2025-02-01 10:59:39原位电子显微镜
原位电子显微镜是一种能够在保持样品原始状态的同时,对其进行实时、高分辨成像与分析的高端科研仪器。它结合了电子显微镜的高分辨率成像能力与原位实验技术,能够在不同环境条件下(如加热、加载、化学反应等)直接观察样品的变化过程,揭示材料的微观结构与性能之间的关系。该技术在材料科学、化学、物理学等领域具有广泛应用,为科学研究提供了强有力的工具,有助于深入理解材料的本质特性和反应机理。

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2023-02-23 13:15:20病毒研究 | 电子显微镜大显身手
认识病毒做好科学防护日立电镜大显身手PART.01认识病毒 诺如病毒可能引起急性肠胃炎的 一种病毒 《试验样品提供者》 日本国立感染症研究所 客座研究员Etsuko Utagawa老师诺如病毒,又称诺瓦克病毒是人类杯状病毒科属的一种病毒。是一组形态相似、抗原性略有不同的病毒颗粒。诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,全年均可发生感染,感染对象主要是成人和学龄儿童,寒冷季节呈现高发。诺如病毒感染性腹泻在全世界范围内均有流行,全年均可发生感染,感染对象主要是成人和学龄儿童,寒冷季节呈现高发。甲型H3N2流感病毒与普通的感冒相比, 传染能力较强,甲型H3N2流感是一种由粘病毒引起的呼吸系统疾病,可以通过多种动物的呼吸道传播(狗,鸡,鸭等),患者多表现出普通流行性感冒的症状,有时会出现腹泻和呕吐。腺病毒可能导致结膜炎、 肺炎等的一种病毒PART.02导致禽流感、诺如病毒等疾病的罪魁祸首即病毒,它的大小仅为30〜 150纳米(1纳米:十亿分之一米),只有通过电子显微镜才能观察到。 电子显微镜在这些病毒的治 疗方案研究和药品研发方面,发挥着十分重要的作用。PART.03日常生活如何做好科学防护合理佩戴口罩出入医院、地铁、公交、商场等公共场所要佩戴口罩。如果患有传染性疾病,外出时更应该佩戴口罩,同时与他人保持至少1米以上距离。讲好个人卫生保持工作、生活场所卫生,勤换、勤洗、勤晒衣服、被褥。不随地吐痰,个人卫生用品切勿混用。加强锻炼,规律作息春天是运动锻炼的好时机,积极参加体育运动、经常锻炼,可以有效增强抵抗力。同时,在工作和生活中要注意劳逸结合,保证充足的睡眠,对提高自身的抵抗力也相当重要。
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2023-04-26 16:38:54扫描电子显微镜的基本原理(一)
自1965年第 一台商品扫描电镜问世以来,经过50多年的不断改进,扫描电镜的分辨率已经大大提高,而且大多数扫描电镜都能与X射线能谱仪等附件或探测器组合,成为一种多功能的电子显微仪器。在材料领域中,扫描电镜发挥着极其重要的作用,可广泛应用于各种材料的形态结构、界面状况、损伤机制及材料性能预测等方面的研究,如图1所示的纳克微束FE-1050系列场发射扫描电镜。图1 纳克微束FE-1050系列场发射扫描电镜场发射扫描电镜组成结构可分为镜体和电源电路系统两部分,镜体部分由电子光学系统、信号收集和显示系统以及真空系统组成,电源电路系统为单一结构组成。1.1 电子光学系统由电子枪、电磁透镜、扫描线圈和样品室等部件组成。其作用是用来获得扫描电子束,作为信号的激发源。为了获得较高的信号强度和图像分辨率,扫描电子束应具有较高的亮度和尽可能小的束斑直径。1.2 信号收集检测样品在入射电子作用下产生的物理信号,然后经视频放大作为显像系统的调制信号。1.3 真空系统真空系统的作用是为保证电子光学系统正常工作,防止样品污染,一般情况下要求保持10-4~10-5Torr的真空度。1.4 电源电路系统电源系统由稳压,稳流及相应的安全保护电路所组成,其作用是提供扫描电镜各部分所需的电源。图3为扫描电镜工作原理示意图,具体如下:由电子枪发出的电子束在加速电压(通常200V~30kV)的作用下,经过两三个电磁透镜组成的电子光学系统,电子束被聚成纳米尺度的束斑聚焦到试样表面。与显示器扫描同步的电子光学镜筒中的扫描线圈控制电子束,在试样表面的微小区域内进行逐点逐行扫描。由于高能电子束与试样相互作用,从试样中发射出各种信号(如二次电子、背散射电子、X射线、俄歇电子、阴极荧光、吸收电子等)。图3 扫描电镜的工作原理示意图这些信号被相应的探测器接收,经过放大器、调制解调器处理后,在显示器相应位置显示不同的亮度,形成符合人类观察习惯的二维形貌图像或者其他可以理解的反差机制图像。由于图像显示器的像素尺寸远大于电子束斑尺寸,且显示器的像素尺寸小于等于人类肉眼通常的分辨率,显示器上的图像相当于把试样上相应的微小区域进行了放大,而显示图像有效放大倍数的限度取决于扫描电镜分辨率的水平。早期输出模拟图像主要采用高分辨照相管,用单反相机直接逐点记录在胶片上,然后冲洗相片。随着电子技术和计算机技术的发展,如今扫描电镜的成像实现了数字化图像,模拟图像电镜已经被数字电镜取代。扫描电镜是科技领域应用最多的微观组织和表面形貌观察设备,了解扫描电镜的工作原理及其应用方法,有助于在科学研究中利用好扫描电镜这个工具,对样品进行全面细致的研究。转载文章均出于非盈利性的教育和科研目的,如稿件涉及版权等问题,请立即联系我们,我们会予以更改或删除相关文章,保证您的权益。
