一种用于磷酸肽鉴定和磷酸化位点定位的新型自动化、高选择性磷酸肽富集方法

本文由 安捷伦科技（中国）有限公司 整理汇编

2020-11-23 10:43 451阅读次数

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• 一种用于磷酸肽鉴定和磷酸化位点定位的新型自动化、高选择性磷酸肽富集方法

  一种用于磷酸肽鉴定和磷酸化位点定位的新型自动化、高选择性磷酸肽富集方法[详细]

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  鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA检测试剂盒实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)水平。用纯化的鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)，再与HRP标记的鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)浓度。鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA检测试剂盒注意事项1．试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用，酶标包被板开封后如未用完，板条应装入密封袋中保存。2．浓洗涤液可能会有结晶析出，稀释时可在水浴中加温助溶，洗涤时不影响结果。3．各步加样均应使用加样器，并经常校对其准确性，以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内，如标本数量多，推荐使用排枪加样。4．请每次测定的同时做标准曲线，**做复孔。如标本中待测物质含量过高（样本OD值大于标准品孔**孔的OD值），请先用样品稀释液稀释一定倍数（n倍）后再测定，计算时请Z后乘以总稀释倍数（×n×5）。5．封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。6．底物请避光保存。7．严格按照说明书的操作进行，试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8．所有样品，洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9．本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异，以英文说明书为准。鸡蛋卵黄高磷蛋白磷酸肽(PPP)ELISA检测试剂盒保存条件及有效期1．试剂盒保存：；2-8℃。2．有效期：6个月[详细]

  2019-01-02 10:00

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  食品中降解糖的高灵敏高选择性检测方法[详细]

  2009-01-16 00:00

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• ADC 单抗药物的分子质量、氨基酸序列、糖基化位点鉴定

  一直以来，单克隆抗体被认为是具有高度特异性的靶向药物，其对肿瘤细胞的靶向性非常高”。ADC技术，就是在抗体蛋白的天然氨基酸上非定点偶联具有抗肿瘤作用的化疗药物（或称小分子药物），以增加单克隆抗体的LX、并降低小分子药物的毒性。相比于传统ADC技术，ADC抗体药则是通过定点嵌入非天然氨基酸，实现在单克隆抗体上定点、定量接入抗肿瘤的小分子药物，以此获得单一的ADC纯品。使得ZL更加安全、有效、定向。目前，在整个肿瘤药研究领域，ADC抗体药物已得到了业内的普遍认可。不少跨国药企相继投身到ADC药物的研究开发中。为了保证ADC单抗药物的安全性和有效性，以及对单抗药物生产过程进行实时监控，对于ADC单抗药物的整体分子质量的测定、氨基酸序列的鉴定、糖基化位点的确认、ADC药物结合位点的确认、二硫键的定位，糖链结构的解析等重要的ADC药物分析指标的测试和确认，越来越受到各大制药公司的关注。目前，随着生物质谱技术的不断发展和推广，基于生物质谱的单抗分析技术也开始全面、快速的建立起来。2.1.1仪器和试剂质谱仪器：赛默飞Q-Exactive（赛默飞世尔科技，美国）；色谱仪器：Accela液相色谱系统（赛默飞世尔科技，美国）；色谱柱：AgilentZorbax300,SB-C8,3μm，2.1×50mm；试剂：二次去离子水，色谱级乙腈，色谱级甲酸[详细]

  2018-08-10 10:58

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• 牛奶中氯霉素高选择性和高灵敏度筛查的QDa方法

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  2014-08-11 00:00

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• 高光谱暗场成像用于胞嘧啶修饰位点的量化研究

  表观遗传信息的调控和异常在众多的生理、病理中起着至关重要的作用。胞嘧啶衍生物可以调控基因表达。但是，单细胞水平上遗传信息标记物的定量评估受到了较低的时空分辨率和信噪比成像方法的限制。所以，很少有人对不同类型细胞和不同细胞阶段的这些胞嘧啶修饰位点进行表征研究。[详细]

