你是否遇到过以下难题？
从复杂的生物样品中分离出特定目标蛋白？
获得高浓度的目标蛋白以便进行后续分析？
别担心，Biacore 1 S+和Biacore 1 K + SPR系统的“Inject and elute”垂钓功能模块可以帮你轻松解决这些问题！（Biacore T200机型也含有此功能模块）
什么是“Inject and elute”？
“Inject and elute”是一个强大的功能模块，它可以用来从传感器芯片的配体上洗脱结合的分析物，并将其收集到目标样品管中。通过重复的“上样-洗脱-回收循环”，可以将目标组分从复杂的样品溶液中“钓出”，并显著提高其浓度，从而方便进行后续的成分鉴定及分析。
图1：“Inject and elute”垂钓实验的常规参数设定
图2：“Inject and elute”垂钓方案流程图【1】
实验中的关键试剂整理
Deposition solution：
用于中和回收至样品管中的样品，保证样品处于中性且温和的缓冲液环境，体积一般设置为10 μL；
Analyte solution：
自行获取的样品混合液（例如细胞裂解液、组织悬液或复方制剂。一般建议对样本进行离心、过滤、稀释处理后再进样，保持溶液澄清透明可溶）；
Wash solution：
清洗非反应表面的流路系统，用于清洗设备管路里非特异吸附的物质；
Eluent solution：
用于将芯片上结合组分洗脱下来的试剂。一般设置在位孵育20-1800 s，以确保结合组分能完全洗脱。
“Inject and elute”案例盘点
黄金钓手Biacore｜小功能，大应用
Easy Biacore系列6 | 垂钓篇
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这篇Nature上的WB图片怎么有点怪？
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“Inject and elute”的优势
高效分离：从复杂的生物样品中分离出特定目标组分；
高浓度收集：通过重复循环，获得高浓度的目标组分；
保持活性：选择合适的洗脱条件，可以最大程度地保持洗脱蛋白的结合活性；
操作简单：Biacore Insight Control Software提供用户友好的界面，操作简单，易上手；
如何选择合适的实验条件？
选择高效的Deposition solution、Wash solution和Eluent solution是实验成功的关键。
Biacore技术团队提供了针对蛋白质-蛋白质相互作用和蛋白质-小分子相互作用的常见洗脱条件（见下方两个表格），可以作为选择实验条件的参考。建议尽可能选择温和的洗脱条件，并考虑使用较长的孵育时间以提高洗脱效率。
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参考文献：
【1】 Rong Fu, Peng Yang, Zongwei Li, Wen Liu, Sajid Amin and Zhuoyu Li. “Avenanthramide A triggers potent ROSmediated anti-tumor effects in colorectal cancer by directly targeting DDX3”. Cell Death & Disease (2019) 10:593
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