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2022-12-06 13:04:21探秘肿瘤微环境,原位“看透”细胞因子
细胞因子是肿瘤微环境(Tumor Microenvironment,TME)中细胞通讯的关键介质,在癌症的发生、发展、治 疗和预后等多个方面发挥重要作用。在过去的 40 年中,细胞因子和细胞因子受体作为癌症靶点或癌症治 疗方法得到了广泛的研究。目前公认的临床前治 疗策略为增强干扰素和白细胞介素(包括 IL-2 ,IL-7 ,IL-12 和 IL-15 )的生长抑 制和免疫刺激作用,或抑 制细胞因子(如 TNF ,IL-1β 和 IL-6 )的炎症和促进肿瘤的作用[1]。图 1 . 细胞因子在肿瘤微环境中的作用特定细胞因子的表达也与肿瘤细胞的高存活率和高转移性密切相关。其中促炎细胞因子 IL-6 和 IL-8 与多种癌症相关,包括淋巴瘤、黑色素瘤、乳腺癌、前列腺癌和结肠直肠癌等 [2,3]。因此,分析细胞因子的表达是一种重要的诊断工具和预测癌症预后的关键因素。非放射性的 RNA 原位杂交技术(ViewRNA ISH)是一种高灵敏度的检测细胞因子表达的有效方法,并且可以对 1 至 4 个 mRNA 目标进行多重分析。检测原理如下图所示:图 2 .  ViewRNA ISH 检测原理安捷伦BioTek Cytation 5 多功能细胞成像微孔板检测系统,可容纳多达四个荧光通道同时成像,快速并出色地成多色荧光成像。仪器配备的高内涵分析软件可自动计算细胞内 RNA 的表达水平。Cytation 5 活细胞成像工作站结合ViewRNA ISH,为细胞因子研究提供了一种高效率、高灵敏度和可重复的检测方法。实验案例分享 实验一.细胞因子mRNA的成像和分析 为研究细胞因子mRNA 在不同营养条件下的表达情况,设置两组对照实验。阳性对照细胞培养于完全培养基中,而阴性对照细胞经过 18 小时的血清饥饿处理。随后加入 ViewRNA 探针以标记 IL-6 、IL-8 和 ACTB mRNA ,在Cytation 5 上分别使用 RFP 、GFP 、Cy5 和 DAPI 通道对探针进行成像完成 ISH 细胞分析。图像结果表明:细胞因子mRNA 的表达在营养匮乏的条件下会显著降低。图 3 . 阳性和阴性对照组成像。HCT116 放大 20 倍图像作为( A )阳性对照和( B )阴性对照。MDA-MB-231 细胞放大 40 倍的图像作为( C )阳性对照和( D )阴性对照。蓝色:DAPI 染色的细胞核;绿色:标记 IL-8 mRNA ;橙色:标记 IL-6 mRNA ;红色:标记 ACTB mRNA 。接下来为了定量分析细胞因子表达,首先在 Cytation 5 的 DAPI 通道下进行细胞核计数,以确定每孔的细胞数量(图 4A )。然后分别在GFP 、RFP 通道进行细胞因子探针( IL-6 或 IL-8 )的荧光信号分析(图 4B )。通过细胞荧光信号的比率评估不同实验条件下的细胞因子表达(图 5 )。图 4 . 每个细胞的荧光信号分析。( A ) 使用 Agilent-BioTek Gen5 软件进行细胞分析圈选出 DAPI 标记的细胞核;( B ) 荧光标记的 IL-8 信号的图像分析。如图 5 所示,使用 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 这一组合准确的量化了细胞内 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表达。图 5 . MDA-MB-231 细胞中 IL-8 表达和 HCT116 细胞中 IL-6 表达,并以细胞数目进行校正。 实验二.诱导细胞因子 mRNA 的表达 使用不同剂量的 IL-1β 刺激 DU145 细胞,以分析细胞因子的 mRNA 的表达(图6)。图 7 结果显示:虽然 IL-6 和 IL-8 的 mRNA 表达增加,但 IL-8 的表达变化更为显著,这与先前研究结果一致[4]。IL-1β 的最 高剂量下,这两种细胞因子的表达减少则是由于细胞毒性。这验证了该检测方法的可行性与稳定性。图 6 . 不同浓度的 IL-1β 刺激下的 IL-6 、IL-8 和 ACTB 荧光 mRNA 探针信号 ( A ) 0 ng/mL;( B ) 0.02 ng/mL ;0.128 ng/mL;( D ) 0.8 ng/mL。