 WB 检测中, 磷酸化蛋白质的量增加通常伴随着非磷酸化蛋白质的降低。
3、内参设置:
根据实验选择合适的内参,如Actin、GAPDH 等

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