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植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)说明书
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植物查尔酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途植物查尔酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A缩合反应系统中释放出巯基辅酶A,使用Ellman试剂后,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,即采用比色法来测定植物裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)、胚胎叶(cotyledon)、上胚轴(epicotyl)等查尔酮合成酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景查尔酮合成酶(chalconesynthase;CHS;EC2.3.1.74)是聚酮体合成酶(polyketidesynthase;PKS)大家属中的一员,是启动类黄酮(flavonoid)化合物合成通路中**步关键酶,形成植物系统性获得性抗性(systematicacquiredresistance;SAR)的基础。查尔酮合成酶存在于细菌、植物和真菌中。在所有裸子植物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各种不同发育阶段中的不同组织中表达。查尔酮合成酶为同源二聚体,分子量为40至4000Kd,由环境压力,包括UV照射、伤口、病原菌袭击等诱导,通过丙二酰辅酶A脱羧基反应(decarboxylation)、与香豆酰辅酶缩合、聚酮体链延展(chainelongation)、中间产物环状化(cyclization)和芳构化(aromatization)产生查尔酮,一种类黄酮化合物前体,作为化学信使,由此生成各种后续继发性代谢化合物,参与抗病原微生物例如异黄酮植物保护素(isoflavonoidphytoalexin)、花青素花色素化、抵御环境压力(UV光保护)、花粉育性(pollenfertility)、抗氧化、共生根系结瘤(symbioticrootnodulation),以及作为抗生素、免疫YZ剂、抗肿瘤和抗真菌的药物作用。还在细菌的囊肿形成和阿米巴细胞分化中产生作用。基于香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A,在敏感性YZ剂木犀草素(Luteolin)存在与否的情况下,受到查尔酮合成酶的作用,缩合产生查尔酮,并释放出巯基辅酶A(CoA-SH),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量分析查尔酮合成酶的活性。查尔酮合成酶反应系统为:产品内容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升缓冲液(ReagentC)毫升反应液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升专性液(ReagentF)微升产品说明书
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植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)说明书
- 植物查尔酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途植物查尔酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量检测试剂是一种旨在通过香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A缩合反应系统中释放出巯基辅酶A,使用Ellman试剂后,产生黄色5-巯基-2-硝基苯甲酸产物吸光峰值的变化,即采用比色法来测定植物裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)、胚胎叶(cotyledon)、上胚轴(epicotyl)等查尔酮合成酶的活性检测。产品严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定。技术背景查尔酮合成酶(chalconesynthase;CHS;EC2.3.1.74)是聚酮体合成酶(polyketidesynthase;PKS)大家属中的一员,是启动类黄酮(flavonoid)化合物合成通路中**步关键酶,形成植物系统性获得性抗性(systematicacquiredresistance;SAR)的基础。查尔酮合成酶存在于细菌、植物和真菌中。在所有裸子植物(gymnosperm)和被子植物(angiosperm)的各种不同发育阶段中的不同组织中表达。查尔酮合成酶为同源二聚体,分子量为40至4000Kd,由环境压力,包括UV照射、伤口、病原菌袭击等诱导,通过丙二酰辅酶A脱羧基反应(decarboxylation)、与香豆酰辅酶缩合、聚酮体链延展(chainelongation)、中间产物环状化(cyclization)和芳构化(aromatization)产生查尔酮,一种类黄酮化合物前体,作为化学信使,由此生成各种后续继发性代谢化合物,参与抗病原微生物例如异黄酮植物保护素(isoflavonoidphytoalexin)、花青素花色素化、抵御环境压力(UV光保护)、花粉育性(pollenfertility)、抗氧化、共生根系结瘤(symbioticrootnodulation),以及作为抗生素、免疫YZ剂、抗肿瘤和抗真菌的药物作用。还在细菌的囊肿形成和阿米巴细胞分化中产生作用。基于香豆酰辅酶A和丙二酰辅酶A,在敏感性YZ剂木犀草素(Luteolin)存在与否的情况下,受到查尔酮合成酶的作用,缩合产生查尔酮,并释放出巯基辅酶A(CoA-SH),进而与Ellman试剂5,5-二硫基-双(2-硝基苯甲酸)[5,5,-dithiobis-(2-nitrobenzoicacid);DTNB]反应后,产生黄色的5-巯基-2-硝基苯甲酸(5-thio-2-nitrobenzoicacid;TNB),通过其吸收峰值的变化(412nm波长),来定量分析查尔酮合成酶的活性。查尔酮合成酶反应系统为:产品内容清理液(ReagentA)毫升裂解液(ReagentB)毫升缓冲液(ReagentC)毫升反应液(ReagentD)毫升底物液(ReagentE)毫升专性液(ReagentF)微升产品说明书[详细]
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2018-11-08 10:00
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植物查尔酮合成酶(chalcone synthase)活性比色法试剂盒
- 植物查尔酮合成酶(chalconesynthase)活性比色法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)[详细]
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2018-11-08 10:00
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植物查尔酮合酶(酶联免疫分析使用说明书