蓝色:DAPI染色的细胞核;绿色:标记的IL-8 mRNA;橙色:标记的 IL-6 mRNA ;红色:标记的 ACTB mRNA 。图 7 . 不同浓度的 IL-1β 刺激下 DU145 细胞中 IL-6 和 IL-8 mRNA 的表达。 实验三.抑 制细胞因子 mRNA 的表达 研究表明丝裂原活化蛋白激酶( MAPK )可调节 IL-8 ,并证明用 MAPK/ERK 抑 制剂 U 0126 治 疗可减少 DU145 和 MDA-MB-231 细胞中的炎症细胞因子[4,5]。为了确认这一现象并验证 ViewRNA ISH 和 Cytation 5 这一组合的能力,将不同浓度的 U 0126 加入到每种细胞类型中孵育 30 分钟。然后用 1 ng/mL 的 IL-1β 刺激 DU145 细胞达 3 小时,而 MDA-MB-231 细胞未被刺激。使用 GFP 和 RFP 通道进行细胞计数和图像分析以评估在 U 0126 治 疗后 IL-8 和 IL-6 细胞因子 mRNA 的表达。采集的图像(图 8 )和计算的荧光信号强度 (图 9 )证实了 U 0126 的抑 制作用。此外,也验证了该方法的灵敏度,可以准确识别给予抑 制剂后 mRNA 的表达变化。图 8. U 0126 抑 制 IL-8 mRNA 的表达。图像显示了在不同浓度的 U 0126 处理后 ( A-E ) MDA-MB-231 细胞内 IL-6 、IL-8 和 ACTB 荧光 mRNA 探针信号;( F-J ) 为 DU145 细胞。蓝色:DAPI 染色的细胞核;绿色:标记的 IL-8 mRNA ;橙色:标记的 IL-6 mRNA ;红色:标记的 ACTB mRNA 。图 9 . U 0126 治疗后 IL-8 和 IL-6 mRNA 在 MDA-MB-231 和 DU 145 细胞中的表达结 语ThermoFisher 的 ViewRNA ISH 细胞分析试剂盒和探针提供一种灵敏的方法来检测 mRNA 表达。该方法在安捷伦BioTek Cytation 5 细胞成像系统的加持下得以更更快地采集多荧光通道的图像,并更精 准的计算出每一个细胞的荧光信号强度。这种检测、成像和分析的完 美结合提供了一种灵敏、灵活和高通量的方法用以检测细胞因子 mRNA 的表达。参考文献:[1] Propper DJ, Balkwill FR. Harnessing cytokines and chemokines for cancer therapy. Nat Rev Clin Oncol. 2022 Apr;19(4):237-253.[2] Kampan NC, Xiang SD, McNally OM, Stephens AN, Quinn MA, Plebanski M. Immunotherapeutic Interleukin-6 or Interleukin-6 Receptor Blockade in Cancer: Challenges and Opportunities. Curr Med Chem. 2018;25(36):4785-4806.[3] Vecchi L, Mota STS, Zóia MAP, Martins IC, de Souza JB, Santos TG, Beserra AO, de Andrade VP, Goulart LR, Araújo TG. Interleukin-6 Signaling in Triple Negative Breast Cancer Cells Elicits the Annexin A1/Formyl Peptide Receptor 1 Axis and Affects the Tumor Microenvironment. Cells. 2022 May 20;11(10):1705.[4] Kooijman R, Himpe E, Potikanond S, Coppens A. Regulation of interleukin-8 expression in human prostate cancer cells by insulin-like growth factor-I and inflammatory cytokines. Growth Horm IGF Res. 2007 Oct;17(5):383-91.[5] Chelouche-Lev D, Miller CP, Tellez C, Ruiz M, Bar-Eli M, Price JE. Different signalling pathways regulate VEGF and IL-8 expression in breast cancer: implications for therapy. Eur J Cancer. 2004 Nov;40(16):2509-18. 
