应用 | GB 31658.2-2021兽残处理方案（Copure® C18）

2022年Z 新版食品安全抽检实施细则更新了针对于猪、鸡肌肉、肝脏和鱼、虾可食性组织中氯霉素残留检测的检测方法——《GB 31658.2-2021 动物性食品中氯霉素残留量的测定 液相色谱-串联质谱法》。

逗点生物参照该标准进行试验，并优化了部分参数，建立了一份具有良好回收率及稳定性，能满足国标要求的SPE-HPLC-MS/MS方法，可供参考。

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样品提取

准确称取粉碎均匀的肉类样品5 g（精确至0.02 g）于干净离心管中，加内标工作液100 μL，加入10 mL 乙腈和10 mL 4% NaCl水溶液，涡旋提取10 min，8000 r/min离心10 min。

取出上清液于另一干净离心管，向离心管中加入10 mL正己烷，涡旋震荡1 mim，8000 r/min离心2 min，弃上清液，于离心管中加入8 mL水饱和的乙酸乙酯溶液，涡旋震荡2 min，8000 r/min离心2 min，取出上层清液，氮吹干，用5 mL 5%乙腈-水溶液复溶，待净化。

本方案所运用到的氮吹仪器

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02

样品净化

Copure® C18，500mg/3mL

活化：取固相萃取柱依次用5 mL甲醇，5 mL水进行活化；

上样：将上述待净化液加入固相萃取柱中；

淋洗：分别取6 mL水分两次淋洗固相萃取柱；

洗脱：加入8 mL甲醇进行洗脱，收集全部洗脱液，氮吹干，1 mL 50%甲醇水溶液复溶，过尼龙滤膜，上机。

03

标准曲线溶液的配制

内标CAP-D5工作液：50 ng/mL，氯霉素工作液10 ng/mL、50 ng/mL。

表1 标准溶液配制方法

04

仪器条件

（1）色谱条件

仪器：UPLC-MS/MS

（Thermo Fisher TSQ Endura）

色谱柱：Hypersil GOLD C18

 (2.1 mm×100 mm，1.9 μm)

 流动相：A：水  B：甲醇

 洗脱方式：梯度洗脱，见表2

 流速：0.3 mL/min

 柱温：30℃

 进样量：20 μL

表2 梯度洗脱程序

（2）质谱条件

离子源：HESI          电喷雾电压：3500 V

鞘气压力：40 arb      辅气压力：10 arb

离子传输管：380 ℃   辅气温度：350 ℃

表3 组分名称、保留时间

及特征离子一览表（*为定量离子）

05

实验结果

表4  氯霉素加标回收实验结果

图1 添加水平为0.1 μg/kg时

猪肉中氯霉素的总离子流图

图2 添加水平为0.1 μg/kg时

鸡肉中氯霉素的总离子流图

图3 添加水平为0.1 μg/kg时

虾肉中氯霉素的总离子流图

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