- 植物查尔酮合酶(酶联免疫分析使用目的:本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中查尔酮合酶(CHS)活性。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物查尔酮合酶(CHS)水平。用纯化的植物查尔酮合酶(CHS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入植物查尔酮合酶(CHS),再与HRP标记的查尔酮合酶(CHS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物查尔酮合酶(CHS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物查尔酮合酶(CHS)活性浓度。标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。植物查尔酮合酶(酶联免疫分析操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。80U/L5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液40U/L4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液20U/L3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液10U/L2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液5U/L1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。植物查尔酮合酶(酶联免疫分析操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-27 10:00
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上海沪峰植物蔗糖合成酶(SS)说明书
- 上海沪峰生物科技有限公司是一家集经销批发、招商代理的有限责任公司,是一家经国家相关部门批准注册的企业。主要经营ELISA试剂盒、细胞、血清、抗体、金标试剂盒、生物试剂、耗材、培养基、一抗、二抗、毒素、移液器等产品,产品畅销国内大部分地区,销售额逐年稳步提高。上海沪峰生物科技拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的服务,能够及时解决和满足客户的各方面的需求,与国内多家企业建立了良好的长期合作关系,在市场上树立了公司的良好信誉和形象。http://www.shhfsw.com/[详细]
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2024-09-28 07:04
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植物黄烷酮-3-羟化酶试剂盒说明书
- 植物黄烷酮-3-羟化酶(Flavanone-3-hydroxylase;F3H)活性酶连续反应光度法定量检测试剂盒产品说明书(中文版)主要用途植物黄烷酮-3-羟化酶(Flavanone-3-hydroxylase;F3H)活性酶连续反应光度法定量检测试剂是一种旨在使用黄烷酮-3-羟化酶、琥珀酸辅酶A合成酶、丙酮酸激酶和乳酸脱氢酶连续循环法反应系统,伴随的还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)的氧化反应,即采用光度法测定其氧化后峰值(NADH浓度)的变化,以此进行测算单位酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适合于各种植物组织,包括种子(seed)、叶片(leaf)、根(root)、胚胎叶(cotyledon)、上胚轴(epicotyl)等黄烷酮-3-羟化酶的活性检测。产品不含污染性蛋白酶,严格无菌,即到即用,操作简捷,性能稳定,反应优化,检测敏感。技术背景黄烷酮-3-羟化酶(Flavanone-3-hydroxylase;F3H;EC1.14.11.9),又称为黄烷酮-3-双加氧酶(Flavanone-3-dioxygenase),全称为黄烷酮-2-酮戊二酸:氧分子氧化还原酶(3-羟基化)(flavanone-2-oxoglutarate:oxygenoxidoreductase(3-hydroxylating)),属于氧化还原酶家族中一员,为可溶性非亚铁血红素性含铁2酮戊二酸依赖性双加氧酶(2-oxo-glutaratedependentdioxygenase;2-ODD),单体蛋白,催化黄烷酮,例如2S柚皮素(2Snaringenin)的立体选择性羟基化反应(stereospecifichydroxylation)为2R,3R二氢黄酮醇类(dihydroflavonol),例如2R,3R二氢山柰酚(2R,3Rdihydrokaempferol;DHK),是生物合成黄酮类、花青素(anthocyanidins)、儿茶素(catechins)等化合物的关键步骤,,从而调节类黄酮通路。基于底物柚皮素受到黄烷酮-3-羟化酶的催化,获得氧化,同时分解2-酮戊二酸,产生二氢山柰酚和琥珀酸,进而通过琥珀酸辅酶A合成酶(SuccinylCoAsynthetase)、丙酮酸激酶(pyruvatekinase;PK)和乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase;LDH)反应系统中,由还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(reducednicotinamideadeninedinucleotide;NADH)转化为氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(nicotinamideadeninedinucleotide;NAD),所产生的峰值变化(340nm),来定量分析黄烷酮-3-羟化酶的活性。其反应系统为:Flavanone-3-hydroxylaseNaringenin+2-oxoglutarate+O2→dihydrokaempterol+succinate+CO2SuccinylCoAsynthetaseSuccinate+CoA+ATP→SuccinylCoA+Pi+ADPpyruvatekinasePhosphoenolpyruvate+ADP→pyruvate+ATPlactatedehydrogenasepyruvate+NADH→lactate+NAD+(高吸收峰)(低吸收峰)产品内容清理液(ReagentA)60毫升裂解液(ReagentB)20毫升缓冲液(ReagentC)20毫升酶促液(ReagentD)400微升反应液(ReagentE)2毫升底物液(ReagentF)2毫升阴性液(ReagentG)1毫升产品说明书1份保存方式保存清理液(ReagentA)在4℃冰箱里,其余的保存在-20℃冰箱里,避免反复冻融;底物液(ReagentF),避免光照,有效保证6月[详细]
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2018-11-08 10:00
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植物脂酰辅酶A合成酶(ACS)试剂盒使用说明书
- 植物脂酰辅酶A合成酶(ACS)试剂盒使用说明书[详细]
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2014-03-26 00:00
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植物柠檬酸合成酶(CS)ELISA试剂盒实验使用说明书
