上新 | T4 RNA Ligase 2，环状RNA研究核心酶原料

图1. T4连接酶作用原理比较^[1]

T4 RNA Ligase 2，是一种依赖于ATP的双链RNA连接酶（double-strand RNA ligase, dsRNA Ligase），具有RNA链分子间和分子内连接活性，可连接双链RNA中的切刻，也可用于连接双链结构中RNA 3′羟基与DNA 5′磷酸基的切刻。与T4 RNA Ligase 1相比，该酶对双链RNA切刻的连接活性要明显高于对单链RNA的末端连接。

T4 RNA Ligase 2能够通过三步反应将相邻的3′羟基与5′磷酸多核苷酸连接起来，其机理如下：

将Yeasen和进口Supplier N*的T4 RNA Ligase 2按照不同投入量加入体系中对dsRNA底物进行连接，结果显示其能有效连接dsRNA底物，连接效果与进口Supplier N*相当。

将100 U T4 RNA Ligase 2分别与核酸底物一起孵育，琼脂糖凝胶电泳比较谱带变化。结果显示翌圣3个批次的T4 RNA Ligase 2均无核酸外切酶、切口酶、RNase残留。

图4. T4 RNA Ligase 2核酸外切酶、切口酶、RNase残留检测结果

参考文献: