豆芽中4种植物生长素的UPLC/MS/MS测定（QuEChERS）BJS 201703

【概述】

近些年国抽细则中新增不少项目检测方法。比如半固体调料中罗丹明B指定的测试方法为《BJS 201905 食品中罗丹明B的测定》；豆芽中4-氯苯氧乙酸钠和6-苄基腺嘌呤指定的测试方法为《BJS 201703 豆芽中植物生长调节剂的测定》；鸡肉中金刚烷胺新增方法《GB 31660.5-2019 动物性食品中金刚烷胺残留量的测定》；多种农残新增检测方法《GB 23200.113-2018 植物源性食品中208种农药及其代谢物残留量的测定》等等，针对这些新增方法，中检维康将会逐个推出应用方案。

   本次分享的方案是BJS 201703 豆芽中植物生长调节剂的测定，该方法使用QuEChERS方法进行提取和净化，可同时检测豆芽中的11种植物生长调节剂，QuEChERS方法操作简便，回收率佳，中检维康对赤霉素，6-苄基腺嘌呤，4-氯苯氧乙酸，2,4-二氯苯氧乙酸进行了验证，加25μg/kg, 回收率75%-95%。

豆芽中4种植物生长素的UPLC/MS/MS测定（QuEChERS）

《BJS 201703 豆芽中植物生长激素的测定》
一、样品提取
准确称取 10.0 g 经粉碎的豆芽置于50 mL离心管中，加入20 mL 含 1% 甲酸乙腈溶液，2500 rpm 涡旋混匀 5 min；然后加入 QuEChERS 萃取盐包(货号：Q050025 )，立即手动振摇 30s，涡旋 2min；再以 5000r/min 离心5min，使乙腈和水分层，上层乙腈层待净化。
二、样品净化
精密量取上层乙腈层5 mL置于 QuEChERS净化管(货号：Q015014 )15 mL净化管中，2500 rpm 涡旋混匀 2min，以 5000 r/min 离心5 min，移取上层清液4 mL于另一 15 mL 离心管中，45℃水浴氮吹至干，用甲醇定容至 1mL，过 0.22 µm 尼龙滤膜供上机测试。
三、标曲配制
称取空白豆芽样品 10.0 g 按照上述一、二步骤操作，作为空白基质提取液；分别精密量取一定量的混合标准液加入到空白基质提取液中，用甲醇定容至 1 mL，配制成适当浓度的基质混合标准工作溶液。
四、仪器条件
色谱条件
仪器：UPLC-MS/MS（Thermo Fisher TQS Endura）
色谱柱：OSD色谱柱 (2.1 mm×50 mm, 1.8 µm)
流动相：A：5 mmol/L 乙酸铵
        B：甲醇（0.1% 甲酸）
洗脱方式：梯度洗脱，见表 1
表 1 梯度洗脱程序

流速：0.3 mL/min 柱温：35℃ 进样量：5 µL
质谱条件
离子源：HESI 电喷雾电压：3500 V
鞘气压力：35 arb 辅气压力：3 arb
离子传输管：380℃ 辅气温度：420℃

表 2 组分名称、保留时间及特征离子一览表（* 为定量离子）

五、实验结果
表 3 豆芽中 4 种植物生长激素加标回收结果（25.0 µg/kg）

豆芽中植物生长激素检测色谱图如下：

从上至下出峰顺序依次为：4- 氯苯氧乙酸、2,4- 二氯苯氧乙酸、6- 苄基腺嘌呤、赤霉素。

注意事项：
1. 该实验采用 UPLC/MS/MS 检测，对部分目标物有基质抑制效应，如 6- 苄基腺嘌呤，建议配制基质混合标准工作液进行定量，校正回收率。
2. 在标准《BJS 201703》中，只取 4 mL 提取液进行净化，离心后取全部净化液氮吹复溶，但在实际操作中，离心后实际氮吹复溶的净化液体积不到 4 mL，会造成检测结果偏低，建议取 5 mL 提取液净化，再精密量取 4 mL 净化液氮吹复溶

【仪器/耗材清单】