- 植物柠檬酸合成酶(CS)ELISA试剂盒实验使用说明书本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。[详细]
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2023-12-15 14:17
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植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶联免疫分析试剂盒使用说明书
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2018-09-14 10:00
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糖磷酸合成酶(植物SPS)酶免说明书Elisa试剂盒
- 用于测定植物组织,细胞上清及相关液体样本中糖磷酸合成酶(SPS)的含量糖磷酸合成酶(植物SPS)酶免说明书Elisa试剂盒标准品稀释液:1.5ml×1瓶酶标试剂:3ml×1瓶\6ml×1瓶2-8℃保存糖磷酸合成酶(植物SPS)酶免说明书Elisa试剂盒组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。糖磷酸合成酶(植物SPS)酶免说明书Elisa试剂盒计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。广锐生物汇集Elisa试剂盒(种属标本:人、大鼠、小鼠、兔子、鸡、猪、牛、豚鼠、犬、马、猴、羊、各类植物等等)、标准品|对照品、抗体、培养基、试剂为一体的科研产品供应商,畅销国内各省市地区,拥有雄厚的实力、合理的价格和优良的技术服务,能够及时解决和满足客户的各方面的需求,是国家ZD实验室及国内各大院校长期指定供应商电话:021-6072333313671597285糖磷酸合成酶(植物SPS)酶免说明书Elisa试剂盒相关试剂:MousevonWillebrandFactor,vWFELISAKitMouseE-SelectinELISAkit牛大力(美丽崖豆藤),标准品,TLC法鉴别,2.0g,常温,避光小鼠结肠癌抗原定量(CCA)ELISA试剂盒重复性MouseNervegrowthfactor,NGFELISAkit人肾损伤分子1(Kim-1)ELISA试剂盒小鼠白介素1可溶性受体Ⅱ含量(IL-1sRⅡ)ELISA试剂盒重复性Ratcardiactranscriptionfactor-GATA4ELISAKit人寡聚蛋白(oligomeric)ELISA试剂盒RatorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit人elisa试剂盒常年优惠促销,人抗核仁纤维蛋白抗体ELISA试剂盒,(AFA/snoRNP/U3RNP)Elisa试剂盒Humancartilageoligomericmatrixprotein,COMPELISAKit大鼠羟脯氨酸检测含量(Hyp)ELISA试剂盒灵敏性CAMkit,植物(CAM)Elisa试剂盒Elisa试剂盒规格,96T/48T大鼠白介素16(IL-16)ELISA试剂盒CAS:141-95-7,丙二酸钠/丙二酸盐/丙二酸二钠盐/缩水苹果酸钠/Sodiummalonate,CP,99%,250克,RT小鼠elisa试剂盒,小鼠碳酸酐酶ELISA试剂盒,(CA)Elisa试剂盒CAS:7440-55-3,镓/金属镓/4,6-二硝基-2-仲丁基苯酚乙醇胺盐/Gallium,5N,10克,RTMouseFMS-liketyrosinekinase3,Flt3ELISAKitHumanCaspase12,Casp-12ELISAKitCAS:18598-63-5,L-半胱氨酸甲酯盐酸盐/L-盐酸半胱氨酸甲酯/L-半胱氨酸甲醇酯延酸盐/L-Cysteinemethylesterhydrochloride,BR,99%,5克,RTElisa试剂盒规格,96T/48TElisa试剂盒规格,96T/48T[详细]
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2018-10-23 10:30
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2018-10-01 10:01
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植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶联免疫分析试剂盒
- 植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶联免疫分析试剂盒本试剂盒仅供研究使用检测范围:96T10IU/L-240IU/L使用目的:本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中蔗糖磷酸合成酶(SPS)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)水平。用纯化的植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入植物蔗糖磷酸合成酶(SPS),再与HRP标记的蔗糖磷酸合成酶(SPS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)浓度。植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶联免疫分析试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(480IU/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶联免疫分析试剂盒操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。240IU/L5号标准品150l的原倍标准品加入150l标准品稀释液120IU/L4号标准品150l的5号标准品加入150l标准品稀释液60IU/L3号标准品150l的4号标准品加入150l标准品稀释液30IU/L2号标准品150l的3号标准品加入150l标准品稀释液15IU/L1号标准品150l的2号标准品加入150l标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50l,待测样品孔中先加样品稀释液40l,然后再加待测样品10l(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50l,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50l,再加入显色剂B50l,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50l,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。操作程序总结:计算以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶联免疫分析试剂盒注意事项1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照植物蔗糖磷酸合成酶(SPS)酶联免疫分析试剂盒说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-23 10:00
