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多重检测应用热启动Taq酶Hieff UNICON<sup>®</sup> HotStart Taq DNA Polymerase,5U/μL

面议 (具体成交价以合同协议为准)
翌圣生物 2026-01-09 10:22:40
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产品详情:

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA PolymeraseHieff UNICON® Taq抗体(货号31301ES)和Hieff® Taq DNA Polymerase(货号10101ES)的混合产品。Hieff UNICON®Taq抗体与Hieff® Taq DNA Polymerase具有很高的亲和力,高温50℃处理30 min,依旧可以封闭Hieff® Taq DNA Polymerase的活性。本品在预变性温度下加热30 sec完全失活,释放出DNA聚合酶活性。使用该热启动Taq酶可以有效抑制引物非特异性退火导致的扩增。 

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase适用于热启动PCR和qPCR。本品中的Hieff® Taq DNA Polymerase是热稳定重组型DNA聚合酶,具有较高的模板亲和力,非常适合低拷贝模板的扩增。扩增产物具有3′-dA,可轻松克隆T载体。

 

产品组分

编号

组分

产品编号/规格

10729ES72

(250 U)

10729ES76

(500 U)

10729ES80

(1000 U)

10729ES92

(10000 U)

10729ES93

(25000 U)

10729

HotStart Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

50 μL

100 μL

200 μL

1 mL×2

1 mL×5


产品应用

低拷贝基因扩增、基因型鉴定

 

活性定义

用活性化的大马哈鱼精子DNA作为模板/引物,74℃,30 min内,摄入10 nmol的全核苷酸为酸性不溶物的活性定义为1个活性单位(U)。

 

运输与保存方法

冰袋运输。-20℃保存,有效期2年

 

PCR反应体系(50 μL)

组分

体积 (μL)

终浓度

ddH2O

to 50

-

2×Taq Buffer(含Mg2+、dNTP)

25

模板DNA

X

-

Forward primer (10 μM)

2

0.4 μM

Reverse primer (10 μM)

2

0.4 μM

Hieff UNICON® HotStart Taq DNA Polymerase (5 U/μL)

0.5

2.5 U/50 μL

【注】

1)试剂使用:各组分使用前需充分融化混匀。

2)聚合酶浓度:推荐使用2.5 U/50 μL。可以在1.25-5 U/50 μL之间进行优化。

3)Mg2+终浓度体系终浓度为2 mM。如有特殊需要,可用25 mM MgCl2,以0.2-0.5 mM为间隔向上摸索。

4不同模板的推荐使用量(50 μL反应体系)

模板种类

模板使用量

基因组DNA

50 ng-200 ng

质粒DNA

100 pg-20 ng

cDNA

1-5 μL (不超过反应体系的1/10)

 

PCR扩增程序

循环步骤

温度

时间

循环数

预变性

95℃

1 min

1

变性

95℃

10 sec

35-40

退火

60℃

20 sec

延伸

72℃

30 sec/kb

终延伸

72℃

10 min

1

【注】:

1)退火温度和时间:温度推荐使用50-60℃。退火温度过低会导致非特异性扩增。引物设计参考荧光定量引物标准。推荐退火时间设置为20 sec,可以在10-30 sec内调节。

2)延伸温度和时间:温度推荐使用72℃。时间推荐使用30 sec/kb。

3)扩增产物:请将PCR扩增产物放置于-20℃保存,防止DNA发生降解。

4扩增程序:本产品用于定量实验,可使用2步法程序扩增,去掉延伸步骤,退火和延伸合为一步,对应的时间常用30 sec或根据仪器型号设置,如Applied Biosystems 7300需用31 sec以上。

 

注意事项

为了您的安全和健康,请穿实验服并佩戴一次性手套操作。

 

相关产品

产品名称

货号

规格

Hieff® anti-Taq DNA Polymerase Antibody Taq酶单克隆抗体

31301ES60/80/90/92/93/94

100 µg/ 1 mg/ 5 mg/ 10 mg/ 100 mg/ 1000 mg

Hieff Unicon® Universal TaqMan multiplex qPCR master mix

11211ES03/09/61

1 mL/5 mL/100 mL

Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit

11213ES60/80/92

100T/1000T /10000 T

Hieff Unicon® V Universal Multiplex One Step RT-qPCR Probe Kit (UDG plus)

11214ES60/80/92

100T/1000T /10000 T

 

HB210917

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