临床质谱先锋应用专栏 | 快速检测26种类固醇激素

本期内容：北京和合医学诊断公司快速检测26种类固醇激素

动态平衡的类固醇激素谱

类固醇激素又称甾体激素，包括盐皮质激素、糖皮质激素和性激素，是身体发育、性成熟及新陈代谢所必须的物质。人体类固醇激素的升高或者降低与一些临床疾病，如先天性肾上腺增生、多囊卵巢综合症、肾上腺皮质功能不全等相关，是临床检验和诊断非常常见和重要的生物指标。

内源性类固醇激素在人体内主要由胆固醇经一系列酶催化代谢产生，在体内存在相互转化，不断产生或消耗，维持在一个动态的平衡状态。临床上需要准确检测每种类固醇激素的浓度并了解其相互之间的代谢通路，帮助医生对相关疾病进行判读和ZL监测。

图1. 类固醇激素的合测路径（来源于MAYO CLINIC网站）

临床检测方法概述

对于类固醇激素的相关检测，临床多习惯用免疫法来检测其中若干项，如，性激素六项，多为女性常规的生殖系统检查。但目前国内尚无完整的、统一的内分泌性激素测定值。且由于相关流水线试剂的来源，测定的方法，数据的计算，采用的单位不同，即使同一激素标本，各实验室所得结果也不完全相同。

其挑战主要存在于：

1. 灵敏度低

当样本浓度很低时（如儿童体内激素，女性体内雄激素，男性体内雌激素等），需要较大的样本量富集、纯化；

2. 适用性差

激素结构非常相似，具有相同的结构母核，常规免疫检测方法受限于抗体的交叉反应很难区分。待测物的抗体易与结构相似的内源性物质或代谢产物产生交叉反应，造成假阳性结果。早产儿、患病或处于应激状态的婴儿尤其容易出现假性升高的情况，而基因分型检测会耗费大量时间和金钱；

3. 分析效率低

常规临床方法通常1 次只能测定1 种物质，无法同时进行多种激素的定性和定量分析。而对于一些疾病的筛查，往往需要相关通路上尽可能多的激素来准确判定可能病因。

液相色谱串联质谱（LC-MS/MS）技术检测原理是基于待测物分子量和本身的化学结构，专属性强，能够很好地排除基质中类似结构物质的干扰。同时，LC-MS/MS 的灵敏度高，能够满足临床实验室大多数类固醇激素的检测要求。质谱技术的检测原理，允许其通过一次分析，同时追踪多种类固醇激素，有效节省人力物力，提高通量。

LC-MS/MS法检测26种类固醇激素

2021年和合诊断在Journal of Separation Science杂志 （IF 3.031）刊登了一篇封面文章，采用LC-MS/MS 平台对26种类固醇激素进行定量分析。

方法特点：

1. 覆盖度高

方法一针进样，同时追踪20种内源性和6种外源性类固醇激素，覆盖了内源性激素代谢通路的同时，加入了外源性激素药物的监测，对患者疾病及服药ZL状态，同步关注。

监测指标：17-羟基孕酮、皮质酮、11-脱氧皮质醇、21-脱氧皮质醇、11-脱氧皮质酮、雌酮、雌二醇、雌三醇、17-羟基孕烯醇酮、二氢睾酮、脱氢表雄酮、硫酸脱氢表雄酮、睾酮、孕烯醇酮、可的松、褪黑素、醛固酮、孕酮、雄烯二酮、皮质醇、曲安奈德、泼尼松龙、甲基泼尼松龙、氟米龙、地塞米松

2. 通量高

前处理采用沉淀蛋白结合固相萃取，可批量操作；通过C18色谱柱分离直接LC-MS/MS分析，10分钟即可出结果，有效提升通量。

3. 灵敏度高

方法有效覆盖不同激素的临床参考区间（MAYO 质谱法区间），满足人群样本检测需要。

关于和合诊断

和合诊断成立于2010年12月，是国家高新技术企业，致力于为全国各大医院提供第三方医学检验服务。和合诊断拥有大规模的临床“色谱/质谱检验技术平台”，可提供100余项检测项目，累计服务人次超过1000万，为全国2000余家二甲 级以上，500家以上三甲 级YL机构提供差异化检测服务。集团各实验室执行国际通用标准ISO15189，连续多年通过国家卫健委临检ZX、美国美国病理学会认证(CAP）、英国政府化学家实验室(LGC)等国内外室间质评。获得ZL与软件著作权200余项，参与并承担多项国 家级课题，与多家国家机构合作开展项目研究。

文末寄语

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