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2023-04-12 16:50:58焦耳加热装置-焦耳热加热器-合肥原位科技
合肥原位科技焦耳加热装置,针对导电材料,科学家可利用其自身的焦耳效应,对其施加电气环境;针对非导电材料,则可通过我司配备的各类耐高温极速加热样品台进行加热,从而使材料在极短的时间内(0~10 S)达到极高的温度(1000~3000 ℃),升温速率最快可达到10000k/s。通过对材料的极速升温,可考察材料在极端环境、剧烈热震情况下的物性改变。该产品目前广泛应用在电池、催化、陶瓷、金属材料等领域,可通过极速升降温制备纳米尺度颗粒,单原子催化剂,高熵合金等。装置可定制电气环境及真空系统。配件包含:控制柜、真空腔、电极、真空泵、高温样品台、测温探头、适配线缆。合肥原位科技有限公司已构建原位表征系统解决方案(含测试)、催化剂评价装置及焦耳加热装置三大主营产品体系,可满足众多用户对于多环境原位表征的需求,同时为客户提供原位测试工作。目前已与国内270余家知名高校、科研单位建立了各类联络机制。联系我们,请登录“合肥原位科技有限公司”,欢迎咨询。
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2022-12-04 20:10:14光 气“在线产生原位消耗”——连续光化学反应
欢迎您扫描二维码获取资料研究背景在连续流工艺中,原料化合物在极小的空间内进行快速混合和换热,并在精确控制反应温度、压力的情况下,在极短的时间内完成反应。因此,对于常规下需要小心处理的反应体系,如产生剧烈放热、爆炸风险高的反应(自由基反应,光化学反应等)或使用剧毒化学品的反应,连续流反应系统适用性更高。光 气的连续在线制备光 气(COCl2)是一种非常重要的有机中间体,具有很高的反应活性,但同时毒性极高。本文作者研究了一种新的流动光化学方法,以CHCl3和氧气(O2)在光照下在线制备COCl2,获得96%的收率。这个连续流动反应系统可以合成有价值的氯甲酸酯,碳酸酯和聚碳酸酯。图1. 反应流程及装置图如上图所示,反应器由12个石英玻璃管和一个40 W的低压水银灯作组成,总持液体积12.1ml。氯仿(CHCl3) 通过注射泵注入,氧气(O2)通过质量流量控制器(MFC)输送,两股物料混合时并伴有90℃加热至气态,混合气体进入光化学反应器中(反应器温度50℃),在一定波长下,在线生成光 气,然后进一步与醇类底物进行反应得到目标产物。研究过程一.工艺参数筛选作者以正丁醇为底物筛选出光 气的最 优反应条件,从反应器出口得到的光 气进一步与丁醇反应,得到产物1a和2a,并通过核磁来计算反应收率。筛选条件时,通过控制氯仿和氧气的物料流速来调整反应时间(exposure time)以及反应配比,得到的结果如下图所示。表1.工艺参数筛选实验结果二. 半连续方式进行底物拓展在筛选出最 优的制备光 气条件后,作者尝试不同醇类作为底物,以半连续的方式(光 气采取连续流反应制备,碳酸酯采取釜式搅拌制备)进行碳酸酯的合成,均获得了不错的收率,其中部分底物收率最 高可达98%,结果如下。图2. 半连续反应流程图三. 全连续方式制备碳酸酯作者进一步将整个系统构建为全连续化,在有/无溶剂,有/无有机碱以及不同有机碱的体系下拓展了反应底物,结果如下。表2.全连续制备碳酸脂结果可以看出,将整个系统整合成全连续过程,可以达到较好的收率。全连续化的实现也能大大增加化学反应的可靠性,稳定性和安全性。总结通过连续流光化学反应器在线制备光 气是可行的;结合半连续和全连续反应系统,能成功地完成各类碳酸酯和氯甲酸酯的合成。参考文献:Org. Process Res. Dev,November 11, 2022
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