  2022-05-11 11:13

  应用文章

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• TP432点位滴定仪

  应用 * 适用于测定酸碱滴定、氧化还原滴定、沉淀滴定、非水滴定； * 适用于电力、石油化工、制药、冶金、科研机构及高等院校等各行业各种成分的化学分析。 原理 电位滴定法是在滴定过程中通过测量电位变化以确定滴定终点的方法。电位滴定法是靠电极电位的突跃来指示滴定终点。在滴定到达终点前后， 滴液中的待测离子浓度往往连续变化n个数量级， 引起电位的突跃，被测成分的含量仍然通过消耗滴定剂的量来计算。使用不同的指示电极，电位滴定法可以进行酸碱滴定，氧化还原滴定，配合滴定和沉淀滴定。 功能特点 * 升降、控温、点火、检测、打印、冷却等自动进行。 * 具有自动吸液、自动注液、自动测定功能。 * 特制的精密计量泵确保滴定结果准确性。 * 具有校准Ph功能，可以测试溶液Ph。 * 三通转换阀及液路部分选用特殊材料制成，耐腐蚀性，可保证长期连续工作。 * 系统密封良好确保液路中不产生气泡。 技术指标 测量范围：0～±1999mV, 0～14 pH 馈液精度：0.02ml 测量精度：0.1%.F.SmV±0.01pH 控制精度：±3mV ±0.03pH 输入阻抗：>101[详细]

  2024-09-13 01:40

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• 极ng确修饰位点谱图库的建立与磷酸化蛋白质组的 DIA 解析

  极ng确修饰位点谱图库的建立与磷酸化蛋白质组的 DIA 解析[详细]

  2015-12-29 00:00

  选购指南

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• 城区道路点位噪声监测

  城区道路点位噪声监测[详细]

  2024-09-19 11:13

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• FTIR 法用于鉴定食用油和地沟油

  FTIR法用于鉴定食用油和地沟油[详细]

  2018-09-17 10:00

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  城区、道路、点位噪声监测系统[详细]

  2016-04-09 00:00

  安装说明

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• 检测蛋白磷酸化的方法

  检测蛋白磷酸化的方法[详细]

  2013-11-04 00:00

  报价单

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• 赛默飞极ng确修饰位点谱图库的建立与磷酸化 蛋白质组的 DIA 解析

  数据非依赖采集（Data-IndependentAcquisition,DIA）是当前Z热门的质谱采集技术之一，它以非目标的方式将质量范围分为若干窗口，依次并循环采集窗口内所有母离子的二级碎片[1,2]。DIA与SRM类似，也是基于子离子（transition）定量，相比传统蛋白质组学定量方法具有更好的选择性和更高的准确度。然而，目前DIA在翻译后修饰分析上仍有较大瓶颈。DIA依赖于DDA建立谱图库，而DDA数据在搜库鉴定时，修饰位点定位错误的概率较高，特别是磷酸化修饰发生在常见的S/T/Y上，若肽段含有2个或以上位置接近的S/T/Y，位点就容易找错。将含有错误位点信息的鉴定结果作为谱图库，就会导致翻译后修饰DIA解析结果的不可靠[3]。因此，DIA尚难用于大规模的翻译后修饰样本分析。针对修饰位点的打分算法使修饰位点的定位更加准确，ProteomeDiscoverer软件中整合的phosphoRS/ptmRS模块[4]和MaxQuant软件的算法[5]都可以实现位点可信度（SiteProbability）的计算，从而获得可靠的位点定位信息。本文基于上述软件对翻译后修饰DDA数据进行位点可信度分析，筛选具有准确位点定位的谱图建立谱图库，导入Skyline软件，进而实现可靠的翻译后修饰DIA解析。将该流程应用于磷酸化样本DIA数据分析，成功提取6401条高可信度的磷酸化肽段（Q<0.01），占谱图库肽段总数的98.4%，其中可用于准确定量的肽段（CV<20%）占86.9%，有效解决了翻译后修饰DIA定量的难题。产品关键词：OrbitrapFusion质谱仪[详细]

  2018-08-10 10:58

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• 一种高硅含量分析的**设备

  一种高硅含量分析的**设备[详细]

  2012-07-16 00:00

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• 一种新型的PIV技术用于测量多相流及其在测量两相气泡流

  一种新型的PIV技术用于测量多相流及其在测量两相气泡流[详细]

  2011-06-13 00:00

  操作手册

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