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植物糖磷酸合成酶(SPS)酶联免疫分析试剂盒使用说明
- 本试剂盒仅供研究使用。检测范围:96T10IU/L-250IU/L使用目的:本试剂盒用于测定植物组织,细胞及其它相关样本中糖磷酸合成酶(SPS)含量。实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中植物糖磷酸合成酶(SPS)水平。用纯化的植物糖磷酸合成酶(SPS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入植物糖磷酸合成酶(SPS),再与HRP标记的糖磷酸合成酶(SPS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的植物糖磷酸合成酶(SPS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中植物糖磷酸合成酶(SPS)浓度。试剂盒组成130倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7终止液6ml×1瓶2酶标试剂6ml×1瓶8标准品(480IU/L)0.5ml×1瓶3酶标包被板12孔×8条9标准品稀释液1.5ml×1瓶4样品稀释液6ml×1瓶10说明书1份5显色剂A液6ml×1瓶11封板膜2张6显色剂B液6ml×1/瓶12密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。[详细]
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2018-11-30 10:00
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大鼠一氧化氮合成酶(NOS)说明书
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2018-11-16 10:02
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昆虫脂肪酸合成酶(FAS)说明书活性
- www.biokanu.com昆虫脂肪酸合成酶(FAS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定昆虫血清,血浆及相关液体样本中脂肪酸合成酶(FAS)的活性。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中昆虫脂肪酸合成酶(FAS)水平。用纯化的昆虫脂肪酸合成酶(FAS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入脂肪酸合成酶(FAS),再与HRP标记的FAS抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的脂肪酸合成酶(FAS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中昆虫脂肪酸合成酶(FAS)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:72IU/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为48IU/L,32IU/L,16IU/L,8IU/L,4IU/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:2IU/L-50IU/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)说明书定性
- www.biokanu.com大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血液,血清及相关液体样本中胆固醇合成酶(HMG-COA)水平。实验原理:本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫法(ELISA)测定标本中大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)。用纯化的大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)抗体包被微孔板,制成固相抗体,可与样品中胆固醇合成酶(HMG-COA)相结合,经洗涤除去未结合的抗原和其他成分后再与HRP标记的胆固醇合成酶(HMG-COA)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),与CUTOFF值相比较,从而判定标本中大鼠胆固醇合成酶(HMG-COA)存在与否。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存阴性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存阳性对照0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.编号:将样品对应微孔按序编号,每板应设阴性对照2孔、阳性对照2孔、空白对照1孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)2.加样:分别在阴、阳性对照孔中加入阴性对照、阳性对照50μl。然后在待测样品孔先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液加蒸馏水至600ml后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。结果判定:试验有效性:阳性对照孔平均值≥1.00;阴性对照平均值≤0.10临界值(CUTOFF)计算:临界值=阴性对照孔平均值+0.15阴性判定:样品OD值<临界值(CUTOFF)者为胆固醇合成酶(HMG-COA)阴性阳性判定:样品OD值≥临界值(CUTOFF)者为胆固醇合成酶(HMG-COA)阳性注意事项1.操作严格按照说明书进行,本试剂不同批号组分不得混用。2.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。3.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。4.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。5.底物请避光保存。6.试验结果判定必须以酶标仪读数为准,使用双波长检测时,参考波长为630nm7.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。终止液为2M的硫酸,使用时必须注意安全。保存条件及有效期1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
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人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA Kit说明书
- 人皮质酮/肾上腺酮(CORT)ELISA Kit说明书[详细]
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2014-08-21 00:00
期刊论文
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鱼皮质酮/肾上腺酮(CORT)试剂盒进口说明书
