生态环境部发布《土壤和沉积物的测定 高效液相色谱法》

　　为贯彻《中华人民共和国环境保护法》，保护环境，保障人体健康，规范土壤和沉积物中醛、酮类化合物的测定方法，制定本标准。本标准规定了测定土壤和沉积物中醛、酮类化合物的高效液相色谱法。

　　本标准适用于土壤和沉积物中甲醛、乙醛、丙 烯醛、丙酮、丙醛、丁烯醛、丁醛、苯甲醛、异戊醛、正戊醛、对-甲基苯甲醛、间-甲基苯甲醛、邻-甲基苯甲醛、正己醛、2,5-二甲基苯甲醛等15种醛、酮类化合物的测定。其他醛、酮类化合物通过方法验证，也可采用本方法测定。当取样量为10 g，定容体积为10 ml 时，方法检出限为0.02 mg/kg~0.06 mg/kg，测定下限为0.08mg/kg~0.24 mg/kg。

　　方法原理：

　　土壤和沉积物中的醛、酮类化合物被弱酸性缓冲溶液振荡提取。提取液在一定温度和pH 值下与2,4-二硝基苯肼(DNPH)发生衍生化反应，生成稳定有色的腙类化合物，经萃取浓缩后，用高效液相色谱仪分离，紫外检测器检测，保留时间定性，外标法定量。

　　仪器和设备：

　　1、高效液相色谱仪(HPLC)：具紫外检测器和梯度洗脱功能。

　　2、色谱柱：填料为ODS(十八烷基硅烷键合硅胶，C18)，250mm(长)4.6mm(内径)，粒径5.0μm，或其他等效色谱柱。

　　3、采样瓶：60 ml 或200 ml，具聚四氟乙烯-硅胶衬垫螺旋盖的棕色广口玻璃瓶。

　　4、恒温振荡器：温度精度为±2℃。

　　5、萃取设备：固相萃取装置或液液萃取装置。

　　6、浓缩设备：旋转蒸发装置或K-D 浓缩仪、氮吹浓缩仪等性能相当的设备。

　　7、天平：感量为0.01 g。

　　8、固相萃取柱：C18 或等效的萃取柱，规格为6 ml/1000 mg 或更大容量规格。

　　9、分液漏斗：250 ml，玻璃活塞不涂润滑油。

　　10、提取瓶：200 ml，具塞平底棕色玻璃瓶。

　　11、平底烧瓶：200 ml，具塞平底棕色玻璃烧瓶。

　　12、便携式冷藏箱：温度可达4℃以下。

　　13、一般实验室常用仪器和设备。

　　样品的采集和保存：

　　按照HJ/T 166 的相关规定进行土壤样品的采集和保存。按照HJ494的相关规定进行水体沉积物样品的采集。按GB17378.3的相关规定进行海洋沉积物样品的采集。样品采集后密闭贮存于预先洗净烘干的采样瓶(5.3)中，避光保存。如不能及时分析，于4℃以下冷藏，5d内完成衍生及萃取，衍生化提取物在7d内分析完毕。

　　液液萃取法：

　　将衍生后的溶液(6.4.2)转移至分液漏斗(5.9)中，加入1.5gNaCl(4.1)，分别用15ml和10ml二氯甲烷(4.8)分两次萃取，合并萃取液，萃取液经无水硫酸钠(4.2)脱水，用浓缩设备(5.6)浓缩至近干，更换溶剂为乙腈(4.9)，用乙腈准确定容至10ml，待测。

　　定性分析：

　　根据目标化合物的保留时间定性。必要时采用标准加入法、不同波长下的吸收比、紫外谱图扫描等方法辅助定性。