- 检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被皮质酮/肾上腺酮(CORT)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的皮质酮/肾上腺酮(CORT)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。3000转离心30分钟取上清。3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。4.组织匀浆:将组织加入适量盐水捣碎。3000转离心10分钟[详细]
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2018-09-03 10:00
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大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶 (γ-GCS)说明书
- www.biokanu.com大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆及相关液体样本中γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)的活性。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)水平。用纯化的大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS),再与HRP标记的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中大鼠γ-谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-GCS)浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:900U/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为600U/L,400U/L,200U/L,100U/L,50U/L)。2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7.温育:操作同3。8.洗涤:操作同5。9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。4.请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。6.底物请避光保存。7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。9.本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.92以上。2.批内与批见应分别小于9%和15%检测范围:10U/L-600U/L保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-09-22 10:00
产品样册
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小鼠HMG-CoA合成酶(HMGS)ELISA试剂盒说明书
- 小鼠HMG-CoA合成酶(HMGS)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中小鼠HMG-CoA合成酶(HMGS)的活性。实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠HMG-CoA合成酶(HMGS)水平。用纯化的小鼠HMG-CoA合成酶(HMGS)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入HMG-CoA合成酶(HMGS),再与HRP标记的HMG-CoA合成酶(HMGS)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成Z终的黄色。颜色的深浅和样品中的HMG-CoA合成酶(HMGS)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠HMG-CoA合成酶(HMGS)活性浓度。试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:180U/mL0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液1.5ml×1瓶1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。6.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融.7.不能检测含NaN3的样品,因NaN3YZ辣根过氧化物酶的(HRP)活性。操作步骤:标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在**、第二孔中分别加标准品100μl,然后在**、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从**孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为120U/mL,80U/mL,40U/mL,20U/mL,10U/mL)。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品Z终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。温育:操作同3。洗涤:操作同5。显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。注意事项:试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间**控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。请每次测定的同时做标准曲线,**做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔**孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请Z后乘以总稀释倍数(×n×5)。封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。底物请避光保存。严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。本试剂不同批号组分不得混用。10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。计算:以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释倍数,即为样品的实际浓度。(此图仅供参考)试剂盒性能:1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.990以上。2.批内与批见应分别小于9%和11%检测范围:4.5U/mL-150U/mL保存条件及有效期:1.试剂盒保存:;2-8℃。2.有效期:6个月[详细]
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2018-11-07 14:16
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